Как вырастить опята в домашних условиях пошагово, грибы на мицелии

Сейчас стало модно выращивать дома или на огороде грибы. Опята – это самый популярный вариант для этого.

Они неприхотливые, быстро растут, не занимают много места. Особых условий для грибного огорода не требуется.

Многих привлекает экономичность и простота процесса, с помощью которого можно получить хороший урожай вкусных питательных грибов. Но нужно сначала разобраться, как вырастить опята в домашних условиях. Есть определенные правила и специальная технология, без соблюдения которых урожая может не получиться.

Сорта опят для самостоятельного выращивания

Среди всех съедобных грибов опята самые популярные. Они встречаются почти везде. В средней полосе это самый распространенный гриб. Он ценится за приятные вкусоароматические, а также питательные качества.

В этом грибе содержится много витаминов, калия, фосфора, железа и других минералов, он способен предотвращать раковые заболевания.

При регулярном употреблении опята укрепляют иммунитет, нормализуют гормональный фон, улучшают работу сердца и сосудов.

Опята – это самые подходящие грибы для выращивания в домашних условиях. Они неприхотливые, вырастают быстро и получаются вкусными. Но чтобы не возникло проблем, нужно разобраться, какой выбрать сорт. Есть несколько более пригодных для самостоятельного выращивания.

1. Чаще всего выбирают зимний опенок или фламмулину. Для его проращивания не требуется много места или материальных вложений. У этого сорта гладкая коричневатая шляпка и кремовая мякоть. Он может плодоносить всю зиму.
2. Летний опенок тоже выращивать легко, но для него требуются особые условия. Растет он на пнях или мертвых деревьях. Характерные особенности – чешуйки на ножке, кремово-коричневые пластинки и медовый цвет шляпки.
3. Тополиный опенок ценится за необычный ореховый привкус, напоминающий белые грибы. Его несложно выращивать, но после срезания он почти не хранится.
4. Белый мраморный опенок считается деликатесом, похожим на трюфели. У него ценные питательные качества, есть лечебные свойства. Выращивать его легко, плодоносит в прохладное время года.

Помимо опят, популярно выращивать дома шампиньоны или вешенки.

Какие условия необходимы для выращивания опят

Даже если выбрать подходящий сорт, найти пенек и правильно заселить его мицелием, урожая можно не дождаться. Чтобы вырастить опята, требуются особые условия. Их можно сажать на грядке, балконе или подоконнике.

Если грибной огород размещается на участке, место необходимо выбирать под деревьями или около зданий, чтобы была тень. Очень важно, чтобы солнце туда не проникало и не пересушивало грибницу. На улице высаживать опята можно с ранней весны до конца лета.

Есть несколько условий для их успешного выращивания:

• температура 10-15°;
• влажность 70-80%;
• обязательная вентиляция;
• отсутствие прямых солнечных лучей;
• равномерное освещение.

Выбор помещения

Дома выращивать опята можно круглый год.

Нужно только правильно выбрать место, где получится создать нужные им условия. Рекомендуется выделить для грибов отдельное помещение площадью больше 10 м2, поддерживать там необходимую температуру и влажность. Подходит для этого подвал, балкон или теплица.

Самое главное –держать в этом помещении влажность от 80%. Зимой температура должна быть 10-15°, а летом – не более 25˚. Важно устроить вентиляцию, чтобы было постоянное проветривание. Когда грибы растут, выделяется углекислый газ, его нужно удалять. Освещение нужно, но не обязательно. Опята могут расти без света, но получатся белыми.

Получение посевного материала

Материал, из которого опята будут расти, можно купить в садоводческом магазине или найти самостоятельно в лесу. Берут кусочки гриба или пораженного грибницей пня. При самостоятельном сборе посевного материала нужно выбрать зрелые не червивые грибы со шляпкой диаметром от 10 см. Пластинки должны быть темными. Вместе с грибами желательно взять немного древесины с грибницей.

Найти такой участок пня или бревна несложно. На нем видны белые нити и явно заметен грибной аромат. Грибницу легко найти на старых пнях, упавших деревьях.

В магазинах можно купить мицелий опят. Он продается в зернах или палочках. Палочки больше подходят для выращивания на бревнах или пеньках. Чтобы мицелий взошел, покупать его нужно у проверенного производителя, в крупных магазинах, где его правильно хранят. Важно проверить срок годности, желательно также осмотреть мицелий, понюхать, чтобы он не был заражен плесенью.

Способы выращивания

Кроме выбора места для посадки и посевного материала, нужно определиться со способом выращивания. Опята сажают дома или на огороде, в теплице или мешках, банках или на пнях. У каждого способа есть свои особенности.

В мешках

Легко вырастить эти грибы в мешках, заполненных субстратом. Подойдут древесные опилки любых пород, кроме дуба. К опилкам добавить овес, ячмень, шелуху подсолнечника или гречки, мел.

Субстрат прокипятить и простерилизовать. Потом высушить и заполнить им полиэтиленовые пакеты. На 2 л субстрата добавляется 20 г мицелия. Можно использовать мешки любого объема, мицелий перемешать с субстратом. Сверху положить влажную вату, завязать и оставить при температуре 14-16°. Через 3-4 недели на поверхности пакетов образуются бугры. Это плодовые тела грибов. Мешок нужно развязать и убрать вату.

Чтобы опята росли вверх, оставить так. Но можно прорезать пакет на месте бугров, чтобы грибы прорастали через них. Такой способ чаще используют, если мешки большие. Если будет недостаточно света, опята вытянутся, ножки будут тонкими, а окрас светлым.

На бревнах

Часто для выращивания грибов используются колоды. Выбирают бревно с корой, не поврежденное гнилью или жуками. Диаметр от 20 см. Из них нужно нарезать чурки высотой 40-50 см, замочить в воде пару дней. Когда жидкость стечет, сделать отверстия по 4 см. Наполнить опилками и заложить мицелий или залить споровый раствор.

Бревна, подготовленные таким способом, можно разместить по-разному:

• вкопать на участке в тенистом месте вертикально или поставить в большую бочку, которую разместить на балконе;
• положить в траншею глубиной 15 см и присыпать землей с опилками;
• если чурки невысокие, их можно просто поставить на пол в подвале.

Для нормального роста этих грибов необходима постоянная влажность и температура от 10 до 25˚. Если они разводятся в помещении, важно обеспечить нормальную вентиляцию.

На пнях

Проще всего вырастить опята, если на приусадебном участке остались пеньки после спиливания деревьев. Если они стоят на солнечном месте, рекомендуется сделать тент.

Высаживать в пеньки лучше грибницу или мицелий. Нужно проделать отверстия и заложить туда кусочки по 2 см, добавить опилки, мох. Основное условие – постоянная влажность. Пенек придется поливать ежедневно, а в жару – несколько раз за день.

В банках

Зимние опята или фламмулину выращивают на подоконнике в трехлитровых банках. Если следовать пошаговой инструкции, это несложно.

1. Заполнить на 2/3 банку субстратом.
2. Простерилизовать в течение часа, поставив на водяную баню.
3. На следующий день повторить процедуру.
4. После остывания субстрата проделать глубокое отверстие в нем толщиной 2 см.
5. Поместить мицелий или споровый раствор.
6. Закрыть крышкой с дырочками, поставить в теплое место, для поддержания нужной влажности сверху положить мокрую вату.
7. Через месяц переставить на северное окно с температурой 14-16°.
8. Когда опята дорастут до верха, крышку необходимо снять.

В теплице

Благоприятные условия для роста опят легче всего создать в теплице. Применяют любой способ: пни, бревна, мешки с субстратом. Можно свалить в углу бревна в кучу или сложить в мешок куски древесины. Урожай получается уже через 2-2,5 месяца. При правильной организации такой огород будет плодоносить с мая по сентябрь.

Подготовительный этап

Перед посевом необходимо найти подходящий субстрат. Если устраивают грибной огород на улице, чаще всего используется древесина. Подойдут растущие пни яблонь или груш. Хорошо растут они на ольхе, осине или тополе. Можно также взять свежие бревна с корой.

Диаметр должен быть от 20 до 50 см, высота до 50 см. Нужно правильно выбрать бревно. Нежелательно использовать трухлявые или гнилые пни. Они должны быть плотными, сырыми, не зараженными короедами.

Пень нужно смочить перед посадкой за 1-2 дня. Поливать его из шланга небольшими порциями или из ведра. Промокнуть древесина должна полностью. Если есть возможность, лучше замочить заготовленные бревна в воде.

Пеньки вкапывают на участке в тени. Над поверхностью почвы они возвышаться должны не более чем на 20 см. Грунт вокруг замульчировать опилками и хорошо полить.

Если сажать опята в банках, мешках или теплице, нужно приготовить специальный субстрат. Делать его нужно так:

• 2 части опилок и 1 часть древесной стружки залить водой на сутки;
• откинуть на дуршлаг, чтобы получилась кашицеобразная масса;
• добавить крахмал, кукурузную и овсяную муку в пропорции 8X25X25 на 1 кг смеси.

Полученный грунт подходит для банок или мешков. Субстрат для теплицы делать нужно по-другому:

• 200 г древесных опилок варить в 2 л воды на медленном огне 2 часа;
• остудить, добавить 70 г овсяной или ячменной муки и 1 ч. л. негашеной извести или мела;
• хорошо перемешать.

Посадка опят

Сажают опята в любое время. Выбирается способ выращивания, собирается посевной материал. В зависимости от места и времени посадки потребуется плодовые тела грибов, грибница или мицелий. Рассаживают их в подготовленный субстрат или на бревно.

Быстрее всего прорастает готовый мицелий. Его высаживают в зерновой субтстрат. Сделать это несложно.

1. Проварить овсяные или ячменные зерна полчаса.
2. Остудить, просушить и разложить по простерилизованным банкам.
3. Еще раз простерилизовать на водяной бане или в автоклаве.
4. После остывания разложить в банки мицелий.
5. Оставить на неделю при температуре 20˚.
6. Когда зерно обрастет белым пухом, можно его использовать для посадки.

Главное поддерживать необходимую температуру и регулярно поливать. Когда жарко, рекомендуется делать это каждый час до 17 часов. Вечером полив не нужен, чтобы к ночи древесина просохла.

Как размножить опята

Размножают эти грибы чаще всего двумя способами: спорами или грибницей.

Спорами

Для размножения спорами ищут в лесу зрелые хорошие опята. Взять 10-20 шляпок и следовать пошаговому руководству.

1. Поместить шляпки в воду на сутки. Воду брать из родника или колодца, водопроводная не подойдет.
2. Не вынимая из воды, размять до кашицеобразного состояния.
3. Полученную массу хорошо размешать и пропустить через марлю.
4. Этим раствором нужно поливать приготовленные бревна.
5. Чтобы споры лучше задержались на древесине, наверху сделать углубления, куда засыпать опилки, потом полить раствором. Можно набить в углубления массу, оставшуюся после фильтрования.
6. На один пень уходит от 1 л спорового раствора.

Рассаживать таким способом опята можно с апреля по август. Прорастают они через 1-2 года. После такого посева грибы будут плодоносить не менее 5 лет.

Грибницей

Для размножения опят можно взять грибницу. Для этого из леса принести кусочки древесины или трухлявого пня. Дома разделить на отрезки 2X2 см. Заложить в отверстия глубиной 3-4 см, проделанные в пеньке или бревне сбоку. Закрыть их мхом, а пень увлажнить и укутать полиэтиленовой пленкой, в которой проделаны отверстия для вентиляции.

Рассаживается грибница осенью, поэтому пакет необходим. Он позволяет сохранять необходимую влажность и температуру.

Перед наступлением морозов для сохранения грибницы пень укрыть лапником или соломой. Желательно периодически очищать его от снега, чтобы весной к грибнице не проникла влага. Открывать пни необходимо только летом – или в начале июня, или в конце июля.

Инструкция по уходу

Собирать урожай можно обычными садовыми ножницами или ножом, срезая грибы недалеко от шляпки. Оставшиеся пеньки нужно потом удалить. Через 2-3 недели на этом же месте вырастет новый опенок. Но ему нужно создать необходимые условия. Поливать несколько раз в день. На улице нужно защищать грибницу от солнечного света и высокой температуры.

Меры предосторожности

Опята – это сапрофиты, паразитические растения. Они могут распространиться и заразить садовые деревья. Поэтому нужно вокруг грибного огорода выкопать траншею шириной 10 см и глубиной не менее 30 см. Радиус поверхности внутри траншеи должен быть не менее 2 м.

Советы и рекомендации

Есть несколько секретов успешного урожая, можно воспользоваться ими, чтобы избежать ошибок.

• После полива пня споровым раствором можно положить сверху созревшие грибные шляпки пластинками вниз. Через несколько дней их нужно убрать.
• При посадке спорами или грибницей первый урожай получится только через пару лет. Он будет небольшим, но со второго года может увеличиться в 4 раза.
• Если опята выращивают на улице, их нужно защищать от солнца. Для этого пень прикрывается соломой. Если грибной огород большой, лучше сделать тент.
• При поливе рекомендуется увлажнять не только бревно, но и землю вокруг него.
• Вместо банки иногда выращивают опята в тыкве. Ее не разрезают, а делают отверстия, куда помещается мицелий.

Выращивать опята в домашних условиях несложно. Если правильно подготовить посадочный материал и субстрат, выбрать место и способ – можно обеспечить всю семью вкусными питательными грибами.

Видео-инструкция по выращиванию опят на своем участке:

Выращивание опят в домашних условиях: способы и правила

Опята – вкусные грибы, преимущество которых в быстром росте. Они отлично поддаются выращиванию дома, процесс посадки доступный и интересный, с этим справится даже новичок.

Одни покупают готовую домашнюю грибницу опят, другие предпочитают другие способы выращивания этих вкусных и полезных грибов. В любом случае для получения ожидаемого урожая необходимо соблюдать несколько правил.

С чего начать: условия для выращивания опят с нуля в домашних условиях

Если просто поставить дома бревно с мицелиями, грибы не вырастут. Для стабильного плодоношения нужны определенные условия:

1. Свободная площадь не менее 10 метров. Идеальными местами станут погреб, теплица, двор или подоконник в доме.
2. Хорошая влажность. Грибы любят воду. Влажность должна быть не менее 70%. Если добиться таких показателей не получается, бревно можно поливать водой, а в домашних условиях опрыскивайте пространство вокруг подоконника.
3. Температура от 10 до 15° зимой и от 20 до 25° летом.
4. Минимум освещения. Важно, чтобы грибы не попадали под солнечные лучи, поскольку они высыхают. Если выращивание производится во дворе, найдите тень, например, под деревом.
5. Постоянное проветривание. Углекислый газ препятствует росту.

Все показатели должны быть стабильными. Резкие перепады температур и влажности способны навредить грибам.

Важно приготовить субстрат. Его закладывают в блоки в теплицах, мешки или стеклянные банки. Делается это следующим образом:

1. В состав субстрата должны входить древесные опилки (если таких нет, можно заменить шелухой от семечек) и стружка.
2. Ингредиенты перемешиваются и пропариваются в воде.
3. После этого древесные материалы выкладывают в дуршлаг. Ждем, пока остынет. В результате должна получиться смесь в виде каши.
4. В нее добавляем крахмал, овсяную и кукурузную муку. Пропорции – 8:25:25 за каждый килограмм смеси.

Субстрат отлично подойдет для выращивания грибов опят внутри банки. Для теплицы же используются следующие компоненты:

• овес или ячмень;
• древесные опилки;
• мел или известняк.

Важно, чтобы опилки были от лиственных деревьев.

Если опята летние, их рекомендуется высаживать с марта по август.

Есть также определенная последовательность смешивания компонентов:

1. В 200 грамм опилок наливаем прохладную воду (2 литра).
2. Смесь варим на медленном огне 120 минут.
3. Ждем, пока остынет до 25°.
4. Теперь добавляем ложку меда и 70 грамм овса.
5. Смесь перемешивается и кладется в полиэтилен.

Как вырастить опята дома: выбираем материал и правильно сажаем

Существует несколько способов разведения грибов. Обычно это делают в банках, пакетах из полиэтилена, теплицах или на бревнах. Выбирают технологию в зависимости от метода получения материала для посева. Обычно используют плод или мицелий. В обоих вариантах не требуется слишком больших знаний или покупки дорогих ингредиентов.

Видео о том, как выращивать грибы опята:

Грибница опят пошагово: как сделать самостоятельно

Выращивание опят в домашних условиях грибницей происходит следующим образом:

1. Нужно найти в лесу кусок трухлявого дерева с мицелием.
2. Разделяем находку на кусочки, размер каждого – 2х2 см. Это будет прививочный материал.
3. Проделываем в пне отверстия. Закладываем в них материалы.
4. После посева накрываем их мхом. Укутываем торцы полиэтиленовым пакетом, чтобы сохранить тепло и влагу.
5. Грибницей следует выращивать только осенью. Поэтому, как только ударят морозы, накрываем пень хвойными ветками.
6. Если пень расположен на улице, весной после таяния снега мицелий может быть поврежден водой. Чтобы этого не случилось, следите за торцами, защищайте их от избытка воды. Постоянно очищайте древесину от снега.
7. Если опята летние, убираем укрывные материалы в средине июня. Если зимние – в июле. В это время у грибов начинается фаза плодоношения.

Плодовое тело

Для выращивания опят из плодового тела делаем следующее:

1. Снимаем шляпки с перезревших грибов. Обычно их диаметр около 8 см, а с обратной стороны можно заметить темно-бурый оттенок.
2. Заготавливаем сырье. Замачиваем его в воде. Ждем сутки.
3. Как только пройдет 24 часа нужно размягчить шапки до состояния каши. Промывать или удалять воду не следует. Делаем это прямо в воде.
4. Полученная смесь пропускается через два слоя марли.
5. Жижу собираем в емкость и используем ее для полива пенька или бревна. Следует сделать в древесине небольшие дырочки. Они позволят накапливать жидкость со спорами грибов.
6. Как только все пни будут засеяны, канавки на поверхности накрываем мокрыми опилками или мхом. Торцы не трогаем.
7. Ждем появления грибов. При посадке весной первый урожай должен появиться осенью.

Способ эффективен для выращивания в любые сезоны, грибы будут расти даже в закрытом помещении.

Методы выращивания опят дома для новичков

На даче вырастить грибы легче, чем дома. Но и здесь существуют некоторые правила. Лучше всего выбрать мертвую древесину (пеньки или бревна). Создаются определенные условия:

1. Обильные поливы. Если идут дожди, поливать не нужно.
2. Тень. Грибы не любят солнце. Лучи способны испарять влагу, которая нужна для роста.
3. Температура. С этим проблем не возникает, но в мороз желательно накрывать грибницу мхом, хвойными ветками и полиэтиленом.

На пеньках

На фото опята на пне:

Если у вас есть участок, где были срублены еловые или берёзовые деревья, пни могут быть использованы для выращивания опят на даче, в огороде. Но подходят не все варианты пеньков: важно, чтобы древесный материал был плотным, не испорченным вредителями и чтобы не превращался в труху из-за старости.

Ствол должен быть влажным. Определить, насколько он влажный, можно по цвету — если он насыщенный темный, а из обрезанного кусочка дерева выделяется вода, то влаги достаточно. Важно, чтобы в пне была влажная сердцевина, не только кора. Также желательно, чтобы на пень не попадали прямые солнечные лучи. Можно выбрать и место под солнцем, но тогда его придется регулярно поливать.

Можно увлажнить ствол своими руками, периодически поливая его до посадки грибов. Наливать прохладную воду допустимо, используя ведра или шланги. Последний способ лучше, поскольку материал получает влагу небольшими порциями. Это позволит древесине полностью впитать воду. Используя дрель, в пеньке или бревне делаем отверстия, засыпаем мицелий. Ждем появления грибов.

На чурках

Метод очень похож на использование пеньков, но в этом случае они не будут настоящими. Вместо пней используются срезанные с лиственных деревьев чурки. Диаметр не менее 20 см, а длина около 40. Чурки вымачиваются в воде и закапываются в землю наполовину. В каждую выкопанную яму выливается ведро воды. Следует выбирать место в тени, чтобы солнце не испаряло влагу. Место вокруг сооружения засыпается опилками.

Для удачной зимовки чурки целиком накрываются полиэтиленовой пленкой с отверстиями, обеспечивающими свободную циркуляцию воздуха. Снять пленку можно будет с наступлением летнего тепла. Такой метод позволяет собирать урожаи в самом начале лета и в середине осени.

На опилках, в банке

Обычно опилки используются для выращивания зимних опят. Для этого не нужно специальное помещение или хозяйство, ухаживать за ними не труднее, чем за растением на подоконнике. Выращиваются грибы в банке. За полтора месяца с одной емкости можно получить до полутора килограмм урожая.

Сначала создается субстрат на основе опилок, отрубей и шелухи семечек. Смесь мокнет в воде неделю. Отжимаем ее, кладем в банки. Банки пастеризуем на огне, предварительно насыпав в них смесь и поставив их в емкость. Ждем, пока содержимое остынет до 25°. Закрываем крышками с дырочками для вентиляции. Через отверстия в грунт добавляем мицелии.

Выращивание опят в банках подходит, если у человека нет дачного участка, но хочется выращивать грибы. Для этого подойдет подоконник жилого дома. Банка с грибницей ставится на окно. Ухаживать за грибами нужно подобно комнатным растениям.

Но такой способ подойдет только для зимних опят. Это единственная разновидность грибов, способная расти в условиях квартиры. Причина в размерах – диаметр шляпки не превышает 5 см. Ножки тонкие и длинные. Это станет не только вкусным обедом, но и красивым предметом декорации помещения.

Видео о том, как вырастить опята дома в банке:

В мешке

Существует еще и метод выращивания в мешке:

1. Грунт делается на основе листьев деревьев, соломы, древесных опилок, шелухи семечек.
2. Запариваем смесь в горячей воде.
3. Как только смесь остынет, насыпаем в нее мицелий.
4. Кладем смесь в мешки из полиэтилена.
5. Укладываем их на полки в подвале.
6. Через пару дней делаем в мешке отверстия до 6 см.
7. Через месяц должны появиться первые грибочки.

Выращивать опята в домашних условиях через мешки можно в подвале, теплице или даже дома, если создать необходимые условия температуры и влажности. Способ очень эффективный.

Покупная домашняя грибница опят в коробке: самый простой способ

В интернете продают грибницы опят в коробках. Они стоят дешево. В коробке находится грибница или мицелий с уже готовым грунтом. Выращивать можно прямо в коробке, но производители советуют осуществить пересадку в теплицу или подвал, поскольку это обеспечивает большой урожай. Коробка же отлично подойдет, если планируется выращивание на балконе.

Видео о домашней грибнице опят от Леомакс:

Отзывы

Отзывы о выращивании опят в домашних условиях показывают, насколько это эффективно и какой способ лучше выбрать:

Субстрат можно делать в пакете, как в случае с вешенкой. Делается он на основе шелухи семечек и соломы. Через отверстия в пластиковом блоке вставляются палочки с мицелием. В процессе роста они покрываются белым пухом – грибница начала расти. Эффективный, но дорогой метод – нужно много мицелия.

Лиана

Использование зернового мицелия намного дешевле. Варится зерно, и кладется в палочки с мицелием.

Максим

Месяц назад купил домашнюю грибницу в коробке. Сначала отправил ящик на балкон, поскольку боялся неприятного запаха. Через некоторое время появился первый урожай, запах был очень приятным. Жду следующего урожая.

Андрей

Недавно купила коробку с мицелием. Урожай намного больше, чем при использовании банок для выращивания. Грибы очень вкусные.

Вера

Выращивание дома окупается при первом же урожае. Опята – выгодный бизнес, их можно продавать, получая неплохую прибыль.

Василий

Выращивание опят в домашних условиях

Как вырастить грибы дома? Очень просто, достаточно поставить банку с грибницей на подоконник и ухаживать за ней, как за комнатными растениями. Но такой способ подходит не для всех грибов.

Зимний опенок – это, пожалуй, единственный гриб, который можно вырастить на подоконнике в банке, скорее всего, потому что он достигает небольших размеров (диаметр шляпки 2-5 см) и растет на тоненьких ножках.

Чтобы вырастить зимний опенок в домашних условиях, нужно в качестве субстрата взять 1 часть отрубей и 3 части опилок, обязательно лиственных пород деревьев.

Однако есть еще несколько вариантов. Смешать 1 часть опилок и 1 часть растительных добавок, таких как шелуха гречки, подсолнечная лузга или измельченные кукурузные початки. Лузгу и початки можно даже использовать без опилок, как основной субстрат.

Субстрат на сутки замачивают в воде, отжимают и укладывают в стеклянные банки (лучше трехлитровые), заполняя их наполовину.

Затем длинным стержнем диаметром 1,5-2 см в толще субстрата проделывают отверстие на всю глубину банки. Далее банки с субстратом необходимо подвергнуть стерилизации, как заготовки на зиму, чтобы уничтожить все вредоносные микроорганизмы.

Банки ставят в объемную емкость и кипятят 1,5-2 часа на медленном огне. На следующий день прокипятить еще раз.

После того как субстрат в банках остынет до 24-25°С, следует закрыть их капроновыми крышками, в которых затем сделать отверстия до 2-х см в диаметре.

Мицелий вносится именно в эти отверстия. Количество мицелия должно составлять 5-7% от массы субстрата.

Для прорастания грибницы, которое занимает 20-30 дней, банки ставят в темное теплое место с температурой воздуха 20-24 °C. После появления первых зачатков грибов банки переносят на «северный» подоконник, где меньше солнечных лучей. Зимой можно вынести и на балкон, при условии, что температура будет в пределах 10-15°.

Когда грибочки дорастут до крышки, её нужно будет снять и обернуть горловину банки широкой полоской картона. Вот тут начинается самое интересное. Зимние опята вытягиваются на своих ножках и выходят за пределы банки, но растут внутри этой самой полоски картона. Картон и шляпки грибов следует периодически опрыскивать из пульверизатора, чтобы поддерживать высокую влажность (85-95%).

Урожай зимних опят собирают на 10-й день после появления первых зачатков тел. Их срезают как цветы, а оставшиеся части ножек аккуратно удаляют из субстрата. Затем банки снова закрывают крышками и ставят на прежнее место. Через 2 недели появится вторая волна опят.

На то, чтобы вырастить дома зимний опенок уйдет 40-45 дней, считая от внесения мицелия до сбора первого урожая. С одной трехлитровой банки можно собрать около 1,5 кг зимних опят.

Автор: Ирина Балтага

Добавить комментарий

наиболее подходящие виды грибов, методы, посевной материал и выбор места

Опята являются наиболее популярными грибами, которые можно собрать в лесу либо вырастить дома. Они обладают уникальными вкусовыми качествами, отличаются быстрыми темпами роста и дают стабильный урожай. Выращивание опят в домашних условиях считается уникальным занятием, которое можно превратить в прибыльный бизнес.

Виды опят для выращивания дома

Большой популярностью у грибников пользуются зимние опята

В природе существует несколько видов опят с учетом времени их вырастания и среды обитания. Для выращивания дома лучше всего отдавать предпочтение летним и зимним грибам.

Особой востребованностью у грибников пользуются именно зимние опята, выращивание которых не требует значительных финансовых вложений и обширных площадей.

Для домашнего применения и в производственных масштабах рекомендуется разводить летние опята. Однако, в такой ситуации потребуется просторное помещение в виде погреба или бокса. В нем необходимо организовать подходящие климатические условия, что заметно ускорит созревание урожая. Чаще всего любители грибов выращивают летние грибы на крупных ветках, пнях и отходах древесины.

Необходимые условия для роста

Оптимальным периодом года для высадки посадочного материала на участке считаются весенние месяцы либо конец лета. Дома грибы разрешается выращивать круглогодично. Температура в помещении не зависимо от стадии роста не должна быть ниже 10-25 градусов.

При повышенной влажности грибница развивается достаточно быстро, что положительно отражается на росте грибов. В помещение должно обязательно поступать достаточное количество кислорода, поэтому необходимо обустроить в нем встроенную вентиляцию либо форточку.

Для роста опят не требуется слишком яркий свет и можно даже создать полутьму. Однако, в таком случае шляпки у грибов получаются слишком бледными, однако, на вкусовых качествах это никак не сказывается. При разведении опят на приусадебном участке лучше выбирать тенистое место, что позволит предупредить высыхание грибницы.

Посевной материал и технология его получения

Существует два основных способа выращивания опят дома

В домашних условиях опята удается выращивать двумя способами в зависимости от посевного материала.

Первая технология включает в себя следующие действия:

• с опят снимают шляпки и помещают их в емкость с водой;
• шляпки отмачивают не менее суток, после чего измельчают до образования однородной массы;
• смесь протирают через марлю, ь переливают в стеклянную емкость и применяют для посева;
• на древесине пня выполняют специальные канавки, в которые заливают полученную грибную массу;
• канавки присыпают опилками.

Такой способ посадки материала разрешается использовать для сбора урожая дома в любой период года.

Мицелий является грибницей, которую в дальнейшем используют для выращивания различных видов опят. Такая технология включает в себя следующие манипуляции:

• мицелий разделяют на куски небольшого размера и делают по бокам отверстия;
• куски мицелия помещают в разъем и укрывают их мхом;
• для получения эффекта теплицы отверстие хорошо прикрывают куском полиэтилена сверху;
• в холодный период года грибницу укрывают хвойными ветками.

В том случае, если посадочный пень располагается на открытой территории, то его очищают от снежной насыпи, что позволит не допустить избытка влаги

Подготовка субстрата

Для засевания на участке мицелия необходимо приобрести в магазине уже готовый блок или самостоятельно сделать субстрат. Для этого необходимы:

• 3 части стружки либо опилок лиственных деревьев;
• 1 часть ячменя, отрубей, овса, перловки либо перемолотых кукурузных початков;
• известь в пропорции 5 граммов на 300 граммов субстрата;
• 10 граммов крахмала, овсяной либо кукурузной муки на 300 граммов смеси.

Образовавшуюся массу следует хорошо перемешать, залить водой комнатной температуры и выдержать 10 минут до набухания. Спустя время для уничтожения спор грибковых возбудителей, массу рекомендуется томить на небольшом огне не менее 40-50 минут.

В завершении варки воду нужно аккуратно слить и оставить субстрат на огне до полного выпаривания лишней жидкости. Приготовленная смесь должна оставаться в слегка влажном состоянии, но ни в коем случае не мокрой.

Засевание мицелия

Для выращивания домашних опят можно применять пакеты из пластика объемом более двух литров либо стеклянные двухлитровые банки

Для сбора хорошего урожая домашних опят можно применять пакеты из пластика объемом более двух литров либо стеклянные двухлитровые банки. Приготовленной массой рекомендуется заполнить посуду на 2/3 всего объема.

В субстрате нужно специальной палочкой сделать глубокое отверстие не более 5 см и диаметром 1 см. Мицелий должен составлять 2-7% от общей массы смеси. Подготовленные отверстия нужно наполнить грибницей, причем температура должна составлять не менее 25.

Для засевания мицелия разрешается воспользоваться другим способом. Следует остудить субстрат до 25 градусов, добавить в него мицелий и перемешать с помощью деревянной лопаточки. Подготовленной массой нужно заполнить подготовленную посуду.

Банки следует закрыть полиэтиленовыми крышками, предварительно сделав в них отверстия диаметром 1 см. Оно необходимо для выведения наружу газов, которые выделяют грибные споры. Образовавшееся отверстие слегка прикрывают пробкой из ваты, что позволяет избежать быстрого испарения влаги.

Условия проращивания мицелия

Посуду размещают в затемненном месте, где температура составляет не менее 25°с. Спустя несколько недель грибной мицелий прорастает и в нем появляются плодовые тела. Емкость переносят в место с максимальным количеством солнечного света и температурой воздуха около 15 градусов. Таким помещением может служить застекленный балкон или окно, выходящее на север.

С емкости убирают крышку и развязывают пакет. Для поддержания влажности рекомендуется проводить частые опрыскивания как самого субстрата, так и шляпок.

В том случае, если на опятах образуются капли медового цвета, то это служит признаком чрезмерного полива. Белый налет свидетельствует о недостатке влаги.

При желании выращивать зимние опята в гараже либо подвале рекомендуется провести предварительную побелку стен известковой смесью. Кроме этого, можно их обработать формалином в целях дезинфекции. Одним из обязательных условий является установка в помещении обогревателя воздуха либо принудительной вентиляции. После появления шляпок над емкостью на горлышко одевают кольцо, выполненное из плотной бумаги. Это дает возможность грибам вырасти повыше и не рассыпаться.

Выбор места и способа выращивания

Дома можно разводить опята в теплице, на пеньках, в мешках и стеклянных банках

Домашние опята можно выращивать:

• в подвальных помещениях;
• в теплице;
• в квартире;
• на открытом воздухе.

Для определения способа выращивания нужно определиться с разновидностью грибов, которая подходит для созданных условий. Дома можно разводить опята в теплице, на пеньках, в мешках и стеклянных банках.

Методы выращивания опят

Любителям грибов можно воспользоваться различными способами получения хорошего урожая.

На бревнах

Опята на бревнах можно вырастить в домашнем помещении и на улице при температуре 10-25 градусов. Необходимо брать влажное с корой, но ни в коем случае не прогнившее дерево. При повышенной сухости материала его рекомендуется на несколько суток погрузить в воду. Спустя время бревно достают и ожидают, пока стечет жидкость.

На бревнах различные виды опят удается разводить несколькими способами:

1. Необходимо сделать углубления в виде канавок до 1 см и длиной 4 см. Они должны находится на расстоянии не менее 10-12 см. В канавки нужно поместить аккуратно мицелий, обмотав сверху полиэтиленом. На нем следует сделать несколько дыр, которые необходимы для поступления воздуха. Такое бревно рекомендуется поместить в темное помещение повышенной влажностью. Температура воздуха должна составлять 20 градусов и чаще всего первые грибы прорастают через несколько недель.
2. На улице в затененном месте следует выкопать ямки, глубина которых составляет 15 см. Их необходимо хорошо их полить. В образовавшиеся углубления следует поместить горизонтально палочки с мицелием грибов. Землю вокруг лунок рекомендуется подсыпать древесной золой, что позволит защитить их от вредителей. После высыхания грунта его поливают, а в холодную погоду накрывают листьями.
3. Бревно с мицелием опят следует поместить в бочку с грунтом и разместить ее на балконе. Температурный режим должен составлять 10-25°c.

Оптимальным временем для помещения мицелия в почву считается поздняя весна или последний месяц лета.

На пнях

Выращивание опят на пне — самый простой способ

Выращивание грибов с помощью пней является наиболее простым способом. Для этого можно брать поленья или трухлявые пеньки. Заниматься посадкой лучше всего в теплую, но не знойную погоду.

В пнях следует сделать канавки и заложить в них небольшие куски грибницы. Выемки нужно хорошо укрыть опилками и полить землю вокруг. Пень должен располагаться в затененной комнате либо на участке на улице. Лучше всего держать его в доме в подвальном помещении или на балконе, где отсутствует яркий солнечный свет.

В теплице, подвале

Бревна и поленья с мицелием либо грибными спорами необходимо тщательно увлажнить и поместить их в теплицу. Для того, чтобы не допустить пересыхания древесины, ее нужно хорошо полить. Для разведения домашних грибов в теплице следует применять субстратные блоки, которые можно сделать самостоятельно либо приобрести в магазине.

В качестве наполнителя обычно используют компост. Подготовленный материал следует поместить в сырое место, каждый день поливать его и на несколько дней прикрыть соломой. Через некоторое время его необходимо вынести на улицу и закопать в землю.

Для разведения грибов в подвальных помещениях разрешается использовать обычные пакеты, в которые насыпают опилки.

Для этого необходимо:

1. 2-5 литровый пакет заполнить 200-500 г опилок. Лучше всего для этой цели подходит материал из сосны и различных лиственных растений.
2. Подготовить землю для проращивания, включив нее 30% таких компонентов, как ячмень, овес, гречиха, перловка либо подсолнечная шелуха. В подготовленный субстрат следует добавить чайную ложку мела.
3. Все компоненты перемешать и опустить на 50-60 минут в воду. В этой же воде провести стерилизацию путем кипячения на протяжении 15 минут.
4. Излишки воды слить, поставить смесь в духовой шкаф на полчаса. Подготовленный материал должен быть влажной консистенции.
5. Материал разложить равными частями по полиэтиленовым пакетам высокой плотности.
6. Мицелий разделить на небольшие куски и раскидать субстрат чистыми руками. Сверху все укрыть ватой и завязать пакет.

Пакеты не разрешается трогать в течение месяца до появления в них бугорков — будущих грибов. После этого пакеты нужно развязать и убрать вату. Грибы растут в том направлении, откуда поступает воздух.

В банках

Для роста мицелия необходимо подготовить субстрат, смешав древесные опилки и отруби в соотношении 1:1. Смесь на сутки следует залить водой, после чего отжать и не уплотнять сильно.

Стерилизация стеклянной емкости в горячей воде с грибной массой на протяжении часа позволяет не допустить последующего заражения плесенью грибницы.

После остывания грибной массы необходимо сделать в ней максимальное углубление до дна банки и поместить в него мицелий опят. Посуду следует закрыть крышкой с дырками и накрыть увлажненной ватой, что позволит поддерживать нормальную влажность. Банку рекомендуется поместить в затемненное место и увлажнять вату при ее подсыхании.

Обычно грибница прорастает уже спустя месяц, а через 3 недели можно увидеть первые грибы. После этого грибницу следует поместить на окно с северной стороны либо притенять от солнца.

Сбор урожая

Урожайность опят определяется степенью разрастания грибницы, погодой и качеством древесины

При правильной посадке первые грибы можно обнаружить уже в начале июня. Как показывает практика, урожай обычно собирают до начала осени. Однако, в первый год опят обычно бывает не сильно много. Урожайность опят определяется степенью разрастания грибницы, погодой и качеством древесины.

Хранение опят

Перед тем, как убирать опята на хранение либо готовить из них что-нибудь, следует удалить мусор из них мусор и перебрать. После этого чистым ножом нужно срезать часть ножки, покрытую землей. У более старых опят следует обрезать и юбочку белого цвета.

Самый простой способ хранения грибов — это их заморозка при температуре около 18-24 градусов ниже нуля. Опята можно мариновать и в таком виде их следует съесть в течение 12 месяцев. Под капроновой крышкой в холодном помещении грибы разрешается хранить до 6 месяцев.

Разрешается засолить опята и сделать это можно различными способами. При горячей засолке срок хранения грибов в холодном месте составляет 8-12 месяцев.

Выращивание опят в домашних условиях — процесс, требующий внимания и определенных знаний. Но если учесть все особенности и нюансы ухода за растущими грибами, через некоторое время можно получить отличный урожай.

Видео о выращивании зимних опят дома:

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Это меня удивило

Грибы

в грибнице, на соломе, на пнях, на опилках

Добавить в избранное

Опята — вкусные и неприхотливые грибы, способные произрастать на любых почвах. Зная некоторые нюансы культивирования, дома можно получить качественный продукт. Как происходит выращивание опят дома или в саду, а также о возможных трудностях и маленьких секретах — будет рассказано дальше.

ПоказатьСкрыть

Опята: что это за грибы

Само название «опёнок» говорит о месте произрастания гриба (брёвна, пни, крупные ветки). Нередко их считают паразитирующими организмами, заражающими и медленно разрушающими древесину. В естественных условиях опята произрастают большими колониями на старых, повреждённых деревьях и пнях.

Плодоносить грибница начинает осенью, а получить результат можно до заморозков.

Опята — съедобная разновидность грибов, отличающаяся высокими питательными характеристиками. Кроме того, они содержит много биологически активных элементов, витаминов и аминокислот, что позволяет использовать их в научной медицине и фармакологии.

Разведение опят искусственно не требует определённой подготовки или глубоких знаний — справиться с этим может любой новичок. Всего лишь стоит придерживаться рекомендаций и выполнять инструкцию.

Знаете ли вы? Искусственно выращивать опята начали несколько веков назад в Японии. Называли эту культуру «энокитаке» — зимний японский гриб.

Похожие виды

В природе произрастают несколько разновидностей опят, но вырасти в искусственных условиях без потери вкусовых качеств могут только два:

• летний;
• зимний (т. н. фламмулина).

Собственно зимний вид привлекает своим нежным, неповторимым вкусом.

Употребляют их свежими и сушёными, причём в обработку (в отличие от дикорастущих сородичей) берутся и шляпки, и ножки. Шляпки фламмулины рыже-жёлтого цвета, вырастают до 9 см в диаметре. Мякоть желтоватая, приятного грибного вкуса. В естественных условиях грибы созревают осенью и могут простоять до декабря, а при частых оттепелях — до февраля.

Важно! Зимние опята содержат токсические вещества лёгкого действия, которые разрушаются через 20 минут после варки.

Летняя разновидность немного мельче — шляпка до 6 см. Плоть у них водянистая, а вкус мягкий, не ярко выраженный. Грибники утверждают, что их можно кушать сырыми, просто сорвав с пенька. В естественной среде эта разновидность произрастает колониями на гнилой древесине.

Если климат мягкий, то собирать такие грибы можно круглый год.

Редко встречающийся вид — тополиный опёнок. Местом произрастания может быть не только пень тополя, но и кленовое бревно. Отличается данная разновидность ореховым привкусом и рассыпчатой структурой.

Но тополиный опёнок имеет большой недостаток: хранится он не более суток, а в замороженной форме — не дольше недели.

Самая, пожалуй, редкая форма — мраморный опёнок. Такие грибы причисляются к деликатесам. На вкус они сладковатые, ореховые, хрустящие. Ценят эту разновидность также за отсутствие жира и высокую концентрацию питательных веществ. В холоде хранятся не дольше 1–1,5 недели.

Любая хозяйка, даже начинающая, знает, что грибы нужно вымачивать в воде. Но только не мраморные — они вбирают влагу и становятся хрупкими.

Почему стоит выращивать опята

Искусственный опёнок — аппетитный гриб, который даже начинающий грибник способен культивировать как в саду, так и дома. Самое главное — придерживаться технологии. Домашние опята отличаются нежной и сочной плотью. Их применяют для приготовления супов, заправок, жаркого.

Ведь уникальный аромат сохраняется даже при тепловой обработке. Кроме того, грибной огород может принести приличные деньги. В Европе многие занимаются таким бизнесом.

Знаете ли вы? Споры учёных о том, что за организм грибы — фауна или флора — завершились в 1960 году. Тогда было выделено особое царство Грибов. По концентрации белков они приближены к животному миру, а по содержимому (минеральный состав и углеводы) их нужно отнести к растениям.

Условия для выращивания опят

Если выращивание осуществляется в закрытой комнате, то она должна хорошо вентилироваться. Яркого света этим организмам не требуется — их достаточно возделывать в полутьме. Правда, в такой ситуации шляпки грибов будут блеклыми. Но вкусовые характеристики от этого не изменятся.

На открытом месте лучше выбирать затенённый участок, чтобы поддерживался достаточный уровень влаги и не засыхала грибница. Влажность воздуха должна быть высокой (не ниже 70%) и равномерной — это благоприятно отражается на росте грибов. Кроме того, следует периодически проводить профилактические работы против появления заболеваний.

Важно! На разных фазах роста должна обеспечиваться температура в пределах +10…+25°C.

Места, где можно выращивать грибы

Домашние опята можно высаживать как в квартире, так и на дачном участке. Высаживание под открытым небом нужно начинать в середине весны или в августе. На закрытых территориях опята высаживают круглый год.

Способы и технологии выращивания

Посадка по любой технологии позволит вырастить ароматные грибы, не уступающие по своим качествам лесным собратьям. Урожаи можно снимать щедрые, а сам процесс культивирования будет выгодным и увлекательным.

На пеньках

Выращивать грибы на остатках деревьев под открытым небом лучше в тёплый период (апрель–сентябрь). В помещении с помощью такого метода грибы можно возделывать круглый год. В саду участок для посадки выбирают в полутени.

Важно! Дерево должно быть спилено максимум за 30 дней до высаживания мицелия.

При этом для высадки используют пни таких культур:

• акация;
• берёза;
• бук;
• граб;
• груша;
• осина;
• тополь;
• яблоня.

На пне не должны присутствовать признаки гниения, он должен быть хорошо увлажнён и не иметь веток. Наличие коры допускается. Если пенёк или бревно сухие, их можно вымочить в простой воде на протяжении 2–3 суток. Затем на несколько дней оставляют в полутени, чтобы пень проветрился и отошла лишняя влага.

В подготовленном пеньке проделывают лунки шириной 0,8–1 см и глубиной 5–6 см. В эти выемки и будет помещён мицелий. После размещения мицелия выемки накрывают хвоей или мхом. Чтобы поддерживать достаточную степень влажности, время от времени почву возле пня нужно увлажнять.

На результаты посадки можно надеяться на следующее лето, а собирать грибы можно 5–7 лет с момента высадки, пока пень полностью не развалится. В первые годы урожай будет не очень обильным, но со временем он увеличится в 2–4 раза.

Способ закладки мицелия на древесной основе: 1 — Просверлите на приготовленном бревне 20 отверстий диаметром 10 мм и глубиной 5 — 6 см в шахматном порядке, не затрагивая сердцевину; 2, 3 — Вставьет палочки с мицелием в отверстия до упора и закройте пластилином или воском. Следите, чтобы в древесину не попадал мусор; 4 — На поверхности, в местах заражения, видны следы мицелия; 5 — Полностью покрытые налетом мицелия брёвна высаживают на постоянное место плодоношения. Основным минусом данного способа является тот факт, что грибница даёт всходы медленно, поэтому для поддержания и активизации её роста пеньки рекомендуется накрывать плёнкой. Положительный момент заключается в том, что этот метод не требует серьёзных финансовых вливаний, а сам процесс прост в реализации для любого новичка.

Знаете ли вы? Опёнок считается грибом-паразитом. Он может поражать около 200 видов деревьев и кустарников. Может даже паразитировать на травянистых растениях.

На соломе

Солома служит прекрасным субстратом для культивирования опят. Допускается использование любой злаковой соломы (ячмень, овёс, рожь и т. п.). Перед применением её лучше измельчить (пропустить через дробилку) или просто перемолоть. Чем мельче будут частички, тем большей влагоёмкостью будет обладать субстрат.

Измельчённую солому помещают в контейнер. За 12 часов до высаживания мицелия солому пропаривают в горячей воде. Можно добавить в жидкость комбинированную минеральную добавку. После остывания соломы в неё добавляют мицелий и хорошо перемешивают.

Заражённый субстрат раскладывают по полиэтиленовым мешкам, укладывают на полки или подвешивают. Спустя 3–4 дня в мешках прорезают щели длиной 5–6 см. Через 14–20 дней опята прорастут. 1 — увлажнение и перемешивание субстрата; 2 — смешивание пастеризованного субстрата с грибницей; 3 — нанесение надрезов на мешок, наполненный засеяным субстратом; 4 — размещение блоков для выращивания грибов на стеллажах с вертикальным подвешиванием.

• Минусы такого метода:
• способ трудозатратный;
• необходимо отдельное помещение.

• Среди преимуществ такого способа отмечают:
• пакеты с отжившим мицелием легче сменить;
• если опята поразит гниль или инфекция, пакеты можно быстро убрать, избежав тем самым заражения всей плантации;
• возможность размещать пакеты ярусами, при этом экономится площадь.

Знаете ли вы? Самым большим организмом на Земле является опёнок, который растёт в штате Орегон (США), в национальном заказнике Малур. Размер тела равен 890 га. Точный возраст установить не удалось, но, по подсчётам учёных, грибу 2000–8000 лет. Поначалу считалось, что местность заселена разными скоплениями. Но при более детальном исследовании выяснилось, что это — единый организм.

На опилках

Основное преимущество данного метода: для культивирования можно использовать дом или городскую квартиру. А это значит, что выращивать грибы реально не только летом, но и зимой. Основным недостатком считается тот факт, что опилки необходимо дезинфицировать.

Срезать грибы можно уже через 45 суток. Одна трёхлитровая банка даст около 1500 г грибов.

Сам процесс происходит таким образом:

1. Две части измельчённых опилок (размером 3–4 мм) и часть мелкой стружки смешивают и проваривают. Затем нужно дать влаге стечь.
2. Когда смесь остынет, в неё подмешивают питательные компоненты. На 1 кг берут: 8 г крахмала, по 25 г овсяной и кукурузной муки.
3. В стеклянные ёмкости (это могут быть 1, 2 и 3-литровые банки) на 2/3 укладывают смесь и слегка утрамбовывают. Затем банки помещают в большую ёмкость и кипятят в течение двух часов.
4. Когда опилки остынут до +25°C, стерильным прутиком проделывают лунки глубиной 5–7 см. Туда нужно сажать мицелий.
5. После заполнения всех отверстий ёмкости отправляют в затемнённое место с неизменными температурными показателями +24°C и влажностью 80–85%.

Чтобы в субстрате сохранялась влага, домашний грибной огород прикрывают крышками с прорезями, а сверху — ватой. После того, как мицелий даст всходы, температуру опускают до +14…+16°C.

В грибнице

Чтобы получить свежие опята у себя дома, можно посадить грибницу. Она снимается в естественном месте обитания грибов — лесу. Найти её можно на отживших, сгнивших пнях.

Мицелий — нитевидное тело кремового цвета.

Берут грибницу вместе с клочками древесины и привязывают её небольшими частями (примерно 2 см²) в подготовленные заранее в пне выемки. Потом пенёк хорошо увлажняют, сверху укладывают щепу или мох, а затем — плёнку.

В начале июня укрытие снимают и срезают первый урожай. Главным преимуществом является тот факт, что, в отличие от остальных методов, результат в таком случае будет не через год, а уже через 8–10 месяцев. Из недостатков можно отметить риск получения некачественной грибницы и тот факт, что урожай будет зависеть от погоды.

Важно! В зимнее время колоду утепляют хвойными ветками.

Особенности, нюансы и секреты при выращивании

Опытные грибники утверждают, какой бы простой метод выращивания ни был выбран, следует обязательно придерживаться определённых правил.

В основном, рекомендации сводятся к таким советам:

1. Помещение следует оборудовать так, чтобы можно было регулировать температурные показатели на каждом этапе вегетации. Для этого сооружают систему вентилирования, отопления и увлажнения среды. Дефицит свежего воздуха чреват низким ростом грибов.
2. Грунт можно выбрать разный. Главное правило: он не должен содержать признаков плесени или гниения.
3. Ёмкости с выращиваемыми грибами лучше размещать на стеллажах. Основное условие — они должны быть металлическими, деревянные быстро гниют.
4. Лучше приобретать готовую грибницу у проверенных поставщиков. Только в таком случае можно иметь гарантию, что она не инфицирована болезнетворными бактериями.
5. Перед заготовкой грибницы её следует продезинфицировать: обработать кипятком или паром.
6. Хранение и обработка урожая должны проводиться на изолированных территориях. Желательно также предусмотреть место для переработки выработанного субстрата. Оно должно находиться на дистанции от грибной плантации.

Основное затруднение при культивировании домашних опят — быстрое разнесение спор. Если место выращивания — дача, и плантация расположена на улице, достаточно вырыть траншею. В помещении выделяется специальная комната.

Как видим, возделывание опят самостоятельно лёгким производством назвать нельзя. Как и в любом деле, нужно соблюдать определённые правила. Но советы опытных грибников помогут в этом занятии, которое со временем может перерасти в увлекательное дело. Полученный при этом урожай порадует вас и ваших близких, а, возможно, и перерастёт в прибыльный бизнес.

Выращивание опят в домашних условиях

Много кому известны вкусные грибы опята, которые используются для приготовления различных блюд. Однако о том, что их можно вырастить в комнатных условиях, знает далеко не каждый человек. Сделать это достаточно просто, и существует несколько проверенных временем способов, о которых и пойдет речь ниже.

Выбор подходящего вида опят

Существуют разные виды опят, различающиеся не только местом произрастания, но и сроком созревания. Однако дома можно выращивать лишь 2 разновидности таких грибов, а именно летнюю и зимнюю.

Несмотря на то, что летняя разновидность опят вкуснее зимней, последнюю проще всего вырастить в комнатных условиях. Грибы такого зимнего вида, именуемого еще фламмулина, обладают тонкими ножками и не очень большими шляпками, в поперечнике достигающими 20–50 мм. Такой вид прекрасно растет в банках из стекла и пользуется очень большой популярностью.

Читайте также: Выращивание вешенки в домашних условиях

Выращивание в пакетах на субстратных блоках

Если вам нужно вырастить большое количество опят, то для этого идеально подойдут специальные субстратные блоки, имеющиеся в продаже в специализированных магазинах. При желании такие блоки можно сделать и своими руками, для этого вам нужно подготовить ячмень либо овес, опилки и мел. На 1 литр субстрата понадобится 0,5 маленькой ложки мела, 100 грамм опилок и 35 грамм ячменя. Опилки смешивают с водой и кипятят примерно 45 мин, после чего оставшуюся жидкость выливают, а субстрат треть часа просушивают на небольшом огне. Опилки соединяют с оставшимися компонентами, все хорошо перемешивают и укладывают плотно в пакет. Такой субстрат можно использовать и для культивирования опят в банках.

Порядок действий:

1. Возьмите субстрат, находящийся в пакете, и засейте на него мицелий гриба. Для этого сухими руками берется мицелий и равномерно распределяется по поверхности предварительно увлажненного субстрата. Данный «посев» проводят в закрытой комнате, где нет грязи и пыли. Как правило, на 1 пакет уходит около 20 грамм мицелия.
2. Хорошо завяжите пакет и уберите его в относительно прохладное место (от 15 до 20 градусов).
3. Спустя 4 недели субстрат становится боле плотным и осветляется, при этом на его поверхности должны образоваться бугорки (будущие опята).
4. В это время надо убрать пакеты в более прохладное место (от 5 до 10 градусов) и развязать их.
5. Чтобы собрать богатый урожай грибов, нужно регулярно увлажнять субстрат чистой водой из пульверизатора.
6. Помещение либо комнату надо регулярно проветривать, чтобы не происходило застоя воздуха. Свет нужен неяркий и рассеянный, а уровень влажности воздуха должен быть высоким.

Выращивание в банках

Растущие в стеклянной банке опята можно поставить в доме на окно, что в некоторых случаях очень удобно. Данный способ выращивания подходит лишь для фламмулины.

Порядок действий:

1. Для приготовления субстрата используют опилки и отруби (3:1). Опилки следует брать от деревьев лиственных пород. Измельченные кукурузные початки либо шелуха от семечек смогут стать хорошей заменой опилок.
2. Получившуюся смесь на 24 ч заливают водой, затем ее отжимают и помещают в банки из стекла объемом 3 литра, при этом их надо заполнить на часть. Смесь немного утрамбовывают.
3. Заполненные банки нужно простерилизовать в емкости с кипятком на медленном огне на протяжении 60 мин. Спустя сутки их вновь стерилизуют таким же способом. Это позволит избавиться от плесени и болезнетворных микроорганизмов.
4. После того как субстрат остынет до 25 градусов, надо сделать в нем лунки для мицелия. Для этого берется простерилизованная длинная палочка, в поперечнике достигающая 10–20 мм, ей делается несколько углублений до дна емкости.
5. В лунки засыпают мицелий из расчета примерно от 5 до 10 процентов от общей массы основы. Емкости закрывают крышками, на которых заранее проделано по несколько дырок, затем их убирают в такое место, где всегда темно и тепло (не ниже 20 градусов). Лучше всего развитие грибницы происходит при влажности воздуха от 85 до 90 процентов и температуре от 23 до 24 градусов. Для поддержания высокого уровня влажности на крышки можно положить вату, смоченную в воде.
6. Рост и развитие грибницы длится примерно 30 дней. А спустя еще 14–17 дней можно будет собрать первые грибочки.
7. Как только покажутся первые опята, банки убирают на подоконник северной ориентации, при этом там должно быть достаточно прохладно (от 14 до 15 градусов). Защищайте грибы от прямых лучей солнца.
8. После того как опята упрутся в крышку, ее нужно убрать, при этом горлышко банки обворачивают картонной плоской, которая будет поддерживать разрастающиеся грибы.
9. Систематически увлажняйте опята из опрыскивателя, при этом не допускайте их пересыхания. Грибы обрезают по ножке, которую затем удаляют из субстрата. Спустя всего 14–17 суток после сбора урожая покажутся молоденькие опята. От одного до полутора килограмм свежих и вкусных грибов можно вырастить в одной банке при правильном уходе.

Добыть мицелий опят достаточно просто. Его можно отыскать в лесу либо купить в специализированном магазине. Также для посева можно использовать споры, взятые от взрослых и хорошо вызревших опят.

---

Хотите иметь всегда под рукой удобный лунный календарь, в котором указаны благоприятные и неблагоприятные даты для посадки и пересадки комнатных цветов, полива и удобрения растений, обработки от вредителей? Представляем вашему вниманию приложение Лунный календарь комнатных растений, которое можно совершенно бесплатно СКАЧАТЬ в Play market по ССЫЛКЕ. 

Лунный календарь по уходу за комнатными растениями содержит точное время Новолуний, Полнолуний, начала лунных дней и вхождения Луны в знаки зодиака. Указаны благоприятные и неблагоприятные даты для посадки и пересадки комнатных цветов, полива и удобрения растений, обработки от вредителей.

Вам понравился материал? Поблагодарить легко! Будем весьма признательны, если поделитесь этой статьей в социальных сетях:

---

Читайте также:

---

видео, как выращивать грибы из мицелия на пеньках

Первые опыты по выращиванию летних опят в России было проведены ещё в 30-е годы прошлого столетия – задолго до того, как в промышленных масштабах стали культивироваться другие грибы. Для разведения мицелия на открытых участках используются пни деревьев лиственных пород или чурки, а чтобы получить урожай в помещении, нужно приготовить специальный субстрат из древесных отходов.

Опята летние относятся к семейству Строфариевых, которое насчитывает более 100 разных видов шляпных грибов, растущих как на мертвой древесине, так и на травянистых остатках, мхе.

Особенности летних опят

По характеру питания летний опенок является грибом-ксилотрофом из группы сапрофитов, питается преимущественно органическими веществами из разрушающейся древесины или других растительных субстратов, поэтому предпочитает расти большими колониями на пнях, валежниках, полузасохших деревьях.

Внешне летний опенок представляет собой шляпный гриб. Диаметр шляпки варьируется от 3 до 8 см, чаще она окрашена в желто-коричневый цвет, с темной окаемкой по ее краю. Ножка тонкая, ее диаметр редко превышает 0,5 см при длине самой ножки от 5 до 10 см. Характерной особенностью опят является наличие кольца на ножке, под которым иногда можно разглядеть чешуйки. Мякоть гриба – нежной консистенции, бежевого цвета, с приятным характерным грибным вкусом и свежим запахом.

Являясь типичным представителем грибов-ксилотрофов, летний опенок не растет в одиночку, а встречается большими группами или колониями, в которых нередко насчитывается до 100 плодовых тел.

Мякоть шляпок в природе нежная, а ножка волокнистая, грубая, поэтому при сборе ножки нередко отбраковывают. У культивируемых опят в отличие от природных ножка по структуре и вкусу почти не отличается от шляпки.

В природе опята летние вегетируют на пнях и стволах засохших лиственных деревьев, нередко встречаются на валежниках; из деревьев предпочитают березу, дуб, бук, в южных регионах их можно встретить на пнях каштана, на севере растут и на сосновых пнях, а также на оструганной древесине.

В диком виде опята широко распространены в Европе, Северной Америке и Азии; в России встречаются на всей территории ее Европейской части, на юге Западной и Центральной Сибири, на Дальнем Востоке и Кавказе. Плодоносят грибы с июня до первых заморозков, которые наступают в октябре, в южных регионах гриб встречается до середины ноября.

О выращивании летних опят на даче подробно рассказывается на этой странице.

Выращивание летних опят на пнях и чурках

Опенок на приусадебном участке можно выращивать несколькими способами: на пнях лиственных деревьев, на чурках и древесных отходах.

Выращивание опят на пеньках максимально приближено к естественному развитию грибницы в природе, практически не требует затрат, так как достаточно срезать несколько половозрелых грибов, найденных в лесу, и заселить их спорами выбранные пни подходящих лиственных деревьев, чтобы через 1–2 года сформировалась новая грибница, дающая постоянный урожай последующие 6–8 лет.

Способ выращивания опят на пнях подходит для разведения грибов на территории, где имеются несколько подходящих пней. Для производства грибов в коммерческих целях данный способ нерентабелен.

Второй способ также подходит для разведения грибов на собственном приусадебном участке, однако в отличие от первого он не требует наличия пней деревьев, так как грибы развиваются здесь не на пнях, а на чурках. Их заготавливают от свежих деревьев, высота каждого пенька должна быть не менее 40 см при его диаметре от 15 см, иначе грибнице не хватит питательных веществ и она приостановит свое развитие. После заселения спорами опят чурок их помещают на 4 месяца в темное теплое помещение со стабильной температурой от 15 до 20 °C. По мере подсыхания древесины ее необходимо дополнительно смачивать. Так как при данном методе культивирования опят урожай получают через 5–6 месяцев, этот способ также мало подходит для их коммерческого выращивания.

Выращивание опят на даче на древесных отходах позволяет получить максимальный урожай грибов уже спустя 2 месяца после заполнения подготовленного субстрата мицелием, поэтому он активно используется на грибоводческих фермах. Для выращивания опят надо предварительно приготовить древесный субстрат, который составляют из щепы, стружек и опилок по формуле: на каждую часть щепы – такой же объем стружки и двойной объем опилок. Древесный субстрат необходимо тщательно просушить для уничтожения патогенных микроорганизмов. Дополнительно эта операция помогает подготовить древесину к максимальному впитыванию питательного состава, который делают на основе плодового или ягодного пюре и овсяной муки в равных пропорциях. Для выращивания грибов опят на каждый литр воды нужно взять по 30 г ягодно-мучной смеси. Овсяную муку можно заменить кукурузной или крахмалом. Смесь требуется прокипятить на слабом огне в течение 20 мин, подливая воду по мере ее испарения. Просушенную древесину раскладывают по трехлитровым банкам (можно использовать и банки большей емкости), заливают кипящим раствором, плотно накрывают крышками и ставят на 10 ч в темное теплое место, после чего сливают раствор и заселяют подготовленный древесный субстрат мицелием. Оптимальная температура древесной смеси для разрастания грибницы составляет 23–25 °C. Расход мицелия для выращивания опят – 50 г на каждую трехлитровую банку субстрата. Грибницу тщательно перемешивают со всей массой древесного состава, после чего накрывают крышкой со сделанным в ней отверстием диаметром 1,5 см, которое сверху закрывают поролоновой пробкой. После формирования плодовых тел крышки с банок снимают.

Точно таким же способом опята выращивают в полиэтиленовых мешках, в которых проделывают отверстия в верхней части пакета. Во время роста грибов в помещении для выращивания нужно поддерживать высокий уровень влажности – около 90–95 %.

Так как при росте плодовых тел выделяется углекислый газ, помещения надо проветривать не реже 1 раза каждые 24 ч. Выросшие грибы вручную срезают ножом, после чего субстрат оставляют для второй волны плодоношения. Вслед за сбором грибов второй волны древесный субстрат заменяют новым, а использованный применяют в качестве органического удобрения в садах и огородах.

Подробно о выращивании опят рассказывается в этом видео:

Выведение новых штаммов грибов путем химического мутагенеза базидиоспор

Микобиология. 2011 декабрь; 39(4): 272–277.

, ¹ , ¹ , ¹ , ² и , ² и ^{1 1} 6 JIA Lee

¹ Отдел микробиологии и научно-исследовательского института жизни наук, Геонгсанг Национальный университет, Jinju 660-701, Корея.

Hyeon-Woo Kang

¹ Департамент микробиологии и научно-исследовательский институт наук о жизни, Национальный университет Кёнсан, Чинджу 660-701, Корея.

Сан-Ву Ким

¹ Департамент микробиологии и Научно-исследовательский институт наук о жизни, Национальный университет Кёнсан, Чинджу 660-701, Корея.

Чанг-Юн Ли

² Greenpeace Mushroom Co., Чхондо 714-852, Корея.

Hyeon-Su Ro

¹ Департамент микробиологии и Научно-исследовательский институт наук о жизни, Национальный университет Кёнсан, Чинджу 660-701, Корея.

¹ Департамент микробиологии и научно-исследовательский институт наук о жизни, Национальный университет Кёнсан, Чинджу 660-701, Корея.

² Greenpeace Mushroom Co., Чхондо 714-852, Корея.

Автор, ответственный за переписку.

Поступила в редакцию 30 сентября 2011 г.; Принято 7 октября 2011 г.

Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution (http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0/), которая разрешает неограниченное некоммерческое использование. , распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы. Эта статья цитировалась другими статьями в PMC.

Abstract

Химический мутагенез базидиоспор Hypsizygus marmoreus позволил получить новые штаммы грибов. Базидоспоры обрабатывали метиловым эфиром метансульфоната, алкилирующим агентом, с получением 400 мутантных монокариотических мицелий. Двадцать быстрорастущих мицелий были отобраны и скрещены друг с другом путем слияния гиф. Пятьдесят из 190 спариваний были успешными (коэффициент спаривания 26,3%), судя по образованию зажимных соединений. Мутантные дикарионы культивировали для изучения их морфологических и культивационных характеристик.Мутантные штаммы № 3 и № 5 показали увеличение продукции плодовых тел на 10% и 6% соответственно. Восемь мутантных штаммов показали замедленное и сниженное образование зачатков, что привело к снижению выхода продукции при более длительном периоде культивирования. Число плодовых тел у мутанта № 31 с редуцированной примордиальной формацией было всего 15 по сравнению с родительским числом 65. Другим интересным фенотипом было плодовое тело с уплощенной ножкой и ворсинкой. Дикарионы, полученные в результате спаривания с мутантной спорой No.Образовано 14 плоских плодовых тел. Дальнейшие молекулярно-биологические исследования предоставят детали механизма. Эта работа показывает, что подход химического мутагенеза широко используется при разработке штаммов грибов, а также при создании ресурсов для молекулярно-генетических исследований.

Ключевые слова: Разведение, Химический мутагенез, Hypsizygus , Spore

Введение

Hypsizygus marmoreus представляет собой гетероталлический двухфакторный гриб, произрастающий в Восточной Азии.Он растет на мертвой древесине широколиственных деревьев, таких как бук, ива и вяз. Плодовое тело H. marmoreus является одним из основных грибных продуктов в Восточной Азии. Создание полуавтоматических установок по выращиванию грибов облегчило коммерческое выращивание этого гриба в широкогорлых полипропиленовых бутылях с твердыми субстратами [1]. Штаммы H. marmoreus для коммерческого производства обычно происходят из Японии, где это второй по популярности гриб [2]. Хотя в азиатских странах, включая Корею, Тайвань и Китай, есть несколько местных сортов [2], ни один из них не может сравниться с японскими сортами по характеристикам выращивания и урожайности. Поэтому разработка новых штаммов H. marmoreus будет полезна для дальнейшего роста грибной индустрии.

Разведение грибов включает различные методы, включая скрещивание мицелия, слияние протопластов и молекулярно-генетическую трансформацию. Спаривание монокариотического мицелия путем слияния гиф является типичным методом получения новых дикариотических штаммов.Недавно с использованием этого метода были получены штаммы Pleurotus ostreatus , адаптированные к теплым условиям [3]. Слияние протопластов — особенно эффективный метод получения новых грибов из двух разных видов. Патра и др. [4] создали гибридный гриб, который продуцирует иммуноактивный полисахарид путем слияния протопластов между P. florida и Volvariella volvacea . Точно так же гибридные грибы, продуцирующие антитромбиновые агенты, были получены путем слияния протопластов между Laetiporus sulphureus и H. marmoreus [5]. В данном случае L. sulphureus был продуцентом антитромбиновых агентов, но его было трудно выращивать. Это ограничение было преодолено путем создания штаммов слияния с H. marmoreus , культивирование которых было хорошо зарекомендовавшим себя. Была предпринята попытка молекулярной селекции путем трансформации генов для создания нового штамма с определенными свойствами. В частности, гены ферментов биодеградации часто являются мишенями для генетической трансформации грибов [6, 7]. Опосредованная ферментами рестрикции интеграция [8] и опосредованная Agrobacterium tumefaciens трансформация являются некоторыми доступными методами [9].Генетическая трансформация при разведении съедобных грибов не допускается из соображений безопасности. Генерация нового штамма во многом зависит от традиционного мицелиального спаривания.

Спаривание тетраполярного гриба, образующего четыре вида гаплоидных базидиоспор, регулируется генами типа спаривания в двух геномных локусах. Гены в локусе А типа спаривания контролируют начальное спаривание гаплоидных ядер, синхронное деление ядерной пары и развитие зажимных клеток. Локус типа спаривания В контролирует реципрокный ядерный обмен и миграцию [10].Локус В содержит гены феромона и рецептора феромона [10-12]. Монокариотический мицелий развился из базидиоспор, спаривающихся друг с другом правильными комбинациями совместимых генов типа спаривания. Поэтому крайне важно собирать базидиоспоры от различных родительских штаммов. Химический мутагенез базидиоспор является ценным инструментом для создания разнообразия монокариотического мицелия без необходимости сбора дикорастущих грибов. Лю и др. [13] недавно создали устойчивый к холоду штамм V.volvacea путем случайного мутагенеза с использованием алкилирующего мутагена этилметилсульфоната (EMS). Соответственно, в этом исследовании мы сообщаем о создании новых штаммов H. marmoreus путем химического мутагенеза базидиоспор и последующего спаривания мицелия.

Материалы и методы.

Штаммы и условия культивирования.Родительский и мутантный мицелии содержались на полных грибных средах путем периодического переноса. Для жидкой культуры пять блоков агара (диаметром 1 см) из чашки с картофельно-декстрозным агаром (PDA) инокулировали в бульон с картофельной декстрозой (PDB; Ventech Bio, Сеул, Корея), содержащий картофельный крахмал (4 г/л) и глюкозу. (20 г/л) и инкубировали в течение 3 недель при 25°С.

Химический мутагенез базидиоспор

Базидиоспоры суспендировали в 1 мл PDB. Чтобы ослабить структуру оболочки спор, суспензию инкубировали при 25 ℃ в течение 12 часов, а споры собирали центрифугированием (5 минут, 10000 об/мин).Собранные споры промывали деионизированной водой и суспендировали в 1 мл деионизированной воды. Концентрацию спор доводили до 1,0 × 10 ⁷ спор/мл. Для химического мутагенеза алкилирующий агент метилметансульфоновую кислоту (MMS, Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) наносили в различных концентрациях на суспензии спор на 1 час при 25 ℃. Споры, обработанные MMS, собирали и трижды промывали фосфатно-солевым буфером. Споры ресуспендировали в деионизированной воде и суспензию наносили на КПК.Чашку с агаром инкубировали при 25℃ в течение 10 дней для роста мицелия.

Скрининг мутантного монокариотического мицелия и спаривание

Мутантный монокариотический мицелий отбирали на основе скорости роста мицелия. Скорость роста определяли по радиальной длине роста монокариотического мицелия на КПК. Спаривание проводили, помещая блоки мицелия (3 × 3 мм) противоположных штаммов на одну и ту же чашку КПК на расстоянии 1 см друг от друга. Спаривание было подтверждено образованием зажимных соединений под световым микроскопом после инкубации при 30 ℃ в течение 7 дней.

Культивирование мутантных дикарионов

Для культивирования икру мицелия из жидкой культуры инокулировали на твердый субстрат, состоящий из опилок сосны (23%), кукурузного початка (32%), рисовых отрубей (32%) и шелухи сои (22%) в полипропиленовой бутыли с широким горлышком при 20℃. Мицелий развивался в бутылке с субстратом в течение 70 дней при 18℃. Плодоношение было вызвано изменением температуры культивирования до 15 ℃ в инкубационной комнате с 3000 ~ 4000 ppm CO ₂ и относительной влажностью 95%.

Результаты и обсуждение

Влияние MMS на выживание базидиоспор

MMS представляет собой алкилирующий агент, который метилирует положения N7 и N3 гуаниновых и адениновых оснований соответственно. Он вызывает неправильное спаривание оснований и останавливает вилки репликации, чтобы индуцировать систему эксцизионной репарации оснований и экспрессию ДНК-алкилтрансферазы [14, 15]. Для получения мутантного монокариотического мицелия базидиоспоры H. marmoreus Hm3-10 обрабатывали различными концентрациями MMS.Выживаемость снижалась с увеличением концентрации MMS (13). Скорость достигала 12% при 0,65 об.% MMS. Этот показатель был менее половины выживаемости (33%), продуцируемого аналогичным алкилирующим агентом ЭМС в концентрации 0,75 об. % на базидиоспорах V. volvacea [13]. Разница может быть связана с разной восприимчивостью спор к алкилирующим агентам. Концентрацию MMS устанавливали равной 0,65% для образования мутантных спор.

Влияние концентрации метилового эфира метансульфоната (ММС) на выживаемость и прорастание базидиоспор.A, выживаемость спор при различных концентрациях MMS. Базидиоспоры (1,0 × 10 ⁵ ) обрабатывали ММС в течение 1 часа при 25°С; Б, без лечения; C, обработка 0,65% MMS.

Характеристики роста мутантного монокариотического мицелия и спаривания

В результате мутагенеза MMS было получено в общей сложности 400 мутантных монокариотических мицелий. Выделили 20 быстрорастущих мицелий и определили скорость их роста и плотность гиф (). Самыми быстрорастущими монокариотическими мицелиями были №7 и №1.10, а № 13, № 16 и № 19 росли медленнее всего. Плотность гиф медленно растущего мицелия в целом была выше, чем у быстрорастущего мицелия.

Таблица 1

Мутантный монокариотический мицелий, отобранный в результате мутагенеза метилметансульфоновой кислоты

Инбридинг проводили путем скрещивания мутантных монокарионов. Каждый из 20 монокариотических мицелий был скрещен с оставшимися 19 монокарионами, в результате чего было получено 190 скрещиваний. Было замечено, что 50 из 190 спариваний образуют зажимные соединения, что свидетельствует об успешном спаривании ().Частота спаривания составила 26,3%, что близко к ожидаемой частоте спаривания у тетраполярных базидиомицетов.

Таблица 2

Спаривание мутантных монокарионов

Особенности культивирования мутантных дикарионных штаммов

Спаренные дикариотические мицелии культивировали на твердом субстрате в полипропиленовых флаконах. Для культивирования мутантных штаммов жидкие икры, выращенные в PDB, инокулировали в твердый субстрат. Твердые среды инкубировали в течение 70 дней при 18℃ для развития мицелия.Некоторые медленнорастущие мицелии, в том числе штаммы № 2, 11, 12, 14, 15 и многие другие, в этих условиях росли не полностью (данные не представлены). Через 70 дней образование зачатков индуцировали путем удаления мицелия с верхней части бутылки. Бутылки переносили в комнату для культивирования и инкубировали еще 24-28 дней для образования плодовых тел. Результаты подведены в . Многие мутантные дикарионы не образовывали примордиев (№ 9, 41 и 43) или демонстрировали отсроченное и редуцированное образование зачатков (№ 4).1, 2, 13, 20, 29~31 и 45). Период культивирования родительского штамма Hm3-10 до сбора урожая составлял 24 дня в помещении для культивирования. Плодовое тело имело остроконечный ворс светло-коричневого цвета. Выход продукции составил 155 г на бутылку. Мутантные штаммы дикариона № 3, 5, 33 и 34 дали сравнимые с родительским штаммом результаты по выходу продукции. Колосья штамма № 3 были темно-коричневыми и выпуклыми с выходом продукции 172 г/бутылка. Штаммы 5, 33 и 34 были темно-коричневыми или светло-серыми плоскими (данные не показаны) с несколько более низкой продуктивностью, чем у родительского штамма.

Таблица 3

Характеристики культивирования мутантных дикарионов

Мутанты с аномальной морфологией

Большинство мутантов проявляли некоторые характерные особенности морфологии плодовых тел. У мутантных штаммов с замедленным и сниженным образованием зачатков (№ 1, 2, 13, 20, 29~31 и 45) для полного роста потребовалось более 31 дня. Более того, у этих мутантов резко сократилось количество плодовых тел. Например, количество плодовых тел у штамма No.31 было всего 15, в то время как у родительского штамма было 65 (для родительского штамма и для мутантов). Причины задержки плодоношения и уменьшения количества плодовых тел неизвестны. Вторым наиболее частым фенотипом среди мутантов были уплощенные ворсинки и морфология ножки (). Мутантные штаммы № 44, 47, 48 и 49 показали этот фенотип. Аномалия наблюдалась на ранней стадии плодоношения. Плодовые тела ранней стадии мутантного штамма № 44 выглядели уплощенными, в то время как родительский штамм имел форму, похожую на кеглю для боулинга ().Уплощенная морфология стала очевидной после роста за несколько дней до сбора урожая (). Большинство плодовых тел имели короткую плоскую ножку с удлиненным ворсом на вершине (). Этот фенотип произошел только от дикарионов, скрещивающихся с монокариотическим мицелием, полученным из мутантной базидоспоры № 14, которая показала умеренный рост мицелия с низкой плотностью гиф (). Мутантные дикарионы № 44, 47, 48 и 49 были сопряжены со спорой № 14 со спорами № 11, 14, 17 и 19 соответственно ().Другие пары с № 14, в том числе дикарионы № 7, 17, 26 и 30, не проявляли такой морфологии, за исключением пониженного выхода продукции (). Следовательно, возможно, что аномалия может находиться в хромосомах споры № 14. Но аномалия проявляется только при встрече с определенным партнером, который может индуцировать фенотип.

Морфология выбранных мутантных плодовых тел. A, D — родительский штамм Hm3-10; Б, Д — мутантный штамм № 31; C, F, Мутантный штамм № 44.

Характеристики роста родительского штамма (А~С) и мутантного штамма №44 (Г~Ф). Снимки были сделаны через 13 дней (A, D) и 21 день (B, E) после индукции примордиала. Плодовые тела послеуборочных образцов показаны на (C) для родительского штамма и (F) для мутантного штамма.

В заключение, эта работа показывает, что некоторые мутантные дикарионы, полученные в результате химического мутагенеза, превосходят характеристики родительского культивирования и поэтому заслуживают дальнейшего изучения. Различные неправильные морфологии, возникающие в результате химического мутагенеза, будут полезными ресурсами для молекулярно-генетических исследований.

Благодарности

Эта работа была поддержана Исследовательской программой по экспорту грибов Министерства сельского и лесного хозяйства Республики Корея.

Ссылки

1. Lee CY, Park JE, Kim BB, Kim SM, Ro HS. Определение минеральных компонентов в субстратах для выращивания съедобных грибов и их поступление в плодовые тела. Микобиология. 2009; 37: 109–113. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]2. Lim YJ, Lee CY, Park JE, Kim SW, Lee HS, Ro HS. Молекулярно-генетическая классификация Hypsizigus marmoreus и разработка штаммоспецифических маркеров.Корейский J Mycol. 2010; 38:34–39. [Google Академия]3. Гайтан-Эрнандес Р., Салмонес Д. Получение и характеристика штаммов Pleurotus ostreatus для коммерческого выращивания в теплых условиях окружающей среды. Научный Хортик. 2008; 118:106–110. [Google Академия]4. Патра С., Майти К.К., Бхуния С.К., Дей Б., Мандал С., Майти Т.К., Сикдар С.Р., Ислам С.С. Структурная характеристика и изучение иммуностимулирующих свойств гетерогликана, выделенного из соматического гибридного гриба (PfloVv1aFB) Pleurotus florida и Volvariella volvacea .Карбогид Рез. 2011; 346:1967–1972. [PubMed] [Google Scholar]5. Окамура Т., Такено Т., Дохи М., Ясумаса И., Хаяши Т., Тойода М., Нода Х., Фукуда С., Хорие Н., Осуги М. Разработка грибов для предотвращения тромбоза путем слияния протопластов. J Biosci Bioeng. 2000; 89: 474–478. [PubMed] [Google Scholar]6. Irie T, Honda Y, Watanabe T, Kuwahara M. Гомологическая экспрессия генов рекомбинантной марганцевой пероксидазы в лигнинолитических грибках Pleurotus ostreatus . Приложение Microbiol Biotechnol. 2001; 55: 566–570.[PubMed] [Google Scholar]7. Лим Х, Чой ХТ. Повышенная экспрессия хитиназы при автолизе гриба Coprinellus congregatus . J микробиол. 2009; 47: 225–228. [PubMed] [Google Scholar]8. Ким С, Сонг Дж, Чой ХТ. Генетическая трансформация и выделение мутантов в Ganoderma lucidum путем интеграции, опосредованной рестрикционными ферментами. FEMS Microbiol Lett. 2004; 233:201–204. [PubMed] [Google Scholar]9. Микош Т.С., Лаврийссен Б., Зонненберг А.С., ван Гринсвен Л.Дж. Трансформация культивируемого гриба Agaricus bisporus (Lange) с использованием Т-ДНК из Agrobacterium tumefaciens .Карр Жене. 2001; 39:35–39. [PubMed] [Google Scholar] 10. Браун А.Дж., Касселтон Л.А. Спаривание в грибах: увеличивает шансы, но продлевает роман. Тенденции Жене. 2001; 17: 393–400. [PubMed] [Google Scholar] 11. Кронстад Ю.В., Стабен С. Тип спаривания у мицелиальных грибов. Анну Рев Жене. 1997; 31: 245–276. [PubMed] [Google Scholar] 12. Ван Пир А.Ф., Пак С.Ю., Шин П.Г., Чан К.И., Ю Ю.Б., Пак Ю.Дж., Ли Б.М., Сун Г.Х., Джеймс Т.И., Конг В.С. Сравнительная геномика локусов типа спаривания гриба Flammulina velutipes выявляет широко распространенную синтению и недавние инверсии. ПЛОС Один. 2011;6:e22249. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]13. Лю З., Чжан К., Линь Дж. Ф., Го Л.К. Выведение холодоустойчивого штамма методом химического мутагенеза в Volvariella volvacea . Научный Хортик. 2011; 130:18–24. [Google Академия] 14. Беранек ДТ. Распределение метильных и этильных аддуктов при алкилировании монофункциональными алкилирующими агентами. Мутат рез. 1990; 231:11–30. [PubMed] [Google Scholar] 15. Линдал Т., Вуд Р.Д. Контроль качества путем репарации ДНК. Наука. 1999; 286:1897–1905. [PubMed] [Google Scholar]

Выведение новых штаммов грибов

Когда дело доходит до выбора полового партнера, варианты для грибов кажутся безграничными.Многие из грибов, размножающихся половым путем, являются изагомными, что означает, что их репродуктивные клетки не отличаются по внешнему виду. Таким образом, термины «мужской» и «женский» не применимы ко многим членам царства грибов. Вместо этого их воспроизводство представляет собой сложный процесс, регулируемый типами спаривания.

«Известно, что некоторые виды имеют тысячи различных вариантов спаривания», — говорит Томас Абель из отдела распознавания образов и биоинформатики (факультет электротехники, математики и компьютерных наук).Его исследовательская группа специализируется на расшифровке работы сложных геномов, в том числе геномов грибов.

Микробиологов немного беспокоит сложная система размножения грибов. «Чрезвычайно сложно изучать генетику грибов, таких как шампиньоны», — говорит Абель. «Их геномная архитектура сильно отличается от человеческой».

Новый знаковый документ
В 2016 году исследовательская группа Абила опубликовала важную статью в Nature Scientific Reports, в которой группа раскрыла, что каждая грибковая клетка содержит два или более ядер, содержащих ДНК своих предков.Напротив, большинство организмов — все животные и растения — содержат только одно клеточное ядро ​​в каждой клетке, в котором смешана ДНК обоих родителей.

Теперь исследователи опубликовали еще одну знаменательную статью вместе с коллегами из Утрехтского и Вагенингенского университетов. Они обнаружили, что гены родительской ДНК экспрессируются в разное время в процессе развития грибов. 11 апреля 2018 года в журнале PNAS была опубликована статья «Специфическая для ядра экспрессия в многоядерном грибообразующем грибе Agaricus bisporus выявляет различные программы ядерной регуляции».

«Распутать это было непросто, — говорит Абил. «Вы можете исследовать генетическую активность (производство белков). Но если вы хотите связать производство белка с конкретным родительским геном, вам нужно использовать очень сложные алгоритмы для анализа ваших данных. Именно на этом специализируется наша группа».

Пиво и хлеб
Грибы, такие как грибы, играют важную роль в нашей экосистеме. В природе они перерабатывают мертвые растения и животных.Мы, люди, не только едим грибы, но и используем их для приготовления таких продуктов, как хлеб и пиво, а также в качестве биореакторов для производства лекарств и других веществ. Они также играют непосредственную роль в здоровье человека, поскольку могут вызывать инфекции.

Влияние нового открытия заключается в том, что отныне любое исследование грибов, например, поиск генов, участвующих в формировании грибов, начинается с определения активного ядра — «отцовского» или «материнского» ядра. Это новое понимание молекулярных механизмов в ДНК грибов может быть использовано для выведения новых штаммов, которые могут улучшить выращивание съедобных грибов, таких как обыкновенный гриб.

Большая часть статьи в PNAS основана на диссертации Тиса Германа, получившего докторскую степень в пятницу, 6 апреля, в Делфтском техническом университете. Для своего докторского исследования он разработал и применил методы биоинформатического анализа, чтобы понять различия внутри грибообразующих грибов и между ними. Явление, описанное в PNAS, является примером этого.

Наработки в селекции Agaricus bisporus var. bisporus: достигнутый прогресс, а также технические и юридические препятствия

Acquaah G (2015) Традиционные принципы и методы селекции растений. 115–158 дои: 10.1007/978-3-319-22521-0_5

Adebambo AO (2011) Комбинирование возможностей четырех пород кур для изменения эффективности кормления: предварительная оценка улучшения качества кур в Нигерии. Trop Anim Health Prod 43 (8): 1465. doi: 10.1007/s11250-011-9844-y

Артикул пабмед Google Scholar

Брюинз М. (2013 г.) Взгляды Международной федерации семян (ISF) на производные сорта.В: Семинар по существенно производным сортам (EDV) (UPOV/SEM/GE/13)

Callac P (1995) Разведение съедобных грибов с акцентом на изменчивость среди французских генетических ресурсов Agaricus bisporus . Can J Bot 73 (дополнение 1): 7

Google Scholar

Callac P (2002) Зародышевая плазма Agaricus bisporus : основные результаты после десятилетнего сбора во Франции, Греции и Северной Америке. Acta Horticulturae Труды 2-го Балканского симпозиума по овощам и картофелю 579:7

Каллак П., Биллетт С., Имбернон М., Керриган Р.В. (1993) Морфологический, генетический анализ и анализ интерферентности выявил новый тетраспоровый сорт Agaricus bisporus из пустыни Сонора в Калифорнии. Микология 85 (5): 835–851. дои: 10.2307/3760617

Артикул Google Scholar

Каллак П., Десмергер С., Керриган Р.В., Имбернон М. (1997) Сохранение генетической связи с расширением карты в отдаленно родственных скрещиваниях Agaricus bisporus .FEMS Microbiol Lett 146 (2): 235–240. дои: 10.1016/S0378-1097(96)00482-X

КАС Статья пабмед Google Scholar

Callac P, Hocquart S, Imbernon M, Desmerger C, Olivier J-M (1998a) Аллели Bsn-t из французских полевых штаммов Agaricus bisporus . Appl Environm Microbiol 64(6):2105–2110

CAS Google Scholar

Callac P, Moquet F, Imbernon M, Guedes-Lafargue MR, Mamoun M, Olivier J-M (1998b) Доказательства PPC1, детерминанта цвета ворсинок плодовых тел Agaricus bisporus . Fung Genet Biol 23(2):181–188. дои: 10.1006/fgbi.1998.1035

КАС Статья Google Scholar

Chen X, Ospina-Giraldo MD, Wilkinson V, Royse DJ, Romaine CP (2003) Устойчивость пред- и постэпидемических штаммов Agaricus bisporus к Trichoderma aggressivum . Завод Дис 87(12):5

Артикул Google Scholar

Dragt J (1995) Устойчивость диких видов Agaricus bisporus к микопаразиту Verticillium fungicola var. Фунгикола . Муш Наука 14:5

Google Scholar

Elliott TJ, Langton FA (1981) Улучшение штамма культивируемых грибов Agaricus bisporus . Евфитика 30 (1): 175–182. дои: 10.1007/bf00033675

Артикул Google Scholar

Foulongne-Oriol M (2012) Картирование генетических связей у грибов: текущее состояние, приложения и будущие тенденции. Appl Microbiol Biotechnol 95(4):891–904. дои: 10.1007/s00253-012-4228-4

КАС Статья пабмед Google Scholar

Фулонн-Ориол М., Дюфурк Р., Спатаро С., Девесс С., Броли А., Родье А., Савойя Дж.М. (2011a) Сравнительное картирование сцепления у белого шампиньона Agaricus bisporus обеспечивает основу для управления размножением. Курр Жене 57 (1): 39–50. doi: 10.1007/s00294-010-0325-z

КАС Статья пабмед Google Scholar

Фулонгн-Ориол М., Родье А., Руссо Т., Ларджто М., Савойя Дж.М. (2011b) Количественная генетика для анализа грибково-грибкового взаимодействия между Lecanicillium verticillium и белым шампиньоном Agaricus bisporus 11Fung Biol 115 (4–5): 421–431. doi: 10.1016/j.funbio.2011.02.017

Артикул Google Scholar

Фулонн-Ориол М. , Родье А., Руссо Т., Савойя Дж. М. (2012a) Количественное картирование локуса признаков компонентов, связанных с урожайностью, и олигогенный контроль цвета шляпки шампиньона, Agaricus bisporus . Appl Environm Microbiol 78(7):2422–2434. doi: 10.1128/AEM.07516-11

КАС Статья Google Scholar

Foulongne-Oriol M, Rodier A, Savoie JM (2012b) Взаимосвязь между компонентами урожайности и частичной устойчивостью к Lecanicillium fungicola у шампиньонов, Agaricus bisporus , оцененная с помощью картирования локусов количественных признаков.Appl Environm Microbiol 78(7):2435–2442. doi: 10.1128/AEM.07554-11

КАС Статья Google Scholar

Фулонн-Ориол М., Спатаро С., Каталот В., Монллор С., Савойя Дж.М. (2010) Расширенная карта генетического сцепления межсортового Agaricus bisporus var. bisporus x A. bisporus var. Гибрид burnettii , основанный на маркерах AFLP, SSR и CAPS, проливает свет на рекомбинационное поведение этого вида.Fung Genet Biol 47 (3): 226–236. doi:10.1016/j.fgb.2009.12.003

КАС Статья Google Scholar

Foulongne-Oriol M, Spataro C, Savoie JM (2009) Новые микросателлитные маркеры, подходящие для генетических исследований белого шампиньона Agaricus bisporus . Appl Microbiol Biotechnol 84(6):1125–1135. дои: 10.1007/s00253-009-2030-8

КАС Статья пабмед Google Scholar

Fritsche G (1981) Некоторые замечания по разведению, поддержанию штаммов и нереста Agaricus bisporus и A.биторкис . Муш Наука XI:19

Google Scholar

Fritsche G (1982) Генетика и селекция культивируемых грибов. Материалы 21-го Международного садоводческого конгресса, Гамбург, Германия 2:12

Фу И, Ван С, Ли Д, Лю И, Сонг Б, Чжан С, Ван Ц, Чен М, Чжан З, Ли И (2016) Выявление устойчивости к болезни мокрого пузыря и генетического разнообразия у диких и культивируемых штаммов Agaricus bisporus .Int J Mol Sci 17(10):12. дои: 10.3390/ijms17101568

Артикул Google Scholar

Гао В., Баарс Дж. Дж., Долстра О., Виссер Р. Г., Зонненберг А. С. (2013) Анализ генетической изменчивости и комбинированной способности чувствительности к синякам у Agaricus bisporus . PLoS One 8(10):e76826. doi:10.1371/journal.pone.0076826

КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

Гао В., Баарс Дж. Дж., Малиепаард С., Виссер Р. Г., Чжан Дж., Зонненберг А. С. (2016) Многофункциональный анализ QTL для агрономических и качественных признаков Agaricus bisporus (шампиньоны). АМБ Экспресс 6(1):67. дои: 10.1186/s13568-016-0239-3

Артикул пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

Гао В., Вейн А., Баарс Дж. Дж., Мес Дж. Дж., Виссер Р. Г., Зонненберг А. С. (2015) Количественное картирование локуса признаков для чувствительности к синякам и цвета шляпки Agaricus bisporus (шампиньоны). Fung Gen Biol 77: 69–81. doi:10.1016/j.fgb.2015.04.003

КАС Статья Google Scholar

Gaze RH, Calvo-Bado L, Challen MP, Adie BAT, Romaine CP (2000) Новое вирусное заболевание Agaricus bisporus ? Муш Наука 15:5

Google Scholar

Гринсвен Ван Л. (1988) Выращивание грибов.Darlington Mushroom Labioratorium Ltd Rustington, Sussex

Griffing B (1956) Концепция общей и специфической комбинированной способности в отношении систем диаллельного скрещивания. Austral J Biol Sci 9:21

Google Scholar

Hatvani L, Antal Z, Manczinger L, Szekeres A, Druzhinina IS, Kubicek CP, Nagy A, Nagy E, Vágvölgyi C, Kredics L (2007) Болезни зеленой плесени Agaricus и Pleurotus spp.вызываются родственными, но филогенетически различными видами Trichoderma . Фитопатол 97 (4): 532–537. дои: 10.1094 / фито-97-4-0532

КАС Статья Google Scholar

Hollings M (1962) Вирусы, вызывающие отмирание культивируемых грибов. Природа 196 (8 декабря): 4

Google Scholar

Imbernon M, Callac P, Gasqui P, Kerrigan RW, Velcko AJ (1996) BSN, основной детерминант базидиального числа спор и репродуктивного режима в Agaricus bisporus , картируется на хромосоме I.Микология 88 (5): 749–761. дои: 10.2307/3760970

КАС Статья Google Scholar

Керриган Р. В. (1996) Характеристики большой коллекции зародышевой плазмы съедобных диких грибов: Программа ресурсов Agaricus . В: Sampson RA (ed) Коллекции культур для улучшения качества жизни:6

Kerrigan RW (2004) Разнообразие признаков в дикой природе Agaricus bisporus . Муш Наука 16:8

Google Scholar

Керриган Р.В., Баллер Л.М., Хорген П.А., Андерсон Дж.Б. (1992) Стратегии эффективного восстановления гомокариона Agaricus bisporus.Mycologia 84(4):575–579

Kerrigan RW, Carvalho DB, Horgen PA, Anderson JB (1995) Местные и интродуцированные популяции Agaricus bisporus , культивируемого шампиньона, в восточной и западной Канаде: последствия для популяционная биология, управление ресурсами и сохранение генетического разнообразия. Can J Bot 73 (12): 1925–1938. дои: 10.1139/b95-205

Артикул Google Scholar

Керриган Р. В., Карвалью Д.Б., Хорген П.А., Андерсон Дж.Б. (1998) Местная прибрежная калифорнийская популяция гриба Agaricus bisporus , культивируемого вида, может оказаться под угрозой исчезновения.Мол Экол 7(1):35–45. doi:10.1046/j.1365-294x.1998.00294.x

Артикул Google Scholar

Керриган Р.В., Имбернон М., Каллак П., Биллетт С., Оливье Дж.М. (1994) Гетероталлический жизненный цикл Agaricus bisporus var. burnettii и наследование его тетраспорового признака. Опыт Mycol 18 (3): 193–210. doi: 10.1006 / emyc.1994.1020

Артикул Google Scholar

Керриган Р.В., Ройер Дж.К., Баллер Л.М., Кохли Ю., Хорген П.А., Андерсон Дж.Б. (1993)Мейотическое поведение и отношения сцепления во вторично гомоталличном грибе Agaricus bisporus .Генетика 133(2):225–236

CAS пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

Khush RS, Becker E, Wach M (1992) Полиморфизм амплификации ДНК культивируемых грибов Agaricus bisporus . Appl Environm Microbiol 58(9):2971–2977

CAS Google Scholar

Kothe E (2001) Гены типа спаривания для улучшения штаммов базидиомицетов в грибоводстве.Appl Microbiol Biotechnol 56 (5–6): 602–612. дои: 10.1007/s002530100763

КАС Статья пабмед Google Scholar

Kües U (2015) От двух до многих: несколько типов спаривания у базидиомицетов. Fung Biol Rev 29 (3–4): 126–166. doi: 10.1016/j.fbr.2015.11.001

Артикул Google Scholar

Largeteau ML (2004) Agaricus чувствительность к Verticillium fungicola .Муш Наука 16:10

Google Scholar

Largeteau ML, Callac P, Navarro-Rodriguez AM, Savoie JM (2011) Разнообразие способности диких изолятов Agaricus bisporus плодоносить при высокой температуре (25 градусов C). Fung Biol 115 (11): 1186–1195. doi: 10.1016/j.funbio.2011.08.004

Артикул Google Scholar

Loftus MG, Moore D, Elliott TJ (1988) Полиморфизмы ДНК в коммерческих и диких штаммах культивируемых грибов, Agaricus bisporus .Theor Appl Genet 76 (5): 712–718. дои: 10.1007/bf00303517

КАС Статья пабмед Google Scholar

Линч М., Уолш Б. (1998) Генетика и анализ количественных признаков. MA Sinauer, Сандерленд, стр. 611–618

Google Scholar

Mata G, Medel R, Callac P, Billette C, Garibay-Orijel R (2016) Primer registro de Agaricus bisporus (Basidiomycota, Agaricaceae) silvestre en Tlaxcala y Veracruz, México.Revista Mexicana de Biodiversidad 87 (1): 10–17. doi: 10.1016/j.rmb.2016.01.019

Артикул Google Scholar

May B, Royse DJ (1981) Применение электрофоретического метода для выяснения генетической истории жизни съедобных грибов. Муш Наука 11:20

Google Scholar

May B, Royse DJ (1982) Подтверждение скрещивания линий Agaricus brunnescens с помощью изозимного анализа.Exp Mycol 6:10

Артикул Google Scholar

Meiyan C, Jianhua L, Hongrong L, Zhongjie G, Zhenghui L (2009) ДНК-дактилоскопия генетического разнообразия культурных штаммов Agaricus bisporus . Chin Agricult Sci Bull 25(4):8

Google Scholar

Moore AJ, Challen MP, Warner PJ, Elliott TJ (2001) Дискриминация RAPD сортов грибов Agaricus bisporus .Appl Microbiol Biotechnol 55(6):742–749. дои: 10.1007/s002530000588

КАС Статья пабмед Google Scholar

Moquet F, Desmerger C, Mamoun M, Ramos-Guedes-Lafargue M, Olivier J-M (1999) Локус количественного признака Agaricus bisporus , устойчивость к Pseudomonas tolaasii , тесно связан с естественным цветом шляпки. Fung Genet Biol 28 (1): 34–42. дои: 10.1006/fgbi.1999.1157

КАС Статья Google Scholar

Морин Э., Колер А., Бейкер А.Р., Фулонн-Ориол М., Ломбард В., Надь Л.Г., Ом Р.А., Патышакулиева А., Брун А., Аэртс А.Л., Бейли А.М., Биллетт С., Коутиньо П.М., Дикин Г., Доддапанени Х. , Флудас Д., Гримвуд Дж., Хилден К., Куес У., Лабутти К.М., Лапидус А., Линдквист Э.А., Лукас С.М., Мурат С., Райли Р.В., Саламов А.А., Шмутц Дж., Субраманиан В., Востен Х.А., Сюй Дж., Иствуд Д.К., Фостер GD, Sonnenberg AS, Cullen D, de Vries RP, Lundell T, Hibbett DS, Henrissat B, Burton KS, Kerrigan RW, Challen MP, Grigoriev IV, Martin F (2012) Последовательность генома шампиньона Agaricus bisporus раскрывает механизмы регулирующие адаптацию к богатой гуминами экологической нише.Proc Nat Acad Sci 109 (43): 17501–17506. doi: 10.1073/pnas.1206847109

КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

Raper CA, Raper JR, Miller RE (1972) Генетический анализ жизненного цикла Agaricus bisporus . Микология 64 (5): 1088–1117. дои: 10.2307/3758075

Артикул Google Scholar

Рокни Н., Голтапех Э.М., Шафейния А., Сафайе Н. (2015) Оценка генетического разнообразия среди некоторых коммерческих сортов и иранских диких штаммов Agaricus bisporus с помощью микросателлитных маркеров.Ботаника 94 (1): 9–13. дои: 10.1139/cjb-2015-0131

Артикул Google Scholar

Savoie JM, Bruneau D, Mamoun M (1996) Способность распределения ресурсов диких изолятов Agaricus bisporus на обычном грибном компосте. FEMS Microbiol Ecol 21 (4): 285–292. дои: 10.1016/S0168-6496(96)00064-5

КАС Статья Google Scholar

Seaby DA (1996) Дифференциация таксонов Trichoderma , связанных с производством грибов.Завод Патол 45 (5): 905–912. doi:10.1111/j.1365-3059.1996.tb02901.x

Артикул Google Scholar

Шаттак В.И., Кристи Б., Корсо С. (1993) Принципы анализа комбинационных способностей Гриффинга. Генетика 90 (1): 73–77. дои: 10.1007/bf01435180

Артикул Google Scholar

Sobieralski K, Siwulski M, Frużyńska-Jóźwiak D, Błaszczyk L, Sas-Golak I, Jasińska A (2010) Влияние инфекций с двумя Trichoderma aggressivum F.Изоляты Europaeum по получению некоторых диких штаммов Agaricus bisporus (Lange) Imbach. J Защита растений Рез. 50(4). дои: 10.2478/v10045-010-0083-4

Sonnenberg AS (2005) Разведение грибов: современное состояние. Acta Edulis Fungi 12 (дополнение): 11

Google Scholar

Sonnenberg AS (2013) На пути к лучшей защите новых сортов Agaricus . Грибной бизнес 60:2

Google Scholar

Sonnenberg AS, Gao W, Lavrijssen B, Hendrickx P, Sedaghat-Tellgerd N, Foulongne-Oriol M, Kong WS, Schijlen EG, Baars JJ, Visser RG (2016) Подробный анализ рекомбинационного ландшафта кнопки гриб Agaricus bisporus var. биспор . Fung Genet Biol 93:35–45. doi:10.1016/j.fgb.2016.06.001

КАС Статья Google Scholar

Sonnenberg AS, Van Kempen I, Van Griensven L (1995) Обнаружение дцРНК вируса Agaricus bisporus в чистых культурах, икрой и компосте из икры с помощью RT-PCR. Муш Наука 14:8

Google Scholar

Sonnenberg ASM, Baars JP, Hendrickx PM, Lavrijssen B, Gao W, Weijn A, Mes JJ (2011) Размножение и защита от штаммов у шампиньонов Agaricus bisporus .Proceedings of the 7th International Conference on Mushroom Biology and Mushroom Products 7:9

Summerbell RC, Castle AJ, Horgen PA, Anderson JB (1989) Наследование полиморфизмов длины рестрикционных фрагментов у Agaricus brunnescens . Генетика 123(2):293–300

CAS пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

Wang ZS, Liao JH, Li FG, Chi ZN, Wang HC (1995) Исследования по выведению гибридного штамма AS2796 из Agaricus bisporus для консервирования в Китае.Mush Sci 14:9

CAS Google Scholar

Xu J (1995) Анализ депрессии инбридинга у Agaricus bisporus . Генетика 141(1):137–145

CAS пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

Сюй Дж., Керриган Р.В., Каллак П., Хорген П.А., Андерсон Дж.Б. (1997) Генетическая структура природных популяций Agaricus bisporus , коммерческого шампиньона.J Наследственность 88(6):482–488

Статья Google Scholar

Xu J, Kerrigan RW, Horgen PA, Anderson JB (1993) Локализация гена типа спаривания у Agaricus bisporus . Appl Environm Microbiol 59(9):3044–3049

CAS Google Scholar

Сюй Дж., Керриган Р.В., Зонненберг А.С., Каллак П., Хорген П.А., Андерсон Дж.Б. (1998) Вариации митохондриальной ДНК в природных популяциях грибов Agaricus bisporus .Мол Экол 7(1):19–33. doi:10.1046/j.1365-294x.1998.00301.x

Артикул Google Scholar

Zhang Y, Geng W, Shen Y, Wang Y, Dai Y-C (2014) Выращивание съедобных грибов для обеспечения продовольственной безопасности и развития сельских районов в Китае: биоинновации, распространение технологий и маркетинг. Устойчивое развитие 6(5):2961

Статья Google Scholar

Технология Juncao — размножение грибов с травянистыми растениями: из Китая и мира

Изображение из Minning Town

As Minning Town , телесериал, рассказывающий истории о парной борьбе с бедностью, становится недавним хитом, зрители глубоко тронуты фермерами, которые стремятся выбраться из бедности, их усердный труд по разведению грибов и связь между фермерами и их братьями и сестрами из более развитых районов. В сериале профессор Лин Инонг помог переселившимся фермерам из деревни Миннинг города Нинся развить производство грибов и избавиться от бедности. Персонаж Лин Инонг на самом деле вдохновлен профессором Линь Чжаньси в реальной жизни. Реформированная технология размножения профессора Линя — это решение проблемы угрозы лесам со стороны грибной индустрии. Его новая технология позволяет грибам расти на травяных субстратах вместо срубленных деревьев. Это вселило надежду в устойчивое развитие развивающихся стран.

Профессор Линь Чжаньси

Технология Juncao, что в переводе с китайского означает выращивание грибов с травянистыми растениями, принесла пользу 106 странам и регионам, решив проблему бедности, эрозии почвы и опустынивания. Трава, используемая в этой технологии, местные жители с любовью называют «Китайской травой», «Травой счастья» и «Солнечной травой». Технология Juncao продвигается на 15 языках. Более 10 000 человек прошли обучение как в стране, так и за рубежом. Тринадцать азиатских, африканских и тихоокеанских стран создали учебные и демонстрационные центры технологии.

В 1997 году по запросу правительства провинции Истерн-Хайлендс в Папуа-Новой Гвинее группа китайских экспертов совершила поездку в провинцию и решила создать демонстрационный полигон технологии Дзюнкао в округе Луфа. В следующем году команда профессора Линя привезла горный рис из Китая и успешно вырастила многолетний сорт «Jinshan One» в провинции Восточное нагорье. Впервые в своей истории Папуа-Новая Гвинея смогла выращивать рис. В 2000 году Си Цзиньпин, в то время губернатор провинции Фуцзянь, лично продвигал демонстрационные проекты Juncao и технологий выращивания риса на возвышенностях в провинции Восточное нагорье с помощью провинции Фуцзянь.Много лет спустя Си сказал, что был рад узнать, что проект работает хорошо и приносит хорошие экономические и социальные выгоды. Эта история стала очень популярной в отношениях между Китаем и Папуа-Новой Гвинеей. Губернатор провинции Восточное нагорье Питер Нуму сказал, что Цзюньцао был подарком Китая и помог местным жителям выбраться из бедности.

Сегодня более 700 сельских домохозяйств в провинции Истерн-Хайлендс занимаются выращиванием грибов с помощью технологии Juncao. По словам успешного селекционера, Juncao и шампиньоны легко выращивать и транспортировать.Им не нужны удобрения или пестициды, а экономическая выгода в 20-30 раз выше, чем у капусты, которую они выращивали ранее. Его жизнь стала намного лучше благодаря разведению грибов. Он мог отправить своих детей в школу и позволить себе новую одежду и предметы первой необходимости.

Китайские специалисты также обучили местных студентов выращиванию горного риса и цзунцао. Профессор Линь сказал, что это пример китайского подхода к иностранной помощи: обучение рыбной ловле вместо того, чтобы просто давать рыбу.

Церемония вручения дипломов девятой учебной сессии в рамках китайского проекта Juncao and Upland Rice Technology Project в Папуа-Новой Гвинее народная благодарность китайским специалистам.Бывший министр обороны Папуа-Новой Гвинеи даже дал своей дочери китайское имя Цзюньцао и объявил об этом в газете. Он сказал профессору Линю, что независимо от того, что произойдет с проектом Juncao в будущем и как изменится мир, он всегда будет помнить о том, что Китай сделал, чтобы помочь его стране.

Китайские эксперты и местные жители в Папуа-Новой Гвинее держат горный рис

На Фиджи технология Juncao считается новой надеждой сельского хозяйства для островных государств. Фиджи теперь может производить грибы в пищу и лекарственные травы.Местные жители очень благодарны китайским джентльменам, которые научили их строить теплицы из подручных материалов и выращивать цзунцао. Эта технология принесла хорошие экономические, экологические и социальные выгоды и помогла сохранить и улучшить почву на Фиджи.

В Руанде Совет по сельскому хозяйству поощряет совместное выращивание Juncao и других растений по всей стране. С 2006 года китайские специалисты продвигают технологию Juncao в Руанде посредством технического сотрудничества и учебных курсов.По словам Джозианы Умбейи, координатора Juncao Совета по сельскому хозяйству Руанды, селекционеры Juncao могут получать сырье на местном рынке, Juncao подходит для мелкосерийного производства и является хорошим способом увеличения доходов населения.

В 2017 году Целевой фонд мира и развития Китая и ООН запустил проект Juncao Technology Project в штаб-квартире ООН в Нью-Йорке. Технология Juncao — это эффективный подход к реализации Повестки дня в области устойчивого развития на период до 2030 года. На встрече высокого уровня ООН по технологии Juncao в 2019 году председатель 73-й сессии Генеральной Ассамблеи ООН г-жаМария Фернанда Эспиноса Гарсес сказала: «Благодаря технологии Juncao Китаю есть что рассказать — историю, которой теперь поделились более 100 стран, извлекших выгоду из этой инновации. Искра, зажженная в провинции Фуцзянь, продемонстрировала потенциал одной инновации — если взращены и развернуты с умом, чтобы изменить жизни и улучшить условия жизни во всем мире».

В этом большом мире травы могут показаться маленькими, но они несут в себе приверженность Китая иностранной помощи и заботу о благе человечества.Достигая успеха для себя, нужно также помогать добиваться успеха другим. Это философия продвижения Китая Juncao по всему миру. Это также то, что побуждает Китай прилагать постоянные усилия, в том числе с помощью научных и технологических инноваций, для создания сообщества с общим будущим для человечества.

Эффективное редактирование генома с помощью CRISPR/Cas9 Pleurotus ostreatus | АМБ Экспресс

Экспрессия Cas9 и sgRNA путем введения плазмиды часто придает резистентность к 5-FC и 5-FOA на . С.остриатус Штамм PC9

Для изучения эффективности мутагенеза генов с помощью CRISPR/Cas9 путем введения плазмиды, экспрессирующей Cas9 и sgRNA, гены fcy1 и pyrG были выбраны в качестве мишеней для мутации, поскольку их мутации одного гена придают устойчивость к 5- FC и 5-FOA в P. ostreatus соответственно (Nakazawa et al. 2016). Это позволило нам легко и эффективно идентифицировать мутантов путем изучения устойчивости/чувствительности.Плазмиды PCCPEF3-126- FCY1 SG1, PCCPEF3-126- FCY1 SG2, PCCPEFEF3-126- Pyrg SG1, а PCCPEF3-126- Pyrg SG2 были введены отдельно в P. Ostreatus PC9 Host штамм (таблица 1) для получения трансформантов, устойчивых к гигромицину. Эти плазмиды экспрессируют fcy1 — или pyrG-, нацеленные на sgRNAs ( fcy1 sg1, fcy1 sg2, pyrG1, sg1 и pyrG1, sg1 и pyrG sg2), которые вместе с фосфотрансферазой (CasferH sg2) придает устойчивость к гигромицину В.Пустой вектор pCcPef3-126, который экспрессирует каркас sgRNA без нацеливающей последовательности, также вводили в качестве контроля. Всего в трех независимых экспериментах путем введения пустого вектора было получено 14 устойчивых к гигромицину трансформантов, все из которых не росли на YMG с 0,1 % (мас./об.) 5-FC или 5-FOA (таблица 2). Этот результат показал, что введение пустого вектора pCcPef3-126 редко придает устойчивость к 5-FC и 5-FOA P. ostreatus PC9. С другой стороны, один из пяти (20 %) и 22 из 28 (78.6 %) устойчивые к гигромицину трансформанты, полученные введением pCcPef3-126- fcy1 sg1 и pCcPef3-126- fcy1 sg2 соответственно, проявляли устойчивость к 5-FC. Устойчивость к 5- ФОА. Аналогичные результаты были получены в повторных экспериментах (таблица 2). Эти результаты позволяют предположить, что устойчивый к 5-FC или 5-FOA P.ostreatus часто можно получить путем введения плазмид с использованием системы CRISPR/Cas9; частота/эффективность, по-видимому, зависит от последовательности-мишени в sgRNA.

Таблица 2. Сравнение трансформантов и частоты мутаций, полученных с использованием различных sgRNA, нацеленных на fcy1 или pyrG

Идентификация небольших делеционных мутаций в фут1 и пирГ .

Затем мы проверили, что полученные штаммы, устойчивые к 5-FC и 5-FOA, были мутантами fcy1 и pyrG соответственно. Опосредованная NHEJ генная мутация с использованием системы CRISPR/Cas9 обычно приводит к небольшим вставкам или делециям (вставкам), таким как вставка нескольких нуклеотидов и делеции от одного нуклеотида до нескольких сотен нуклеотидов в целевом сайте или вокруг него. Поэтому мы сначала попытались амплифицировать с помощью ПЦР геномные фрагменты частичных открытых рамок считывания (ORF) fcy1 (432 п.н.) и pyrG (356 п.н.), содержащих целевые последовательности sgRNA, с использованием пар праймеров TB9/TB10 и TB53. /TB54 соответственно.Пара праймеров FY15/FY16, которая амплифицирует 430-пн геномный фрагмент из ORF mer3 , кодирующего АТФ-зависимую ДНК-хеликазу (идентификатор белка 82484 в базе данных генома JGI), также использовалась в качестве положительного контроля.

Некоторые штаммы, устойчивые к 5-FC или 5-FOA, были случайным образом отобраны для исследования мутации гена с помощью геномной ПЦР (таблица 2) и результатов электрофореза в агарозном геле у десяти штаммов, устойчивых к 5-FC и 5-FOA. был показан на дополнительном рисунке (Дополнительный файл 1: Рис.S2A и B соответственно). Продукт ПЦР амплифицировали из десяти штаммов, устойчивых к 5-FC, и десяти используемых штаммов, устойчивых к 5-FOA (дорожки 1–10 на рис. S2A и B), когда использовалась пара праймеров FY15/FY16. Как показано в дополнительном файле 1: рис. S2A и B, аналогично родительскому контрольному штамму PC9, фрагмент был амплифицирован из двух из десяти штаммов, устойчивых к 5-FC (дорожки 4 и 6 в дополнительном файле 1: рис. S2A; штаммы fc1-4 и fc2-1 соответственно) и один из десяти штаммов, устойчивых к 5-FOA (дорожка 8 в дополнительном файле 1: рис.С2Б; штамм py1-17) при использовании пар праймеров TB9/TB10 и TB53/TB54 соответственно. Размеры фрагментов, амплифицированных из fc1-4 и fc2-1, по-видимому, отличались от фрагментов, амплифицированных из PC9 (дополнительный файл 1: рис. S2A), что позволяет предположить, что небольшие вставки могли быть введены в сайты-мишени fcy1 /. pyrG , по крайней мере, в fc1-4 и fc2-1. Чтобы подтвердить, были ли небольшие инделы введены в сайты-мишени в трех устойчивых штаммах, из которых амплифицировали геномный фрагмент (fc1-4, fc2-1 и pyl-17), нуклеотидные последовательности ПЦР-амплифицированных фрагментов анализировали с использованием TB9 или TB10 для fcy1 и TB53 или TB54 для pyrG . Результаты выявили делеции размером 165 п.н. и 59 п.н. вокруг целевого сайта fcy1 sg2 в fc1-4 и fc2-1 соответственно. Также была обнаружена делеционная мутация длиной 3 п.н. в целевом сайте pyrG sg1 в штамме, устойчивом к 5-FOA, py1-17 (дорожка 8) (рис. 2b; таблица 1). Мутации, недавно идентифицированные в fc1-4, fc2-1 и py1-17, были обозначены как fcy1-3 , fcy1-5 и pyrG-7 соответственно (таблица 1). Эти результаты показали, что они представляют собой мутанты fcy1 или pyrG , несущие небольшие мутации indel; однако мутации не были идентифицированы во многих других штаммах, из которых не был амплифицирован геномный фрагмент.

Рис. 2

Идентификация мутаций fcy1 и pyrG в некоторых штаммах. a Схематическая диаграмма локусов fcy1 и pyrG в штамме-хозяине PC9 с сайтами узнавания sgRNA. Пунктирные линии указывают область, амплифицированную с помощью геномной ПЦР. Черными стрелками показаны пары праймеров, использованные для экспериментов ПЦР в дополнительном файле 1: рис. S2A и B. Секвенирование ДНК b для выявления небольших индел-мутаций в мутантах fcy1 или pyrG .Для выделения в последовательности нуклеотидов: желтые оттенки указывают на sgRNA, зеленые оттенки указывают на последовательность мотива, прилегающего к протоспейсеру (PAM), а пунктирные линии указывают на делецию

.

Идентификация вставки плазмиды CRISPR/Cas9 в целевых сайтах Дополнительный файл 1: рис. S2A; дорожки 1–7, 9–10 на рис. S2B), мутации могли быть введены в хромосомы этих штаммов по-разному.Мы предположили, что введенные плазмиды были встроены в сайт-мишень каждой sgRNA. Основываясь на этом предположении, восемь пар праймеров были сконструированы для гибридизации с геномной областью, расположенной приблизительно в 200 п. pyrG

) и промотор или терминатор β1-тубулина C. cinerea в плазмидах в другом праймере (праймер TN40 или TN46). Набор праймеров TB9/TN40, TB9/TN46, TB10/TN40 и TB10/TN46 для fcy1 и TB53/TN40, TB53/TN46, TB54/TN40 и TB54/TN46 для pyrG использовали для геномная ПЦР на шести штаммах, устойчивых к 5-FC и шести 5-FOA, соответственно (дополнительный файл 1: таблица S2).В случае fcy1 фрагменты размером около 6, 1,5, 7 и 10 тысяч пар оснований были амплифицированы из четырех штаммов, устойчивых к 5-FC (а именно, fc0-3, fc1-3, fc2-2 и fc1-5). соответственно) при использовании пар праймеров TB10/TN40, TB10/TN46, TB9/TN40 и TB9/TN46 соответственно. В случае pyrG фрагменты размером около 1,7 т.п.н., 2,5 т.п.н., 2,5 т.п.н., 5 т.п.н., 8 т.п.н. и 6 т.п.н. были амплифицированы из шести штаммов, устойчивых к 5-FOA (а именно py1-2, py1-4, py1- 6, py1-9, py1-10 и py1-14 соответственно), когда использовали пары праймеров TB53/TN46, TB53/TN46, TB53/TN46, TB53/TN46, TB54/TN46 и TB53/TN46 соответственно. .Эти ПЦР-фрагменты не амплифицировали из родительского контрольного штамма PC9 при использовании этих наборов праймеров (данные не показаны). Эти результаты свидетельствуют о том, что введенные плазмиды были встроены в сайты-мишени fcy1 / pyrG , по крайней мере, в десяти штаммах, из которых был амплифицирован фрагмент.

Для подтверждения возможности инсерционной мутации ПЦР-амплифицированные фрагменты подвергали секвенированию ДНК с использованием праймеров TB9 или TB10 для fcy1 и TB53 или TB54 для pyrG .Результаты продемонстрировали вставку введенных плазмид в сайты-мишени трех устойчивых к 5-FC штаммов (штамм fc0-3, полученный путем введения pCcPef3-126- fcy1 sg1, и штаммы fc1-3 и fc2-2 путем pCcPef3-126- fcy1 sg2), и вставка плазмиды вместе со вставкой 1 п.н. в целевом сайте fcy1 sg2 в одном штамме, устойчивом к 5-FC, fc1-5 (рис. 3a). Что касается мутаций pyrG в штаммах, устойчивых к 5-FOA, то мутации были успешно идентифицированы у четырех мутантов.Вставка введенной плазмиды в сайт-мишень pyrG sg1 в трех штаммах, устойчивых к 5-FOA, а именно py1-4, py1-6 и py1-14, и вставка плазмиды вместе со вставкой из 2 п. н. сайт-мишень pyrG sg1 в одном штамме, устойчивом к 5-FOA, py1-10, показан на рис. 3b. Мы также попытались идентифицировать инсерционные мутации двух штаммов, устойчивых к 5-FOA, py1-2 и py1-9; однако фрагменты, амплифицированные с помощью ПЦР, не могли быть секвенированы с использованием праймера TB53.Мутации в этих штаммах, а именно fc0-3, fc1-3, fc1-5, fc2-2, py1-4, py1-6, py1-10 и py1-14, были обозначены как fcy1-1 , fcy1-2 , fcy1-4 , fcy1-6 и pyrG-3 – 6 соответственно (таблица 1). Эти результаты свидетельствуют о том, что инсерционная мутация была введена в fcy1 и pyrG в некоторых штаммах, устойчивых к 5-FC и 5-FOA, соответственно.

Рис. 3

Идентификация инсерционных мутаций у некоторых мутантов fcy1 или pyrG .Схематические диаграммы, показывающие, как введенные плазмиды были вставлены в сайты-мишени fcy1 ( a ) или pyrG ( b ). Для выделения в последовательности нуклеотидов: желтые оттенки указывают на sgRNA, зеленые оттенки указывают на последовательность PAM, розовые оттенки указывают на последовательность плазмиды, а красные оттенки указывают на вставку

.

Целевая замена гена с использованием гомологичной рекомбинации с матрицей донорской ДНК

Генные мутации, выявленные в приведенных выше экспериментах, скорее всего, были введены NHEJ после разрыва двухцепочечной ДНК (DSB), который был вызван экспрессируемыми комплексами Cas9-sgRNA.Однако мутации, опосредованные NHEJ, как правило, непредсказуемы, что не позволяет нам создавать штаммы с желаемыми мутациями с использованием CRISPR/Cas9. Для точной замены гена и введения целевой мутации CRISPR/Cas9 с матрицей донорной ДНК можно использовать для индукции мутаций, опосредованных направленной на гомологию репарацией (HDR), в P. ostreatus . Во-первых, чтобы проверить, может ли ORF fcy1 часто заменяться ORF донорской ДНК (с делецией 25 п. н. в ORF, содержащей последовательность fcy1 sg2; рис.1а) с помощью гомологичной рекомбинации с помощью CRISPR/Cas9 была введена плазмида pCcPef3-126- fcy1 sg2 с матрицей донорной ДНК или без нее с гомологическими плечами 1 т.п.н. (рис. 1б). В этом эксперименте использовался штамм 20b ( ku80 , разрушающий PC9), но не PC9, поскольку дефицит ku80 нарушает путь NHEJ и снижает частоту NHEJ-опосредованной эктопической интеграции (Salame et al. 2012). Четыре устойчивых к гигромицину трансформанта были получены из трех независимых экспериментов путем введения только плазмиды pCcPef3-126- fcy1 sg2, причем все они не росли на YMG с 0.1 % (мас./об.) 5-FC (таблица 3). Этот результат показал, что введение одной только плазмиды pCcPef3-126- fcy1 sg2 редко придает устойчивость к 5-FC штамму P. ostreatus 20b, что несовместимо с таковым для штамма дикого типа, так как введение pCcPef3-126 — fcy1 sg2 на PC9 часто придавали устойчивость к 5-FC (таблица 2). Это может быть связано с нашей гипотезой о том, что введенная плазмида часто вставлялась в сайт-мишень с помощью NHEJ в PC9, но не в 20b из-за ее сниженной активности/пути NHEJ.Пять из шести (83,3 %) устойчивых к гигромицину трансформантов, полученных путем введения pCcPef3-126- fcy1 sg2 вместе с матрицей донорной ДНК, проявляли устойчивость к 5-FC (таблица 3). Этот результат предполагает, что целевая замена гена может происходить часто, когда плазмида CRISPR/Cas9 вводится в штаммы P. ostreatus 20b вместе с матрицей для репарации ДНК.

Таблица 3 Сравнение трансформантов и частоты мутаций, полученных с использованием CRISPR/Cas9 и матриц донорской ДНК Шаблоны репарации ДНК (плеча гомологии 0.5 т.п.н. и 0,2 т.п.н.) вводили в штамм 20b. Как показано в Таблице 3, десять из 13 (76,9 %) и два из четырех (50,0 %) устойчивых к гигромицину штаммов, полученных в трех независимых экспериментах путем введения pCcPef3-126- fcy1 sg2 с плечом гомологии 0,5 т. п.н. и 0,2 кб, соответственно, проявляли устойчивость к 5-FC. Эти результаты позволяют предположить, что частота резистентности к 5-FC может быть выше при использовании более длинной матрицы репарации ДНК с системой CRISPR/Cas9.

Затем мы подтвердили, что последовательность fcy1 была заменена введенной донорской ДНК, как и ожидалось.17 штаммов, устойчивых к 5-FC, полученных путем введения плазмиды pCcPef3-126- fcy1 sg2 вместе с матрицей донорной ДНК с гомологическими плечами 1 т.п.н. (пять штаммов, hr5, hr6, hr11, hr16, hr17), 0,5- Для этого эксперимента использовали один kb (десять штаммов, hr1–4, hr8, hr9, hr10, hr13–15) или 0,2-kb (два штамма, hr7 и hr12) (таблица 1). Сначала мы проверили, амплифицируется ли геномный фрагмент (1226 п.н.) из штаммов hr1–17 при использовании пары праймеров TB72/CI21 (рис. 1b). Предполагалось, что этот фрагмент будет амплифицирован из 20b, но не из штаммов, в которые была введена HDR-опосредованная мутация fcy1 из-за потери последовательности гибридизации из праймера CI21 после HDR-опосредованной мутации. Как показано в дополнительном файле 1: рис. S2C, ожидаемый фрагмент был амплифицирован из штамма 20b (дорожка wt), но не из штаммов, устойчивых к 5-FC (дорожки 1–17). Этот результат свидетельствует о том, что HDR-опосредованная мутация может быть введена в геномы всех штаммов, устойчивых к 5-FC.

Кроме того, другая пара праймеров TB9/TB10 использовалась для подтверждения того, что продукт ПЦР длиной 432 п. потеря участка, содержащего сайт узнавания sgRNA, на матрице репарации ДНК (рис.1б). Как показано в дополнительном файле 1: рис. S2C, ожидаемый фрагмент был амплифицирован из штамма 20b (дорожка wt), тогда как более короткий фрагмент был амплифицирован из 14 из 17 устойчивых к 5-FC штаммов (дорожки 1–6, 9– 11, 13–17; штаммы ч1–6, ч9–11, ч13–17 соответственно). Мутации в этих 14 штаммах были обозначены как fcy1-7 (таблица 1). Этот результат показал, что все пять и девять из десяти штаммов, устойчивых к 5-FC, были разрушены на fcy1 при использовании репарационных матриц с гомологическими плечами 1 т. п.н. и 0.5 кб соответственно (таблица 3). Более того, эти результаты показали, что точная/целевая замена гена может быть выполнена с использованием CRISPR/Cas9 вместе с матрицей донорной ДНК с гомологическими плечами не менее 0,5 т.п.н. в P. ostreatus .

Тихоокеанские северо-западные леса представляют собой идеальную почву для научно-фантастического рассказа о вторжении инопланетян

Грибы растут из коры дерева в Национальном олимпийском лесу. (USFS Photo / Kelsey Dyer)

Если вы собираетесь написать роман об инопланетном грибке, угрожающем планете, мало что подходит для этой обстановки лучше, чем влажные темные леса, окружающие Сиэтл.По крайней мере, так оценил ситуацию Бенджамин Перси, когда начал писать «Незнакомый сад», вторую книгу из своей научно-фантастической серии «Кометный цикл».

«Если я собирался написать рассказ об инопланетной растительной жизни, почему бы не отправиться в один из самых влажных уголков страны?» — говорит Перси в последнем выпуске подкаста Fiction Science. «Вы знаете, это влажное качество Сиэтла, верно? Вам кажется, что иногда вы можете просто пробить рукой бетон и вытащить кучу извивающихся дождевых червей.

Стив Труделл, один из лучших знатоков грибов в Сиэтле, говорит, что Перси сделал правильный выбор. «Тихоокеанский Северо-Запад — отличный район с точки зрения грибов — главная причина, по которой я живу здесь», — сказал он в электронном письме.

Вымышленный миколог Вашингтонского университета — то есть ученый, специализирующийся на изучении грибов и других грибов — является одним из главных героев «Незнакомого сада». И это не единственная параллель между сюжетом Перси и прозаичной микологией.Хотя инвазивный грибок в его истории полностью выдуман, то, как он ведет себя, обыгрывает некоторые причудливые слабости грибов реального мира.

Например, некоторые считают, что грибковый рост в восточном Орегоне является крупнейшим в мире отдельным организмом. Благодаря способности вида, известного как Armillaria ostoyae, распространять свои нити под землей, было обнаружено, что «гигантский гриб» покрывает более 2000 акров национального леса Малер.

Грибы рода Armillaria, более известные как опята, также имеют злодейскую репутацию: они питаются корнями и корой живых деревьев, в конечном итоге убивая их.Это как раз соответствовало плану инопланетного вторжения, который имел в виду Перси.

В «Незнакомом саду» гриб осаждается в лесах Тихоокеанского Северо-Запада проходящей кометой.

«Просто мысль о том, что этот потусторонний гриб появляется из обломков кометы, и он использует людей так же, как этот гриб [Armillaria] использует лес… это создает ситуацию, которая читается как современное «Вторжение в тело». Похитители», — сказал Перси, выросший в Орегоне, а сейчас живущий в Миннесоте.

«Незнакомый сад» — второй роман из цикла «Комета» Бенджамина Перси. (Книги Маринера)

Перси разыгрывает недавнюю волну предположений об интеллекте грибов, вдохновленную утверждениями о том, что некоторые грибы демонстрируют способность принимать решения, распознавать пространство и кратковременную память. Он также проводит некоторые психологические параллели с нынешней пандемией COVID.

«Чего мы сейчас боимся, в основном, так это заражения», — сказал он. «И в этом романе есть невидимый враг, который витает в воздухе в виде спор.Иногда человек, с которым ты живешь по соседству, человек, с которым ты работаешь, человек, который живет в твоем доме или спит с тобой в одной постели — они могут быть уже обитаемыми, а ты даже не подозреваешь об этом. И это очень похоже на «Вторжение похитителей тел».

Прежде чем вы начнете нервничать из-за прогулки по лесу, утешайтесь заверениями Труделла о том, что грибы на самом деле нас не достанут. Фактически, недавняя научно-популярная книга под названием «В поисках материнского дерева» доходит до того, что изображает грибы типичными хорошими парнями благодаря роли, которую грибковые сети играют в лесной экосистеме.

«Слухи вышли за рамки того, что было (по моему скромному мнению) надежно продемонстрировано в отношении их экологической важности (которую чрезвычайно трудно изучать)», — сказал мне Труделл в своем электронном письме. «Но это крутая идея, и люди хотят верить в такие крутые вещи, как материнские деревья, заботящиеся о лесе».

История продолжается как для Перси, так и для Труделла.

Бенджамин Перси (Фото через Twitter)

На данный момент Перси опубликовал шесть романов, в том числе первые две книги цикла «Комета», «Девятый металл» и «Незнакомый сад».

— Третья книга называется «Небесный свод», — сказал он. «Небесный свод» происходит на Аляске и имеет отношение к зеркальной материи и темной материи и открывает возможность некоторых межпространственных махинаций. … Я пытаюсь создать во всех этих книгах своего рода скользкую науку».

Перси также написал десятки комиксов и хочет превратить «Цикл о комете» в сагу, которая может быть столь же масштабной, как Кинематографическая вселенная Marvel или цикл «Йокнапатофа» Уильяма Фолкнера.

«Я хотел взять то, что я узнал из комиксов, взять то, что я узнал из литературы, когда дело доходит до этих общих вселенных, стереть границы и построить собственную песочницу», — сказал Перси. «Потому что, как бы ни было весело писать, скажем, Росомаху … он мне не принадлежит. Я его хранитель. И поэтому я хотел построить свою собственную общую вселенную».

Тем временем Труделл продолжает исследовать грибные рубежи. «Грибы Тихоокеанского Северо-Запада», книга, которую он написал в соавторстве с биологом из Вашингтонского университета Джозефом Аммирати более десяти лет назад, до сих пор остается исчерпывающим путеводителем по микологическим чудесам региона.

Стив Труделл (фото MycoWest.net)

«Разнообразие выше в таких областях, как южные Аппалачи и, вероятно, Калифорния, но у нас, вероятно, более 5000 видов грибов», — сказал Труделл. «Мы получаем много грибной биомассы, в том числе такие популярные съедобные продукты, как подберезовики, лисички, сморчки и мацутакэ, которые поддерживают довольно крупную коммерческую отрасль».

Автор из Сиэтла Лэнгдон Кук задокументировал грибную манию Тихоокеанского Северо-Запада в книге под названием «Охотники за грибами» в 2013 году. С тех пор в рядах охотников произошел быстрый всплеск — и в конкурентоспособности охоты, сказал Труделл.

«Микологическое общество Пьюджет-Саунд, крупнейший из многих клубов Тихоокеанского Северо-Запада, насчитывает порядка 2000 членов, — сказал он. «И поскольку членство приходит и уходит, значительно более 2000 человек были членами в то или иное время. За популярные съестные припасы может существовать значительная конкуренция, и это привело к некоторым трениям. … По большей части люди не хотят делиться местоположением своих «патчей».’”

Будет ли «Кометный цикл» повторно посещать участки Тихоокеанского Северо-Запада в будущем романе? Завершение «Незнакомого сада» оставляет дверь открытой для сиквела в великих традициях фильмов Marvel. И хотя Перси последние десять лет жил в Миннесоте, он признает, что воспоминания о родном Северо-Западе до сих пор владеют его воображением.

«Я вырос в Орегоне и Вашингтоне, и все это уже встроено в мою ДНК», — сказал он. «И часто, вы знаете, когда я закрываю глаза, я иду туда.

«Незнакомый сад» доступен в мягкой обложке, электронной или аудиокниге. Билеты на премьеру фильма «Лето», которая состоится 22 января, можно приобрести на сайте кинофестиваля «Сандэнс».

Ознакомьтесь с оригинальной версией этого отчета о  Космическом журнале Алана Бойла, чтобы получить «умопомрачительную» рекомендацию книги от Бенджамина Перси, а также намек на планы превратить один из его романов в экранизацию. И следите за будущими выпусками подкаста Fiction Science через Anchor, Apple, Google, Spotify, Breaker, Pocket Casts и Radio Public.Если вам нравится Fiction Science, оцените подкаст и подпишитесь, чтобы получать оповещения о будущих выпусках.

Грибная комната — Minecraft Wiki

Mooshrooms — это покрытые грибами варианты коров, эксклюзивные для биома редких грибных полей.

Нерест[]

Версия Java[]

Красные грибы могут появляться в биомах грибных полей стадами из 4–8 особей при уровне освещенности 9 или выше и на мицелии. Они не появляются естественным образом ни в одном другом биоме.Красный гриб превращается в коричневый гриб (и наоборот), когда в него попадает молния. Коричневые грибы никогда не появляются естественным образом.

Красные грибы появляются детёнышами с вероятностью 5%.

Издание Bedrock[]

Грибы появляются при уровне освещенности 7 или выше в биомах грибных полей. 5% из них появляются младенцами.

Разведение[]

Пара грибов может размножаться после того, как получит пшеницу. Грибной гриб нельзя скрестить с коровой, если грибной гриб не был стрижен.

Кормление теленка пшеницей сокращает время его роста на 10% от оставшегося времени.

У маленьких грибов на спине нет грибов. Грибы появляются, когда ребенок становится взрослым.

Размножение двух красных грибов имеет ¹ ⁄ ₁₀₂₄ шанс породить коричневую разновидность детеныша и наоборот.

При одновременном скрещивании рыжего и коричневого мухомора существует ¹ ⁄ ₂ шансов получить красный вариант детеныша и ¹ ⁄ ₂ шанс получить коричневый вариант детеныша.

Капли[]

При убийстве взрослого грибника выпадает:

• 0–2 Кожа. Максимальное количество увеличивается на 1 за каждый уровень мародерства, максимум на 0-5 с мародерством III.
• 1–3 Сырая говядина (стейк, если его убьют в огне). Максимальное количество увеличивается на 1 за каждый уровень мародерства, максимум на 1-6 с мародерством III.
• 1–3 (при убийстве игроком или прирученном волке)

При успешном размножении выпадает 1–7.

При стрижке гриба выпадает 5 соответствующих грибов, а гриб превращается в обычную корову, испуская уменьшенную версию гриба. частица взрыва.Грибы не вырастают.

Как и другие детеныши животных, убийство детеныша грибного гриба не дает ни предметов, ни опыта.

Доение[]

Грибной гриб можно подоить с помощью ведра, что даст ведро для молока.

Mooshrooms также можно подоить, используя миски, чтобы получить грибное рагу.

Когда маленький цветок используется на коричневом грибном грибе, коричневый грибной гриб производит подозрительное рагу, связанное с этим маленьким цветком, когда его в следующий раз доят из миски. Гриб возвращается к приготовлению грибного рагу, пока не съест еще один маленький цветок.Маленькие цветы производят подозрительное рагу со следующими эффектами.

Поведение[]

Грибы имеют такое же поведение ИИ, как и коровы: они склонны ходить медленно и бесцельно, время от времени фыркая и мыча. Они избегают опасностей, таких как скалы, огонь или лава, но не пытаются оставаться вне воды.

Грибник следует за игроком, держащим пшеницу.

Красные грибы превращаются в коричневые грибы, а коричневые превращаются в красные, когда в них попадает молния.

Звуки[]

9119 HTTPS://minecraft. fandom.com /wiki/Файл:Cow_idle1.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/Файл:Cow_idle2.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/Файл:Cow_idle3.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_idle4.ogg

Sound	субтитры	Source		Описание	Расположение	Объем перевода	Volume	Pitch	Отушок затухания Расстояние
Коровье мычание [1]	Дружелюбные существа	Воспроизводится, когда грибная комната простаивает.	entity.cow.ambient [1]	subtitles.entity.cow.ambient [1]	?	?	16
https://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_hurt1.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_hurt2.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki /Файл:Cow_hurt3.ogg	Корова умирает [1]	Дружелюбные существа	Играет, когда грибник убит.	entity.cow.death [1]	subtitles.entity.cow.death [1]	?	?	16
https://minecraft. fandom.com/wiki/File:Cow_hurt1.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_hurt2.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki /File:Cow_hurt3.ogg	Корова болит [1]	Дружелюбные существа	Играет, когда грибница повреждена.	entity.cow.hurt [1]	subtitles.entity.cow.hurt [1]	?	?	16
https://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_milk1.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_milk2.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki /File:Cow_milk3.ogg	Корову доят [1]	Дружелюбные существа	Играет, когда грибник доится ведром.	сущность.коровье молоко [1]	субтитры.сущность.коровье молоко [1]	?	?	16
https://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_step1.ogghttps://minecraft.fandom. com/wiki/File:Cow_step2.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki /File:Cow_step3.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Cow_step4.ogg	Шаги	Дружелюбные существа	Играет, пока грибник ходит.	entity.cow.step [1]	subtitles.block.generic.steps	?	?	16
	Играет, когда грибная комната окрашивается в другой цвет.	entity.mooshroom.convert	субтитры.entity.mooshroom.convert	0,75	?	16
https://minecraft.fandom.com/wiki/File:Mooshroom_eat1.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Mooshroom_eat2.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki /File:Mooshroom_eat3.ogghttps://minecraft.fandom.com/wiki/File:Mooshroom_eat4.ogg	Mooshroom ест	Дружелюбные существа	Играет, когда коричневую грибницу кормят цветком.	entity. mooshroom.eat	субтитры.entity.mooshroom.eat	?, 1, ?	0,95, ?, 1,05	16
minecraft.fandom.com/wiki/File:Mooshroom_milk3.ogg	Mooshroom доят	Дружелюбные существа	Играет, когда Mooshroom доят миской.	entity.mooshroom.milk	субтитры.entity.mooshroom.milk	?, 1, ?	0.9, ?, 1.1	16
minecraft.fandom.com/wiki/File:Mooshroom_milk3.ogg	Гриб подозрительно доится	Дружелюбные существа	Играет, когда коричневую грибницу доят из миски после кормления цветком.	entity.mooshroom.suspicious_milk	субтитры.entity.mooshroom.suspicious_milk	?, 1, ?	0.9, ?, 1.1	16
https://minecraft.fandom.com/wiki/File:Shear.ogg	Ножницы щелкают		entity. mooshroom.shear	subtitles.item.shear	?	?	16

Значения данных[]

ID[]

Java Edition :

Bedrock Edition:

Название
Имя	Расположение ресурсов	Числовый ID	Номер перевода
Mooshroom	Mooshroom	16	объект.mooshroom.name

Данные объекта[]

С грибами связаны данные сущностей, которые содержат различные свойства.

Версия Java :

• Данные объекта
  •  EffectDuration: необязательно. Целое число, указывающее продолжительность статусного эффекта, который коричневый гриб может дать подозрительному рагу.
  •  EffectId: необязательно. Байт, указывающий тип эффекта статуса, который коричневый гриб может дать подозрительному рагу.
  •  Тип: идентификатор типа грибницы.

Bedrock Edition:

См. формат уровня Bedrock Edition/формат объекта.

Достижения[]

Значок		Достижение	Внутриигровое описание	Фактические потребности (если отличаются)	Gamescore заработал	Трофейный тип (PS4)
PS4	Прочие платформы
		Повторное заселение	Разведение двух коров с пшеницей.	Развести двух коров или двух грибников .	15G	Бронза

Улучшения[]

История[]

Эта страница выиграла бы от добавления большего количества изображений.

Удалите это уведомление после того, как добавите в статью подходящие изображения.
Конкретные инструкции: Имели ли ранее грибы затенение до версии 1.8?

Java Edition
1.0.0		Бета 1.9 Пререлиз			Добавлены грибы.
					Их нельзя доить ведром, как обычных коров. Щелчок правой кнопкой мыши по грибной комнате с более чем одной миской превращает всю стопку в одну миску грибного рагу.
		Бета 1.9 Пререлиз 2			Разведение коровы с помощью гриба может привести к любому из них, выбранному случайным образом. Потомство, скорее всего, будет таким, которому игрок сначала дал пшеницу, подобно овцам.
		Бета 1.9 Пререлиз 3			Рога грибницы перемещены.
					Модель вымени грибного гриба изменена, но текстура не изменена в соответствии с новой моделью, что приводит к сбою сломанного вымени. [2]
					Добавлены детские грибницы.
					Грибы теперь можно разводить с пшеницей.
1.2.1		12w07a			Грибы больше не могут размножаться с коровами.
		12w07b			У грибов новый ИИ.
1.4.2		12w38a			Добавлены новые звуки шагов, боли и простоя для грибной комнаты.
1.8		14w02a			Рост детского гриба теперь можно ускорить с помощью пшеницы.
		14w05b			Грибы Mooshroom больше не видны, когда они имеют эффект невидимости.
		14w26b			Mooshrooms теперь требуют мицелий, а не траву, для случайного появления и появления из мобов.
1. 8.2		pre5			Исправлена ​​ошибка, из-за которой текстура вымени грибного гриба отображалась некорректно.
					Исправлена ​​ошибка, из-за которой в грибных комнатах неправильно отображались пользовательские модели грибов.
1.9		15w39a			Грибы теперь немного выше (1,4 блока в высоту, а не 1,3, с младенцами 0,7 блока в высоту, а не 0,65).
1.11		16w32a			Идентификатор объекта mooshroom теперь изменен с MushroomCow на mooshroom .
MINECON Earth 2018					Группа Mojang обсуждает, стоит ли добавлять коричневые грибы.
1.14		18w43a			Изменены текстуры грибной и детской грибной.
		19w08a			Добавлен вариант коричневого гриба, который появляется, когда в обычный гриб попадает молния.
					Коричневые грибы дают игроку подозрительное рагу, если его кормить цветком.
					Размножение двух красных грибов имеет 1 ⁄ 1024 для появления коричневого варианта ребенка, и наоборот.
1.15		19w39a			Текстуры грибов на грибах были перевернуты.
					Изменены модели детских грибов.
1.16		20w15a			Грибы теперь можно стричь раздатчиками.
		Предварительная версия 1			Теперь можно получить рагу из грибов в творческом режиме.
Pocket Edition Alpha
v0.9.0		build 1			Добавлены грибницы и их детский вариант.
v0.14.0		build 1			Маленькие зомби-жокеи теперь могут садиться на грибы, пытаясь атаковать игроков, жителей деревни или големов.
v0.15.0		build 1			Детеныши-оболочки теперь могут садиться на грибы.
Pocket Edition
1.1.0		Alpha 1.1.0.0			Идентификатор объекта Mooshroom уже изменен с Mushroomcow до Mooshroom .
Bedrock Edition
1.10.0		бета 1.10.0.3			Изменены текстуры грибной комнаты и детской грибной комнаты.
1.13.0		бета 1.13.0.9			Добавлены коричневые грибы.
Legacy Console Edition
TU7	CU1	1.0	Патч 1	1. 0.1
					Грибы можно разводить с помощью пшеницы.
TU14		1.04			Используя яйцо спавна грибов, детские грибы теперь могут быть созданы // на взрослом грибе.
TU31	CU19	1.22	Патч 3		Рост детского гриба теперь можно ускорить с помощью пшеницы.
					Обновлены звуки грибов.
New Nintendo 3DS Edition
0.1.0					Добавлены грибы.

• Первое опубликованное изображение грибной комнаты.

• Глючная грибная комната на 19w38a

• Глючные коричневые грибы на 19w38a

Проблемы[]

Проблемы, связанные с «Mooshroom», ведутся в системе отслеживания ошибок. Сообщайте о проблемах там.

Мелочи[]

Мублум в Minecraft Earth .

• Mooshrooms — четвертый моб в игре, на которого непосредственно влияет удар молнии.
• В Minecraft Earth существует вариант грибных грибов, покрытых лютиками, известный как «мублум». ^[3] Этот вариант также участвовал в голосовании мобов Minecraft Live 2020. Он появился последним, и в настоящее время нет планов добавить его в игру.

Галерея[]

Скриншоты[]

• Несколько грибников рядом с озером.

• Грибной гриб в вагонетке.

• Взрослые и детские формы красного и коричневого грибов.

В других СМИ[]

Внешние ссылки[]

Ссылки[]

.

No related posts.