Ю энд ми гортензия: Гортензия Ю энд Ми Лав, описание и правила ухода — Чудеса света , Семь чудес света, Всемирное наследие ЮНЕСКО

Содержание

Гортензия Ю энд Ми Лав, описание и правила ухода

Почти у каждого цветовода на садовом участке можно встретить гортензию. Выделяют несколько ее разновидностей. Одной из них является гортензия Ю энд Ми Лав (hydrangea macrophylla You & Me Love). Она неприхотлива в уходе и идеально подойдет для начинающих садоводов.

Описание гортензии Ю энд Ми Лав

Цветущая гортензия Ю энд Ми Лав — фото

Гортензия Ю энд Ми Лав (hydrangea macrophylla You & Me Love) – декоративный кустарник, который достигает всего 100 сантиметров в высоту.

Внешними характеристиками цветка являются:

Листья имеют ярко-зеленый оттенок;
Прошлогодние побеги твердые и жесткие, а свежие – зеленые и мягкие;
Листва крупная;
Соцветия махровые;
Цветки похожи на кувшинки.

Начинает цвести в июле и до появления первых заморозков осенью. В начале цветения присутствуют кремовые оттенки, что делает бутоны дуохромными.

Цвет кустарника меняется в зависимости от типа почвы. Например, в кислой среде, соцветия приобретают фиолетовый или синий оттенок, а в щелочной – розовый. Характеризуется зимостойкостью. Соцветия начинают цвести как на прошлогодних побегах, так и на новых.

Как посадить гортензию крупнолистную

Идеальное время для посадки – весна. Зимние морозы уже пройдут, почва успеет прогреться и саженец сможет спокойно прижиться до наступления следующих холодов.

Место, где посадить гортензию, необходимо выбирать исходя из направленности солнечного света. Рекомендуется подобрать такой угол на садовом участке, в котором кустарник будет получать свет утром или вечером. В противном случае, при ярком солнечном свете цветки завянут, а листва начнет опадать.

При пересаживании гортензии You & Me Love из дома в сад рекомендуется придерживаться следующей инструкции:

Подготовить лунку для посадки. Для этого необходимо заполнить ямку заранее подготовленной органической смесью. В качестве удобрения идеально подойдет кислый торф, перегной, перемешанный с садовой землей.
Если почва характеризуется повышенным уровнем влажности или местность часто подвергается дождливым осадкам необходимо подготовить дренаж.
Аккуратно вытащить цветок из горшка вместе с земляным комом, чтобы не повредить корневую систему.
Поместить саженец в лунку и притоптать землей.
Обильно полить.

Для саженцев с закрытой корневой системой, купленных в специальных контейнерах в цветочном магазине, ограничений по времени посадки нету. Их можно сажать даже в дождливую погоду, главное – правильно подготовить лунку и садовое удобрение.

Ростки с открытыми корнями рекомендуется посадить сразу после покупки. Приобретать саженцы в магазине необходимо после распускания почек или опадания листвы.

Размножение

Размножать гортензию Ю энд Ми Лав лучше всего черенками. Кустарник не прихотлив к посадке и легко приживется на новом месте. Новые соцветия можно увидеть уже в первый год.

Технология размножения черенкования выглядит следующим образом:

Сбор побегов с листвой.
Очистка ростков от нижних листьев. Верхние листья обрезать наполовину.
Замачивание на полчаса в растворе НВ101.
Посадка ростка в заранее подготовленную емкость с влажной почвой. Листья не должны касаться земли и друг друга.
Опрыснуть побеги фильтрованной или отстоявшейся водой.
Накрыть целлофановым пакетом и убрать в темное место.

Гортензия You & Me Love

После того, как черенки укоренились, их можно пересаживать в открытый грунт. Период, за который побеги успеют прижиться к новой земле, составляет примерно один месяц.

Правила ухода

Для корректного ухода за кустарником рекомендуется соблюдать несколько основных правил, среди которых:

Избегать появление извести;
На зиму цветок требует укрытия от холодных морозов;
Обильный полив по необходимости;
Периодически дренировать почву;
Место для посадки должно быть хорошо освещенным, но без попадания ярких солнечных лучей;
Удобрять плодородную почву раз в месяц.

Болезни и вредители

Гортензия крупнолистная Ю энд Ми Лав редко подвергается нападению вредителей. Среди часто встречающих – это тля и паутинные клещи. Для профилактики против повторного нападения необходимо придерживаться следующих советов:

Осенью и весной опрыскивать бордоской жидкостью;
Садовые инструменты обрабатывать медным купоросом;
Перед посадкой в лунку добавить инсектицидные препараты;
Расчищать участок от лишней травы и сорняков.

Если с растения начали опадать пожелтевшие листья, то это признак недостатка влаги. Необходимо обеспечить обильный полив в жаркую погоду и подпитать почву подкормками.

Также листва может почернеть и стать сухой. Это свидетельствует об ожоге под прямыми солнечными лучами и поливе жесткой водой. Для решения возникшей проблемы необходимо создать тенек вокруг растения, а воде перед поливом дать отстоять некоторое время.

Соблюдая правила оргтехники, гортензия Ю энд Ми Лав сможет расти без проблем. Обильный полив, периодическая добавка удобрений и поддержание почвы в умеренном состоянии являются обязательными процедурами для правильного выращивания декоративного кустарника.

В данном видео вы узнаете о сорте гортензии Ю энд Ми Лав:

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Это меня удивило

Гортензия

Питомник растений «Урожай» Вологда — Гортензия крупнолистная Ю энд Ми Перфекшн

Гортензия крупнолистная Ю энд Ми Перфекшн (Hydrangea macrophylla You and Me Perfection) — очень красивая новинка среди крупнолистных ремонтантных гортензий. Цветёт на прошлогодних побегах и на побегах текущего года в июне-сентябре. Соцветия очень крупные, на прочных побегах, не поникают. Цветки яркого темно-розового цвета. На кислой почве фиолетовые. Куст высотой до 90 см.

Описание Перфекшн:

относится к типу декоративных кустарников; многолетний; разрастается в ширину до 0,9 м, в высоту — до 1 м;
побеги образуют густую крону в форме сферы;
листья расположены друг напротив друга, интенсивно-зелёного цвета, удлинённые, на ощупь шершавые, края зубчатые;
начинает цвести в июне, заканчивает в сентябре;
розового или голубого окраса цветки-метёлки в форме звёзд бесплодны, достигают размера около 4 см, имеют махровый вид (расположены в несколько рядов), лепестки заострённые на конце, собраны в шарообразные соцветия диаметром около 25 см, чашелистики в форме лепестков;

сорт ремонтантный, цветёт на прошлогодних и однолетних побегах;
за 1 год даёт прирост около 20 см;
осенью сбрасывает листву, весной зеленеет вновь; способен выдерживать морозы до -28°С.

Посадка гортензии: Необходимо выкопать яму 40 – 50 см глубиной и 40 см в диаметре. Если кусты или отростки гортензии небольшие, ее можно сделать немного меньше. Приготовленный саженец нужно поставить в центр посадочной ямы так, чтобы его корневая шейка не была сильно заглублена. Вокруг растение следует тщательно засыпать почвой и утрамбовать, чтобы корни были хорошо прижаты и около них не образовалось пустоты.

Уход за гортензией: Уход за гортензией сводится прежде всего к правильному поливу, своевременной подкормке, обрезке и рыхлению. Если делать все правильно, то кусты будут пышными, а соцветия крупными и яркими.

Почва для посадки: Почва для гортензии должна быть хорошо дренированной и увлажненной, состоять из сбалансированной смеси перегноя, листовой земли, торфяной крошки, речного песка (2:2:1:1). Вне зависимости от вида и сорта гортензии, помните, известь в почве отрицательно сказывается на развитии.

Подготовка к зиме: Гортензия крупнолистная You and Me Perfection (Ю энд Ми Перфекшн) имеет зимостойкость -29С, но все равно ее нужно беречь в зимнее время года. В особой защите нуждаются молодые побеги и недостаточно зимостойкие сорта. Если куст совсем молодой, его можно просто засыпать сверху землей, опавшей листвой или опилками. Растения постарше необходимо пригнуть к земле и укрыть рубероидом или лутрасилом. Чтобы ветер его не сдул, нужно придавить укрывной материал кирпичами. Взрослые кусты требуют более тщательного укрытия. Нужно постараться их не сломать.

Место для посадки: Гортензия крупнолистная You and Me Perfection (Ю энд Ми Перфекшн) не выносит долгого затенения, лучшее место для ее посадки – солнечная сторона.

Размножение гортензии: Для выращивания кустарника из черенков необходимо в середине июля нарезать верхушек молодых неодеревеневших побегов и укоренить их в специально подготовленной почве, состоящей из крупнозернистого песка и торфа.

Гортензия ремонтантная крупнолистная сорт навсегда вместе. Гортензия макрофильная (Ю&Ме) Фореве (Hyrdengea (You & Me) Forever)

Первые крупнолистные гортензии я увидела в детстве, когда отдыхала в пионерлагере в городе Евпатория на Черном море. На меня они произвели огромное впечатление и желание посадить их на подмосковной даче. Я выпросил у садовника три саженца гортензии крупнолистной и привез их в Москву. Осенью посадила гортензии на даче.Весной, кроме корней, от них ничего не осталось, хотя к осени они были веточками, но не цвели.

Я стал лапником и засыпан землей. Через пару лет я дождалась первых цветов. Улучшив укрытие на зиму, я добилась от своей крупнолистной гортензии очень приличного цветения. К чему я все это пишу? В последнее время в Интернете появилось много публикаций о зимостойких крупнолистных гортензиях , а некоторые продавцы даже «назвали» их «морозостойкими» и пообещали»… они зимуют без укрытия»!

Бумага, конечно, все стерпит, но…. Все они имели в виду сорта гортензия крупнолистная «Бесконечное лето» (Enlees Summer») , позже названная «Forever and Ever», это одно и то же. Например, гортензия крупнолистная крупнолистная из сериала «Endlees summer» — «Erly Stnsation» не что иное, как «Forever and Ever pink» Правда только в том, что это действительно довольно новый эпизод. гортензия крупнолистная … Знаю ее с десяток лет.

Не так давно в США цветовод заметил, что его крупнолистная гортензия

снова зацвела, на побегах текущего года. Именно она стала основательницей сериала «Бесконечное лето». впоследствии «Forever End North». Отсюда следует, что гортензия этой серии не обладает какими-либо уникальными свойствами, кроме повторного цветения на побегах этого года.

Об удивительной «зимостойкости», «морозостойкости» и «…зимует без укрытия» (в Сочи, га!) Только ерунду пишут, лишь бы продать подороже. В 2008 году в садовом центре на МКАД, недалеко от Волоколамского шоссе, цена на эти гортензии достигла 6000 руб.

(сорт «Парад»)!Но нет ничего проще(легко и быстро -18-25 дней,размножается зелеными черенками,полуодревесневшие,и уж тем более одревесневшие!).

Гортензии крупнолистные серия «Бесконечное лето», они же «Forever End North» нужны такие же как и все остальные Гортензии крупнолистные …Недопустимо даже легкое подмерзание осенью или весной, основное цветение из верхних почек прошлогодних побегов. Кроме того, повторное цветение в M.O. незначительные, пара соцветий от силы. Испытано в Клинском, Пушкинском, Можайском районах МО, а также в «огуречной столице» Московской области — Луховицах.

Еще нравятся гортензии крупнолистные , но предпочитаю выращивать их в контейнерах, с зимовкой в подполье, при небольшой плюсовой температуре или на отапливаемой лоджии, как гортензии крупнолистные , период покоя не менее 2-2.5 месяцев, это жизненно важно!

Гортензия макрофильная (Ты и я) Навсегда. Гортензия крупнолистная, способная образовывать цветы на новой древесине, точнее на побегах этого года, а также на побегах прошлого года, и обладающая высокой зимостойкостью.

Куст высотой 90 см, округлый, компактный. Цветки — неповторимые, розовые махровые, в зависимости от кислотности почвы, на щелочной почве — светло-розовые, на кислой — пурпурно-розовые. Диаметр цветка 2-3 см. Высота цветоноса до 10-15 см.Листья крупные, блестящие темно-зеленые. Для посадки гортензии You & Me Forever подходит солнечное утреннее и полутенистое место с влажной и хорошо дренированной почвой.
Время цветения: с конца июня до заморозков. Зона зимостойкости: 6 (-23°С).

Месторасположение гортензии крупнолистной (крупнолистной): на юге, желательна полутень. Только некоторые виды лучше цветут на солнце, но при усиленном поливе. В средней полосе и севернее для посадки гортензии

You & Me Forever в открытом грунте выбирают места, хорошо освещенные солнцем или с небольшим затенением.Молодые растения лучше защищать от полуденного солнца, а также от ветра. Из-за повышенной потребности во влаге гортензии не следует сажать под деревьями, впитывающими влагу в больших количествах.

Грунт для крупнолистной гортензии You & Me Forever : требователен к богатству и влажности почвы. Почвенная смесь: перегной, листовая земля, торф, песок (2:2:1:1). Следует учитывать, что все виды гортензии негативно относятся к наличию в почве извести, почва для них должна быть ближе к кислой (pH около 5.0). Именно такая реакция почвенной среды обычно возникает в средней полосе. Гортензия влаголюбива. Этому очень легко научиться, так как дословный перевод ее латинского названия гортензия – это сосуд с водой. Это означает, что почву необходимо своевременно поливать.

Посадка гортензии крупнолистной: Посадка гортензии крупнолистной You & Me Forever в грунт в северных районах весной, в южных — весной и осенью. Растения высаживают на расстоянии 1 м друг от друга, не заглубляя корневую шейку.Размер лунок для молодых растений 30 х 30 х 30 см. Корневая система гортензии неглубокая, но разветвленная. В каждую лунку вносят по 1/3 ведра перегноя и торфа, после посадки растения поливают.

Полив лучше проводить мягкой дождевой водой. После полива почву рыхлят. В конце мая — начале июня проводят подкормку раствором навозной жижи в соотношении 1:10 и полным минеральным удобрением: по 20 г суперфосфата, по 10 г калийной и аммиачной селитры на 10 л воды.Повторное внесение удобрений проводят через 10-15 дней. Подкормка обеспечивает лучшее цветение в текущем году и закладку цветочных почек следующего года. Приствольные круги мульчируют перегноем или торфом, после перекопки добавляют мульчу. Осенью проводят окучивание кустов на высоту 20-30 см.

Гортензия крупнолистная уход You & Me Forever : хорошо реагирует на все подкормки. Весной в начале роста вносят смесь удобрений с микроэлементами или на 1 кв.м дают 20 — 25 г мочевины, 30 — 40 г суперфосфата и 30 — 35 г сернокислого калия. В период бутонизации вносят повторную подкормку из расчета 60 — 80 г суперфосфата и 40 — 45 г сернокислого калия на 1 кв.м; третья и четвертая подкормка — летом. Гортензии влаголюбивы: 15 – 20 литров под каждое растение дают раз в неделю, когда идут дожди, достаточно одного раза в месяц. Для усиления силы побегов растения рекомендуется поливать слабым раствором марганцовки.Мульчируют торфом или опилками слоем 6 см и оставляют на лето, сгребая со стеблей растения. Рыхление на глубину 5 — 6 см проводят вместе с прополкой и поливом 2-3 раза за сезон. Цветы у этого сорта гортензии распускаются как на прошлогодних побегах, так и на побегах текущего года, поэтому в обрезке она практически не нуждается. Если и укорачивать побеги, то только в косметических целях и только у молодых кустов. Взрослые кусты гортензии крупнолистной, если их не трогать, образуют множество цветущих приростов.У старых кустов гортензии для омоложения куста вырезают лишь некоторые ветки, чтобы стимулировать и вырастить новые замещающие побеги. Соцветия гортензии осенью срезать не нужно; они обеспечивают дополнительную защиту новых побегов и цветочных почек зимой. Весной, после снятия зимнего укрытия, их можно снять, но осторожно, не повреждая побег. Чтобы растение радовало садовода своим внешним видом в следующем году, необходимо тщательно укрывать его от холода и вовремя открывать весной.

Размножение гортензии крупнолистной: Чаще всего гортензию You & Me Forever размножают зелеными черенками, которые нарезают из побегов текущего года. Другие способы включают зимнюю прививку, деление куста, размножение отводками, семенами и черенкованием.

Использование гортензии крупнолистной. Гортензия крупнолистная раньше выращивалась в основном только как комнатное горшечное растение. Но с выведением новых морозостойких сортов с повторным цветением на побегах текущего года появилась возможность выращивать гортензии в саду на клумбах.В регионах с особо суровыми зимами пригоден для выращивания в контейнерах, для украшения террас, патио и патио и балконов. После первых заморозков выносят на террасу или в помещение, а с ноября держат в подвале (5-6°), изредка увлажняя. Листья осыпаются, гортензия «отдыхает». В феврале поставьте на окно, начните опрыскивать и поливать. К маю распускаются крупные соцветия, и можно снова выносить растение в сад.

Мята перечная

Сорт из серии Форевер энд Эвер. Гортензия крупнолистная, способная образовывать цветы как на новой древесине, точнее на побегах этого года, так и на побегах прошлого года, и обладающая высокой зимостойкостью. Куст высотой 60-75 см, шириной 80 см. Крупные двуцветные цветки с розовым или голубым центром лепестков (в зависимости от рН почвы) и светлыми, почти белыми краями. Цветки голубые на кислой почве, розовые на нейтральной и щелочной почве.В начале лета распускаются кисти на побегах прошлого года, а затем вас порадуют соцветия текущего года. Этот сорт привлечет много внимания!

Для посадки подходит солнечное утреннее и полуденное место с влажной и хорошо дренированной почвой.

» Forever & Ever » — серия зимостойких сортов гортензии крупнолистной, успешное выращивание которой возможно в средней полосе России, и даже севернее.Для крупнолистной гортензии с появлением этих шикарных зимостойких сортов новая эра. И российские цветоводы теперь могут приобретать их для своего сада. Возвращается былая мода на эти растения, ведь цветущие кусты гортензии раньше традиционно украшали Русские поместья!

Распространенные сорта крупнолистной гортензии переживают холодные зимы только под укрытием. Однако ранние осенние или поздние весенние заморозки могут повредить цветочные почки куста, и тогда он не зацветет.
Отличием новых сортов гортензии крупнолистной является их способность успешно расти и регулярно цвести в садах, расположенных в регионах с морозной зимой и продолжительной холодной весной.
Помимо зимостойкости, эти устойчивые сорта обладают еще одним замечательным свойством. Они способны цвести как на прошлогодних побегах, так и на побегах текущего года. Поэтому их называют ремонтантными (RE) или «Всегда цветущими» («Всецветущие»). И если вдруг не удастся сохранить цветочные почки на прошлогодних ветвях гортензии, то на отросших молодых побегах сформируются новые цветочные почки, и гортензии обязательно зацветут летом.

Коротко об укрытии гортензии на зиму.

Большинство сортов гортензии крупнолистной морозоустойчивы. А вот морозостойкие сорта группы «Forever&Ever» необходимо укрывать, чтобы сохранить побеги прошлого года. Тогда вы получите непрерывное и продолжительное цветение на побегах как прошлого, так и текущего года. Сначала подсыпают грунт к корням, затем ветки постепенно пригибают к земле и укрывают лапником и сухими листьями или укладывают на доски и укрывают несколькими слоями лутрасила, а сверху пленкой.Технология укрытия аналогична розам; весной куст постепенно раскрывают. Весенние заморозки очень опасны для крупнолистной гортензии после снятия зимнего укрытия, поэтому укрытие из лутрасила на это время желательно оставить.

Гортензии крупнолистные Forever & Ever ® и You & Me®

Вы говорите: «Нет более кропотливой работы по правильной обрезке и сложности защиты гортензий от зимних холодов». Да, цветные гортензии, в силу этих факторов, в России были не очень распространены.Зато теперь вы можете наслаждаться богатым цветением разных цветовых вариаций гортензий из года в год при минимальном уходе. Гортензии крупнолистные Forever&Ever® и You&Me® цветут как на побегах прошлого, так и на побегах текущего сезона! Им не страшны заморозки и обширная обрезка куста, так как соцветие развивается на текущем приросте, что делает их идеальными для выращивания в средней полосе России. Крупнолистные гортензии Forever & Ever® и You & Me® — взрыв цвета в вашем саду.

Уникальность гортензий Forever & Ever® и You & me®

Все гортензии Forever & Ever® и You & Me® обладают следующими уникальными свойствами:

Цветение на побегах текущего года
Цветение с весны до осени
Простота ухода
Легкость обрезки куста
Нет проблем с зимним укрытием
Яркое цветение из года в год
Компактность втулки
Крупные роскошные цветы
Идеально подходит как для посадки образцов, так и для создания композиций в сочетании с другими растениями.

Как приобрести эти уникальные гортензии!

Следующие сорта поступят в продажу в мае и августе 2018 г.:

Стоимость 1-летних черенков с развитой корневой системой Forever&Ever® Мята перечная, Forever&Ever® «Red Sensation» , Твист и Крик — 50 0 рублей

Стоимость двухлетних растений Forever & Ever® «Early Sensation», — 90 0 рублей

Стоимость 3-летних цветущих растений ЗКС Forever & Ever® «Early Sensation» — 150 0 руб. ,

Гортензия Зубчатая (Н. serrata )-новое, только август

Стоимость однолетних черенков Гортензия Пильчатая (N. Пильчатая ) — 5 00 рублей

Гортензия метельчатая Shikoku Flash новинка

Уникальная метельчатая гортензия с пестрыми окрашенными листьями!! Взрослые кусты (зх входы) с ЗКС — за май и август

Стоимость 3-х летних кустов ЗКС — 15 00 рублей

Гортензия древовидная розовая «Пинк Аннабель» Инвинсибель Спирит (HYDRANGEA arborescens «Пинк Аннабель» (Invincibelle Spirit, NCHA 1)) только на август

Стоимость 1-летних черенков Розовая Аннабель «Invincibelle Spirit» — 5 0 0 рублей

Сорт гортензии древовидной «Incrediball» можно сказать, что он вернул из небытия древовидную гортензию. Просто огромные белые шляпы. В 4 раза больше, чем Аннабель. Очень обильное цветение. только за август

Стоимость годовалых черенков «Incrediball» — 40 0 рублей

Гортензия древовидная » Hayes Starburst » (H. arborescens » Hayes Starburst «) Уникальная махровая гортензия! За май и август

Стоимость годовалых черенков » Hayes Starburst » — 40 0 рублей

Стоимость двухлетних черенков « Hayes Starburst » — 800 рублей

Гортензия черешковая (кудрявая) — полностью зимостойкий клон, поднимающийся в высоту более 2м.Клон получен из старого подмосковного сада, поэтому обладает отличной зимостойкостью, в отличие от зарубежного материала. за май и август

Стоимость однолетних черенков Гортензия черешковая — 4 50 рублей

Что такое 1-летний черенок: Это молодое растение гортензии, высотой до 10 см, с развитой корневой системой.

По всем вопросам, а также для уточнения наличия и заказа пишите на [email protected] Я обязательно свяжусь с Вами в ближайшее время.

Гортензии садовые в Казани. Журнал «Ворота» в гостях у Апельсинового сада.

границ | Молекулярная реконструкция старой родословной диплоидных и триплоидных генотипов Hydrangea macrophylla

Введение

Hydrangea macrophylla ( THUNB .) SER . является экономически важной культурой элитного сегмента декоративных растений. Сорта H. macrophylla известны своей богатой листвой и впечатляюще крупными красочными соцветиями.Соцветия можно разделить на кружевные (дикий тип) и швабровые (гортензия) в зависимости от положения и количества декоративных цветков в соцветии. Соцветие кружевной шляпки образует в основном недекоративные цветки, а по краю соцветия присутствует несколько декоративных цветков. Напротив, в соцветии швабры появляется больше декоративных цветков, которые распределяются по всему соцветию (Uemachi and Okumura, 2012). H. macrophylla происходит из Японии и был выведен для создания привлекательных декоративных горшечных растений и для озеленения в регионах с умеренным климатом по всему миру.Что касается многих декоративных культур, растений гортензии в коммерческих целях размножаются клонами черенками. В основном применяется метод клоновой селекции, при котором новые сорта отбирают в поколении F ₁ с последующим вегетативным размножением. Таким образом, большинство сортов обладают своеобразным, преимущественно гетерозиготным генотипом. Кроме того, некоторые сорта были получены путем мутантной селекции (Guérin, 2002). Колебания установленных сортов гортензии происходят медленно.Например, такие сорта, как «Mariesii» (1879 г.), «Madame Emile Mouillère» (1909 г.), «Libelle» (1964 г.) или «Blaumeise» (1979 г.) все еще находятся на рынке.

Несколько известных сортов кружевницы, такие как «Libelle» и «Blaumeise», были получены в результате систематической программы селекции, проводимой на Экспериментальной станции по производству фруктов, виноградарству и садоводству в Веденсвиле, Швейцария (ныне Исследовательская станция Agroscope Changins-Wädenswil, ACW). Эта программа была начата в 1952 году путем скрещивания сорта мопса Tödi с кружевным колпачком дикого типа.Он закончился в 1987 году после выпуска 26 сортов кружевной шляпки. В 1990 г. была опубликована полная родословная этих сортов кружевницы (Meier, 1990). Эта родословная, впоследствии названная «Wädenswil», является уникальным документом о 36-летнем систематическом разведении Hydrangea . Примечательно, что все сорта кружевницы Wädenswil основаны на одном предке кружевницы. Тип соцветия моногенный, доминантно-рецессивный признак (Uemachi, Okumura, 2012). Таким образом, мы предлагаем, чтобы все сорта кружевницы «Wädenswil» несли по крайней мере один аллель кружевницы от предка дикого типа.

Родословная Wädenswil включает диплоидные и триплоидные сорта (Zonneveld, 2004; Jones et al., 2007). Диплоидные сорта H. macrophylla содержат 2n = 2x = 36 хромосом, тогда как триплоидные сорта имеют 2n = 3x = 54 хромосомы. Таким образом, содержание ДНК 2С H. macrophylla колеблется от 3,85 до 4,97 пг для диплоидных сортов и от 6,48 до 7,27 пг для триплоидных сортов (Cerbah et al., 2001; Zonneld, 2004; Jones et al., 2007; Гюртлер и др., 2013; Александр, 2017). Триплоидные гортензии имеют более крупные органы и цветочные структуры, чем диплоидные (Александр, 2017). Кроме того, они считаются более устойчивыми к биотическим и абиотическим стрессам и желательны при селекции для отбора сортов. Однако о размножении триплоидных гортензий известно немного. Как и у других видов, триплоиды могут образовываться в результате соматического слияния, половой гибридизации между редуцированными и нередуцированными гаметами диплоидных родителей или половой гибридизации между диплоидным и тетраплоидным родителем (Wang et al., 2016). Насколько нам известно, естественные тетраплоиды H. macrophylla до сих пор не идентифицированы, хотя тетраплоидные растения H. macrophylla могут быть получены путем искусственно индуцированной аутоплоидизации, как показано для диплоидных сортов Adria и Libelle (Gürtler et al. др., 2013). Недавно было описано образование триплоидных гортензий за счет нередуцированных мужских гамет (Александр, 2017). В результате скрещивания диплоидных сортов Princess Juliana и Trophee, а также Zaunkönig и Princess Juliana были получены триплоидные и диплоидные растения F ₁, а реципрокное скрещивание и скрещивание с Zaunkönig в качестве мужского родителя привели к только у диплоидного потомства.Александр (2017) предположил, что триплоиды возникли в результате половой аутополиплоидии, которая, скорее всего, была вызвана генотип-специфическим продуцированием нередуцированных мужских гамет.

Неизвестно, можно ли использовать интерплоидные скрещивания диплоидных и триплоидных гортензий для получения триплоидных сортов. Как и у других видов, триплоиды имеют тенденцию быть стерильными и бессемянными из-за мейотических ошибок (Sattler et al., 2016; Wang et al., 2016). В связи с этим триплоиды обычно исключаются из программ систематического разведения.Однако данные о содержании ДНК сортов Wädenswil (Zonneveld, 2004; Jones et al. , 2007) показали, что триплоидные гортензии получили значительное развитие в селекции. По-видимому, успешно проводились интерплоидные скрещивания между диплоидными и триплоидными генотипами, хотя, вероятно, непреднамеренно. Для подтверждения этого предположения было собрано от 1 до 6 растений 43 сортов H. macrophylla из разных источников. Мы определили содержание их ДНК и тип соцветия, чтобы охарактеризовать эту коллекцию зародышевой плазмы.Мы обнаружили несколько культурных сортов, которые включали диплоидные и триплоидные растения или растения с типом соцветия кружевной шляпки или швабры. Чтобы прояснить эти смеси, мы провели анализ маркеров SSR. В рамках этого исследования мы представляем (i) систематический скрининг содержания ДНК 120 растений, которые представляют в общей сложности 43 сорта, включая почти все сорта «Wädenswil», (ii) идентификацию генотипа на основе отпечатков маркеров SSR, и (iii) сорт -специфическая идентификация генотипа на основе молекулярной реконструкции родословной «Wädenswil».

Материалы и методы

Растительный материал

Исследовали от 1 до 6 растений 43 сортов, в результате чего было получено 120 растений (табл. 1). Эта коллекция включала 1–5 растений 26 сортов кружевницы «Wädenswil» и 1–6 растений сортов «Tödi», «Bodensee», «Enziandom», «Glärnisch» и «Hörnli», которые использовались в качестве партнеров по скрещиванию для получения « Wädenswil» (Meier, 1990). Для партнеров по скрещиванию ‘Speer’, Nr. 1703, №. 1192 и №. 254. Кроме того, мы включили 11 сортов с 1–6 растениями, которые уже были доступны в Европе до начала программы селекции Wädenswil (Möhring et al., 1956). Наконец, мы включили «Bela», который, как предполагалось, был спонтанным соматическим мутантом сорта «Wädenswil» «Blaumeise» (Guérin, 2002). Сорок семь растений были предоставлены Ботаническим садом Пирна-Цушендорф Дрезденского технологического университета, членом Немецкого банка генов декоративных растений. Kötterheinrich-Hortensienkulturen предоставила 73 растения.

Таблица 1 . Содержание ДНК, тип соцветия и отпечаток маркера SSR 120 H.макрофилла растений.

Растения выращивали в горшках диаметром 17 см, заполненных Einheitserde ^® CL Hortensien blau, на столах в незамерзающей теплице Института овощных и декоративных культур им. Лейбница в Эрфурте, Германия, без дополнительного освещения. Растения удобряли Universol ^® blue 0,1% (Everris International BV) и поливали по мере необходимости. В начале июля все растения обрезают.

Фенотипирование

Тип соцветия отмечен в 2016 и 2017 годах, когда растения были в полном цвету. Hydrangea растения демонстрируют отчетливый тип соцветия: если декоративные цветки присутствуют только на периферии соцветия, то растение регистрируется как кружевница. Если все недекоративные цветки покрыты декоративными цветками, то растение регистрируется как мочалка.

Проточная цитометрия

Содержание ДНК

2C определяли методом проточной цитометрии согласно Dolezel et al. (2007) с небольшими изменениями. Мы использовали Pisum sativum L. ‘Ctirad’ с содержанием 2C ДНК 9.09 пг в качестве внутреннего стандарта. Около 0,3 и 0,9 см ² молодых листьев образца и стандарта измельчали лезвием бритвы в течение 30–60 с в пластиковой чашке Петри, содержащей 1 мл буфера Гэлбрейта (45 мМ MgCl ₂ , 20 мМ MOPS, 30 мМ цитрата натрия, 0,1% (об./об.) Triton X-100, pH 7) со свежим добавлением 50 мкг/мл йодида пропидия, 50 мкг/мл РНКазы А и 1% (вес./об.) PVP 25. Гомогенат перемешивали пипетированием, пропускали через фильтр CellTrics 30 мкм (Partec) и анализировали с использованием анализатора Partec CyFlow Space с синим твердотельным лазером 488 нм при скорости потока 0.1 мкл/с. Анализ данных проводили с использованием программного обеспечения FloMax версии 2.70 (Quantum Analysis GmbH). Для каждой смеси образец-стандарт-стандарт было проанализировано около 10000 ядер, что дало около 5000 ядер на образец. Пики высокого качества определяли при CV < 4%. Содержание ДНК 2C в каждом образце рассчитывали по отношению к содержанию ДНК 2C в стандарте следующим образом: Образец с содержанием ДНК 2C = среднее значение флуоресценции образца * 9,09 пг / среднее значение флуоресценции P. sativum .

Подсчет хромосом

На основании данных проточной цитометрии для подсчета хромосом было отобрано 3 диплоидных и 2 триплоидных растения.Кончики корней инкубировали в 2 мМ 8-гидроксихинолина в течение 3 часов при комнатной температуре и фиксировали в смеси этанол:уксусная кислота 3:1 не менее 24 часов. Затем кончики корней промывали в течение 10 мин в водной среде. и мацерировали в течение 40 мин при 37°C в ферментативном растворе, содержащем 4% целлюлозы R10 (Duchefa), 1% пектолиазы Y-23 (Duchefa), 75 мМ KCl и 7,5 мМ Na ₂ ЭДТА при pH 4. После этого кончики корней промывали в водной среде, переносили на предметное стекло, покрывали 6 мкл 45% уксусной кислоты и тщательно отжимали под покровным стеклом.Затем покровное стекло удаляли путем замораживания предметного стекла в жидком азоте. После сушки предметных стекол хромосомы окрашивали DAPI с использованием VECTASHIELD ^® HardSet™ Antifade Mounting Medium with DAPI (VECTOR Laboratories, Inc.) в соответствии с протоколом производителя. Хромосомы визуализировали с помощью флуоресцентного микроскопа с возбуждением 360 нм и эмиссионным фильтром 460 нм. Хромосомный подсчет производили в 5 метафазных клетках каждого исследуемого сорта.

Экстракция ДНК и анализ маркеров

Геномная ДНК была выделена из молодых листьев.Около 100 мг образцов листьев, подвергшихся шоковой заморозке, гомогенизировали с использованием Precellys ^® 24 с охлаждающим модулем Cryolys ^® (Bertin Technologies S.A.S.). ДНК выделяли с использованием набора DNeasy ^® Plant Mini Kit (QIAGEN) в соответствии с протоколом производителя. ДНК элюировали водной дест. Концентрацию ДНК измеряли с помощью NanoDrop 2000c (Thermo Scientific).

Мы использовали 11 маркеров Simple Sequence Repeat (SSR), которые уже применялись для оценки генетического разнообразия рода Hydrangea (Rinehart et al. , 2006; Рид и Райнхарт, 2007). Характеристика этих локусов SSR на основе 114 таксонов H. macrophylla была опубликована Reed and Rinehart (2007). Кроме того, мы разработали один маркер SSR на основе последовательности контигов RNAseq, опубликованной Chen et al. (2015). Эти маркеры SSR обнаруживали от 2 до 7 аллелей на локус в нашей коллекции зародышевой плазмы, в среднем 4,25 аллеля на локус. Информация о маркерах и соответствующие последовательности праймеров приведены в таблице 2. Все праймеры были получены от Metabion International AG.Анализы полимеразной цепной реакции (ПЦР) проводили в общем объеме 12,5 мкл, содержащем 5 нг ДНК, 1x ПЦР-буфер, включающий MgCl ₂ (Metabion International AG), 0,2 мМ dNTP (Metabion International AG), 0,2 мкМ немеченого прямого и обратного действия. праймеры, дополнительно 0,004 мкМ праймера, меченного IRD700, или 0,006 мкМ праймера, меченного IRD800 (Metabion International AG), и 0,02 ед. ДНК-полимеразы mi-Taq (Metabion International AG). Условия ПЦР: 3 мин при 94°С, 35 циклов по 30 с при 94°С, 30 с при 60°С и 30 с при 72°С и, наконец, 5 мин при 72°С.Длины фрагментов ПЦР определяли электрофорезом в полиакриламидном геле согласно Borchert and Gawenda (2010). Для этого мы смешали 5 мкл продукта ПЦР IRD 700, 5 мкл продукта ПЦР IRD 800 и 90 мкл нагрузочного красителя парарозанилина и разделили фрагменты ПЦР вместе со стандартом размера 50–700 п.н. (LI-COR Biosciences) на 6,5% KB ^{Plus. Гелевая матрица} (LI-COR Biosciences) с использованием анализатора ДНК LI-COR 4300 (LI-COR Biosciences). Анализ данных проводили с помощью программного обеспечения SAGA 3.3 (LI-COR Biosciences).Длины ПЦР-фрагментов определяли относительно стандарта размера 50–700 п.н. (LI-COR Biosciences). Для каждого генотипа маркерные аллели SSR записывали в двоичном коде как 1 (присутствует) и 0 (отсутствует).

Таблица 2 . Маркеры SSR, используемые в этом исследовании.

Результаты

Изменчивость фенотипа и уровня плоидности

Изучено 120 растений, относящихся к 43 сортам согласно их этикеткам (табл. 1). Эти сорта включали все 26 сортов кружевницы «Wädenswil», а также сорта «Tödi», «Bodensee», «Enziandom», «Glärnisch» и «Hörnli», которые использовались в качестве партнеров для скрещивания для получения сортов кружевницы «Wädenswil» (Meier, 1990).Кроме того, эта коллекция включала 11 сортов, существовавших до программы селекции «Wädenswil», а также «Bela», предполагаемый спонтанный мутант «Blaumeise» (Guérin, 2002). Все сорта были представлены 1–6 растениями из разных источников.

Во-первых, мы записали тип соцветия. Всего у 69 растений образовались кружевные соцветия, а у 29 растений – соцветия-мочалки (табл. 1). Тип соцветия остальных 22 растений не определяли, так как эти растения не цвели.Интересно, что 5 сортов (а именно «Fasan», «Mücke», «Pfau», «Flamingo», «Nikko Blue») содержали растения, которые давали соцветия либо кружевной шляпки, либо мочалки (рис. 1). Эти различные типы соцветий могут быть результатом смешанных растений или спонтанных мутаций в локусе соцветия.

Рисунок 1 . Примеры растений, различающихся по типу соцветия, содержанию ДНК 2C или отпечатку маркера SSR.

Во-вторых, мы определили содержание ДНК 2C во всех растениях с помощью проточной цитометрии, чтобы идентифицировать диплоидные и триплоидные растения.Всего выявлено 78 растений, у которых содержание ДНК 2С колебалось от 3,95 до 4,61 пг при среднем значении 4,42 ± 0,10 пг. Для 39 растений мы измерили содержание ДНК 2С от 6,47 до 6,81 пг, в среднем 6,61 ± 0,09 пг (табл. 1). Мы насчитали 36 хромосом для сортов «Bläuling», «Bodensee» и «Libelle», у которых содержание ДНК 2C колебалось от 4,40 до 4,45 пг. Напротив, у сортов «Blaumeise» и «Bela» было подсчитано 54 хромосомы с содержанием ДНК 2C 6,50 и 6,59 пг соответственно. Кроме того, Джонс и соавт. (2007) сообщили о 36 хромосомах для «Veitchii» и 54 хромосомах для «Nachtigall» и «Taube», у которых содержание ДНК 2C было определено с помощью 4.22, 6,51 и 6,57 пг соответственно. Таким образом, наша коллекция Hydrangea включала 78 предположительно диплоидных и 39 предположительно триплоидных растений. Однако нельзя исключать анеуплоиды, потому что проточная цитометрия позволяет только приблизительно определить число хромосом. Удивительно, но 12 из 43 сортов включали как диплоидные, так и триплоидные растения.

С помощью дактилоскопии SSR выявлено до четырех различных генотипов в пределах одного сорта

Сорта H. macrophylla размножаются вегетативно.Следовательно, все клоны сорта имеют одинаковый генотип и должны иметь одинаковое число хромосом и тип соцветия. Чтобы проверить, имеют ли эти разные растения идентичные генотипы, мы провели анализ маркеров SSR с использованием 12 полиморфных маркеров SSR. Эти маркеры выявляли от 2 до 7 различных аллелей на маркер и давали всего 51 различный аллель в пределах 120 растений (табл. 1). Используя эти 12 маркеров SSR, мы идентифицировали 18 сортов, растения которых демонстрировали уникальный, специфичный для сорта отпечаток пальца маркера SSR.Однако 25 из 43 сортов включали 2–4 разных генотипа на основе отпечатков маркеров SSR. Всего было обнаружено 62 различных генотипа (таблица 1), хотя ожидалось только 43 генотипа (по одному генотипу на сорт).

Наши 12 маркеров SSR не смогли различить «Blaumeise» и «Bela», а также «Kardinal» и «Rotdrossel». Этот результат ожидался для «Blaumeise» и «Bela», потому что «Bela» является мутантом «Blaumeise», что мы подтвердили на молекулярном уровне.Маловероятно, что какой-либо из используемых нами маркеров SSR способен обнаружить эту специфическую мутацию. Таким образом, «Blaumeise» и «Bela» имеют идентичный SSR-маркерный отпечаток, но у «Blaumeise» развиваются соцветия в виде кружевных шляпок, тогда как у «Bela» образуются соцветия в виде швабр. Напротив, «Кардинал» и «Ротдроссель» должны демонстрировать разные генотипы, поскольку они произошли от разных скрещиваний. Отобранные растения «Кардинал» и «Ротдроссель» могут принадлежать к одному генотипу, а другой сорт отсутствует в нашей коллекции.В качестве альтернативы количество маркеров может быть слишком низким для обнаружения специфических для генотипа полиморфизмов. Вероятность того, что «Кардинал» и «Ротдроссель» имеют одинаковый отпечаток пальца, составляет P = 2,291E-06, исходя из частоты 12 различных отпечатков пальцев маркера SSR в пуле триплоидных генотипов, проанализированном в этом исследовании. Кроме того, все растения «Кардинал» и «Ротдроссель» имеют очень похожий фенотип растений. Для подтверждения гипотезы о том, что все растения сорта «Кардинал» и «Ротдроссель» относятся к одному генотипу, необходимо провести анализ большего количества растений и маркеров.

Для 13 генотипов выявлено до 3 аллелей по разным маркерным локусам. Три аллеля в одном локусе указывают на триплоидию, которую мы подтвердили для 11 из 13 генотипов с помощью проточной цитометрии. Однако генотипы G25 и G45 показали 3 аллеля в маркерных локусах 7 и 5 соответственно, но содержание ДНК 2C 4,41 и 4,45 пг, что свидетельствует о диплоидии. Поскольку мы также независимо обнаружили эти аллели у других растений, они не были отброшены как неспецифические ПЦР-фрагменты, а могли свидетельствовать о дупликации хромосомных участков.

Реконструкция родословной Wädenswil на молекулярном уровне

Все растения сорта, различающиеся по типу соцветия или содержанию ДНК, имеют разные генотипы. Более того, между растениями с одинаковым типом соцветия и уровнем плоидности также были обнаружены разные генотипы, например, «Бергфинк» или «Эйсфогель» (табл. 1), поэтому некоторые растения необходимо маркировать неправильно. Чтобы определить правильное растение сорта, мы реконструировали родословную Wädenswil на молекулярном уровне.Основываясь на опубликованной родословной «Wädenswil» (Meier, 1990), которая показана с небольшими изменениями на рисунке 2, мы начали молекулярную реконструкцию с исходного скрещивания W31. Мы проследили наследование маркерных аллелей от известных родительских генотипов потомкам или предсказывали предполагаемые родительские генотипы по известным генотипам потомков на основе двух критериев: если маркерный локус потомка является гетерозиготным, оба родителя (диплоидные или триплоидные) должны содержать по крайней мере один этих аллелей. Если маркерный локус потомка гомозиготен, то оба родителя должны содержать хотя бы этот определенный аллель. Например, «Libelle» был получен от скрещивания W31 и является родителем скрещивания W45 и W74. Мы обнаружили два генотипа «Libelle», показывающие отпечатки маркеров SSR G01 и G33 соответственно. Только конфигурация аллеля G33 соответствовала скрещиванию W31 с аллелями, происходящими от «Tödi» (отпечаток пальца G57), скрещиванию W45 как родителю «Bläuling» (отпечаток пальца G07) и скрещиванию W74 как родителю обратного скрещивания «Elster» и « Bachstelze’, в то время как несколько маркерных аллелей G01 оказались неудачными.G01 также был обнаружен как отпечаток маркера SSR «Bachstelze». Таким образом, мы предполагаем, что «Либель» с отпечатком пальца G01 была неправильно названа и на самом деле является «Бахстельце». В скрещивании W45 ни один из четырех различных генотипов «Enziandom» не внес вклад в аллели «Bläuling». Мы предполагаем, что либо правильный «Enziandom» отсутствует в нашей коллекции, либо «Enziandom» не был родительским скрещиванием в W45. Кроме того, мы смогли предсказать некоторые конфигурации аллелей родительского генотипа на основе наших критериев.Этот предсказанный генотип можно использовать для идентификации правильного партнера по скрещиванию в W45. С помощью этого метода были проанализированы все кросс-комбинации. Полная молекулярная реконструкция родословной Wädenswil показана на рисунке 2. Нам удалось определить генотипы 18 из 26 сортов Wädenswil. Для «Fasan», «Rotschwanz», «Flamingo» и «Mücke» мы могли сократить количество генотипов до двух возможных кандидатов, которые оба соответствовали родословной. Отпечатки пальцев маркеров SSR «Kardinal» и «Rotdrossel» соответствуют обеим позициям в родословной.Здесь необходимо проанализировать больше растений и маркеров, чтобы определить специфический для сорта генотип и отпечаток пальца. Напротив, ни один из маркерных отпечатков пальцев SSR, которые были обнаружены для разных растений «Enziandom», «Papagei» и «Taube», не соответствовал соответствующей предсказанной конфигурации аллеля в родословной «Wädenswil». Таким образом, в нашей коллекции отсутствуют правильные генотипы этих трех сортов.

Рисунок 2 . Реконструкция родословной Wädenswil сортов кружевницы H.macrophylla по Мейеру (1990) на основе 12 маркеров SSR. В таблицах штрих-кодов схематично показаны отпечатки маркеров SSR 1–12, приведенные в бинарной индексной матрице в таблице 1. Обнаруженный 51 аллель маркера SSR представлен в виде маленьких столбцов, поскольку аллели • присутствуют, ◦ отсутствуют или • конфигурация аллелей неизвестна в момент времени. эта позиция. Wxx/x, номер кросса Wädenswil/номер завода; Gxx_M/L/U_x.x, отпечаток SSR _ тип соцветия _ содержание ДНК 2C в пг; М, швабра; L, шнурок; U, неизвестный тип соцветия; р, красный/розовый; б, синий; w, цвет белого цветка.

Различия в уровнях плоидности в пределах сорта из-за смешивания

Мы обнаружили 12 из 43 сортов, которые включали диплоидные и триплоидные растения. Чтобы доказать, произошли ли эти диплоиды от триплоидных предшественников, мы сравнили конфигурации аллелей триплоидных и диплоидных растений с одинаковым названием сорта. Если бы имела место хромосомная реорганизация, то все аллели диплоидных растений присутствовали бы в соответствующем триплоидном предшественнике. Однако ни один из 12 сортов, включающих диплоидные и триплоидные растения, не выполнил этого условия.Вместо этого мы смогли отнести некоторые из этих растений к другим культурным сортам на основе их отпечатков маркеров SSR, которые затем идеально соответствовали соответствующему уровню плоидности (таблица 1). Таким образом, все разные растения были неправильно маркированы.

Интерплоидные скрещивания в родословной Wädenswil

Всего на основе анализа маркеров мы выявили не менее 45 диплоидных и 15 триплоидных генотипов. К родословной «Wädenswil» было присоединено 25 диплоидных и 7 триплоидных генотипов (рис. 2).Наш анализ идентифицировал скрещивание W51 как интерплоидное скрещивание между триплоидом «Möwe» и диплоидом «Glärnisch». Кроме того, предсказанные генотипы W44/4 и W55/29 содержали до 3 аллелей в различных маркерных локусах, что свидетельствует о полиплоидии. W44/4 и W55/29 использовались в качестве партнеров по скрещиванию в скрещиваниях W55, W71 и W79, что выявило еще 3 интерплоидных скрещивания в родословной «Wädenswil». Результатом этих скрещиваний было диплоидное и/или триплоидное потомство. На основании этих данных мы предполагаем, что интерплоидные скрещивания с триплоидами были успешно применены в селекции Hydrangea , в результате чего было получено диплоидное и триплоидное потомство.

Кроме того, скрещивания W38, W44 и W81 также дали триплоидное потомство. Механизм, вызвавший триплоидию, остается неясным, поскольку неизвестно большинство партнеров по скрещиванию и содержание их ДНК.

Обсуждение

Путем генотипирования набора из 120 растений H. macrophylla с 12 SSR-маркерами мы идентифицировали 25 из 43 сортов, которые включали 2–4 растения с разными SSR-маркерными отпечатками, которые различались также по содержанию ДНК и типу соцветия.Всего мы выявили не менее 62 различных генотипов вместо ожидаемых 43. Примерно 36% этих растений имели неправильное название сорта. Основываясь на опубликованной родословной «Wädenswil» кружевоцветных гортензий, мы смогли предсказать характерные для сорта отпечатки маркеров SSR и получили 18 из 26 сортов «Wädenswil». Таким образом, генотипирование позволило сократить общее количество растений почти на 52%, а в нашей коллекции гермоплазмы выявлено 19 дополнительных генотипов.

Наше исследование подтвердило, что генотипирование с помощью маркеров SSR является мощным инструментом для идентификации и дифференциации генотипов, специфичных для сортов, у клонально размножаемых видов растений.Количество растений с одинаковым генотипом может быть уменьшено, чтобы уменьшить количество растений в коллекциях зародышевой плазмы. Напротив, растения с разными генотипами могут быть разделены в случае смешения и могут быть отнесены к правильному сорту. Это было бы особенно полезно для генных банков. Генные банки сохраняют и документируют генетические ресурсы и предоставляют материалы и данные для поддержания генетического и биоразнообразия (www. croptrust.org). Возможность сортировать и исправлять запасы с использованием SRR-маркеров была бы невероятно полезной для генных банков.Во всем мире около 1750 генных банков содержат более 7,4 миллиона семян или растительных тканей тысяч видов сельскохозяйственных культур (Gruber, 2017). В октябре 2016 г. коллекций Hydrangea стали частью Национального банка генов декоративных растений Германии (Spellerberg, 2017). Однако сохранение растений обходится дорого, а возможности хранения ограничены. Для эффективной организации генных банков необходимо избегать дублирования коллекций растений и неправильно названных растений.

Гортензия является вегетативно размножаемой культурой, и каждый сорт имеет определенный генотип, который может быть представлен только одним растением.Однако в нашей коллекции растений, которая частично представляет собой две независимые коллекции Hydrangea , было обнаружено сильное смешение растений. Несколько смешений были четко обнаружены по фенотипу, например, разные типы соцветий, но большинство из них не было очевидным из-за фенотипического сходства, возникающего в результате близкого родства некоторых сортов Hydrangea . Например, братья и сестры «Blaumeise», «Eisvogel» и «Nachtigall» являются сводными братьями и сестрами «Rotkehlchen», а «Elster» и «Bachstelze» являются потомками обратного скрещивания «Libelle» (Meier, 1990).Если сортовые различия слишком малы и выдающиеся характеристики отсутствуют, идентификация сорта только по фенотипу имеет решающее значение, и может произойти путаница, особенно в отношении старых сортов, снятых с коммерческого производства. Избыточность и смешение также наблюдались в коллекциях гермоплазмы других видов (Hokanson et al., 1998; Lund et al., 2003). Таким образом, мы настоятельно рекомендуем документировать растения не только по фенотипу, но и по генотипу, чтобы выявить смешанные, исключить неправильные и уменьшить избыточные растения.Кроме того, мы предлагаем делать описания растений только после определения генотипа и добавлять эти фенотипические и генотипические данные в общедоступную базу данных.

Для генотипирования система маркеров и количество маркеров должны быть выбраны индивидуально для каждого вида в соответствии с генетическим разнообразием коллекции зародышевой плазмы. В нашей коллекции растений 12 маркеров SSR, которые выявили в общей сложности 51 различный аллель, отличали 62 из предполагаемых 64 генотипов. Маркеры SSR очень подходят для обнаружения дубликатов или неправильно названных растений (Hokanson et al., 1998; Лунд и др., 2003). Они удобны для генотипирования коллекций зародышевой плазмы из-за их локус-специфического кодоминантного наследования, высокой воспроизводимости и высокой производительности. Кроме того, они относительно дешевы, а обработка данных проста. Однако рассматривается только небольшое количество локусов, и информация о генетическом разнообразии остается низкой. Во времена секвенирования следующего поколения повторное секвенирование целых геномов и генотипирование посредством секвенирования становятся все более распространенными и доступными (Lin et al., 2014; Ченг и др., 2016; Варшней и др., 2017). Хотя генотипирование путем секвенирования представляет большой интерес с точки зрения полногеномного анализа ассоциаций и исследований перед скрещиванием, оно может оказаться чрезмерным для простой идентификации генотипа. Количество маркеров, используемых в этом исследовании, относительно невелико. Однако дифференциация генотипов зависит не только от количества маркеров, но и от количества выявляемых аллелей и частот аллелей в коллекции зародышевой плазмы. Для систематического генотипирования коллекций банка генов Hydrangea необходимо установить номер маркера, и это зависит от генетического разнообразия коллекции растений.Это исследование обеспечивает основу для будущих анализов генотипа Hydrangea с использованием маркеров SSR. Хотя маркеры SSR кажутся устаревшими во времена секвенирования следующего поколения , они хорошо выполняют требования простой и надежной идентификации генотипа.

На основании реконструкции родословной «Wädenswil» мы определили четыре предполагаемых интерплоидных скрещивания, давших диплоидное и/или триплоидное потомство даже высшего качества. Таким образом, триплоиды использовались в качестве родителей семян и пыльцы.Скрещивания с триплоидами считаются сложными из-за мейотических ошибок. Триплоиды часто бывают стерильными, как это наблюдается у цитрусовых, бананов и арбузов (Wang et al., 2016), или они производят анеуплоидные гаметы, как это наблюдается у кукурузы. Скрещивание триплоидных и диплоидных растений кукурузы привело к анеуплоидному потомству с разным числом хромосом и недостаточным фенотипом по сравнению с диплоидными и триплоидными родительскими растениями (McClintock, 1929). В отличие от кукурузы, скрещивание триплоидных и тетраплоидных растений розы показало, что триплоидные розы способны продуцировать гаплоидные и диплоидные мужские и женские гаметы (Van Huylenbroeck et al., 2005). Содержание ДНК 2C проверенных сортов «Wädenswil» не дало существенных указаний на анеуплоидию, хотя у нас есть вариации содержания ДНК в измерениях проточной цитометрии в диапазоне ± 1 хромосомы. Однако эта изменчивость может быть вызвана естественными вариациями содержания ДНК (Cerbah et al., 2001) или технической ошибкой измерений методом проточной цитометрии. Кроме того, все исследованные гортензии показали нормальный, очень привлекательный фенотип, что маловероятно для анеуплоидных растений. Растения с отпечатком маркера SSR G25 и G45 показали 3 аллеля с использованием маркеров 7 и 5 соответственно, хотя соответствующие растения предполагались диплоидными на основании соответствующего содержания ДНК 2C.Все аллели были независимо обнаружены и у других растений, поэтому их нельзя исключить как неспецифические ПЦР-фрагменты. Три аллеля на почти диплоидном фоне могут указывать на анеуплоидию отдельных хромосом. Но прежде чем рассуждать о поколении анеуплоидных гортензий, необходимо определить соответствующие числа хромосом этих растений и проверить идентичность трех предполагаемых аллелей в последующих исследованиях.

Родословная Wädenswil дает четкое указание на то, что триплоидные гортензии можно использовать для систематической селекции.Тем не менее, получение триплоидных, анеуплоидных и, возможно, тетраплоидных гортензий и их пригодность для селекционных программ требует дальнейшего анализа, включая систематические эксперименты по скрещиванию с различными диплоидными и триплоидными сортами, а также цитогенетический анализ мейоза.

Вклад авторов

PH разработал и провел эксперименты и проанализировал данные, AH задумал исследование и привлек финансирование, CT руководил исследованием и написал рукопись. Все авторы пересмотрели данные, прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

Это исследование было поддержано средствами гранта Landwirtschaftliche Rentenbank №. 28RF40011, Министерства защиты прав потребителей, продовольствия и сельского хозяйства Федеративной Республики Германия, Министерство науки, исследований и культуры земли Бранденбург и Министерство инфраструктуры и сельского хозяйства Тюрингии.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Благодарности

Мы благодарим Катю Крюгер, Джанетт Гриммер и Йорга Крюгера за техническую помощь. Мы благодарны Йоргу Фуксу за первоначальную установку проточной цитометрии. Мы благодарим фрауке Энгель, Маттиаса Риделя, Кристину Вернер и Энн Беренд за полезные обсуждения и Хелен Брэбэм за корректуру рукописи. Мы благодарны Kötterheinrich-Hortensienkulturen и Ботаническому саду Пирна-Цушендорф за предоставленный посадочный материал.

Ссылки

Александр Л.(2017). Получение триплоида Hydrangea macrophylla путем селекции нередуцированных гамет. HortScience 52, 221–224. doi: 10.21273/HORTSCI11358-16

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Борхерт, Т., и Гавенда, И. (2010). Разработка и применение высокопроизводительного метода полиморфизма длины амплифицированных фрагментов у Calluna vulgaris ( Ericaceae ). Электр. Дж. Биотех. 13, 7–8. doi: 10.2225/vol13-issue2-fulltext-3

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Цербах, М., Мортро Э., Браун С., Сильяк-Яковлев С., Бертран Х. и Ламберт С. (2001). Изменчивость размера генома и взаимоотношения видов в роде Hydrangea . Теор. заявл. Жене. 103, 45–51. doi: 10.1007/s001220000529

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Чен, Х., Лу, К., Цзян, Х., и Пэн, Дж. (2015). Анализ глобального транскриптома выявляет различные пути толерантности к алюминию у видов Hydrangea macrophylla , накапливающих Al, и идентификацию маркеров. PLoS ONE 10:e0144927. doi: 10.1371/journal.pone.0144927

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Cheng, F., Wu, J., Cai, C., Fu, L., Liang, J., Borm, T., et al. (2016). Ресеквенирование генома и сравнительный анализ вариома в коллекции Brassica rapa и Brassica oleracea . науч. Данные 3:160119. doi: 10.1038/sdata.2016.119

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Герен, В.(2002). Hydrangea: Acquisition Nouvelles et Applications . Париж: INRA-quae.

Академия Google

Гюртлер, С., Клоке, Э. , и Шрадер, О. (2013). Mutagenese und Polyploidisierung zur Schaffung neuer genetischer Variabilität bei der Hortensie ( Hydrangea macrophylla ). Дж. Культив. Растения 65, 273–284. doi: 10.5073/JfK.2013.07.03

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Хокансон, С., Шевк-Макфадден, А., Ламбой, В., и Макферсон, Дж.(1998). Микросателлитные (SSR) маркеры раскрывают генетическую идентичность, генетическое разнообразие и взаимоотношения у Malus × domestica Borkh. коллекция основных подмножеств. Теор. заявл. Жене. 97, 671–683. дои: 10.1007/s001220050943

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Джонс, К.Д., Рид, С.М., и Райнхарт, Т.А. (2007). Анализ уровня плоидности и его влияния на длину замыкающих клеток, диаметр пыльцы и фертильность у Hydrangea macrophylla . Hortscience 42, 483–488. Доступно в Интернете по адресу: http://handle.nal.usda.gov/10113/17762

Академия Google

Линь, Т. , Чжу, Г., Чжан, Дж., Сюй, X., Ю, К., Чжэн, З., и др. (2014). Геномный анализ дает представление об истории селекции томатов. Нац. Жене. 46, 1220–1226. doi: 10.1038/ng.3117

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лунд, Б., Ортис, Р., Сковгаард, И., Во, Р. и Андерсен, С. (2003).Анализ потенциальных дубликатов в коллекциях банка генов ячменя с использованием повторной выборки микросателлитных данных. Теор. заявл. Жене. 106, 1129–1138. doi: 10.1007/s00122-002-1130-y

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мейер, Ф. (1990). Tellerhortensien-Züchtungen . Wädenswil: Eidgenössische Forschungsanstalt für Obst-, Wein- und Gartenbau.

Мёринг, Х.К., Кулен, Х., и Боссе, Г. (1956). Die Hortensien: ihre Geschichtliche Entwicklung, Systematik, Anatomie und Morphologie, Züchterische Bearbeitung, Sortenentwicklung und Kultur im Erwerbsgartenbau .Ахен: Verlag Deutsche Gärtnerbörse.

Райнхарт Т.А., Шеффлер Б.Е. и Рид С.М. (2006). Оценка генетического разнообразия рода Hydrangea и разработка молекулярного ключа на основе SSR. Дж. Амер. соц. Хорт. науч. 131, 787–797. Доступно в Интернете по адресу: http://handle.nal.usda.gov/10113/21586

Академия Google

Спеллерберг, Б. (2017). Aktuelle Entwicklungen bei der Deutschen Genbank Zierpflanzen. Julius-Kühn-Archiv 457, 15–17.doi: 10.5073/jka.2017.457.001

Полнотекстовая перекрестная ссылка

Уэмачи, Т., и Окумура, А. (2012). Наследование типов соцветий у Hydrangea macrophylla . Дж. Яп. соц. Хорт. науч. 81, 263–268. дои: 10.2503/jjshs1.81.263

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Ван Хайленброк, Дж., Леус, Л., и ван Бокстале, Э. (2005). Интерплоидные скрещивания у роз: использование триплоидов. Акта Хорт. 690, 109–112. doi: 10.17660/ActaHortic.2005.690.15

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Varshney, R. K., Saxena, R.K., Upadhyaya, H.D., Khan, A.W., Yu, Y., Kim, C., et al. (2017). Полногеномное повторное секвенирование 292 образцов голубиного гороха идентифицирует геномные области, связанные с одомашниванием и агрономическими признаками. Нац. Жене. 49, 1082–1088. doi: 10.1038/ng.3872

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ван, X., Ченг, З.-М., Чжи, С., и Сюй, Ф. (2016).Селекция триплоидных растений: обзор. Чехия, Ю. Жене. Порода растений. 52, 41–54. дои: 10.17221/151/2015-CJGPB

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Зонневельд, Б. (2004). «Размер генома Hydrangea », в Encyclopedia of Hydrangeas , редакторы J. van Gelderen и DM van Gelderen (Портленд, Орегон: Timber Press), 245–251.

Академия Google

(PDF) Текущее и будущее распространение листопадного кустарника Hydrangea macrophylla в Китае по оценке MaxEnt

ЯН и др.

распространение Quercus libani Olivier. Sustainability, 12, 2671.

https://doi.org/10.3390/su120 72671

Кобос, М. Э., Петерсон, А. Т., Барве, Н., и Осорио-Ольвера, Л. (2019).

kuenm: пакет R для детальной разработки моделей экологической ниши

с использованием Maxent. PeerJ, 7, e6281. https://doi.org/10.7717/

peerj.6281

Галопин Г., Може Дж. и Морел П. (2010). Морфогенетический анализ фенотипической изменчивости

архитектурной единицы Hydrangea mac-

rophylla.Annals of Forest Science, 67, 309. ht tps ://doi.org/10.1051/

fores t/2009115

Гебревахид Ю., Абрехе С., Мереса Э., Эясу Г., Абай, К., Гебреаб,

Г., Киданемариам, К., Адиссу, Г., Абреха, Г., и Дарча, Г. (2020).

Текущее и будущее прогнозирование потенциальных ареалов Oxytenanthera

abyssinica (A. Richard) с использованием модели MaxEnt в условиях изменения климата

в Северной Эфиопии. Экологические процессы, 9, 6. https://дои.

орг / 1 0 . 1 1 8 6 / с 1 3 7 1 7 — 0 1 9 — 0 2 1 0 — 8

Го, Дж., Лю, С., Чжан, К., Чжан, Д., Се, К., и Лю, X. (2017). Прогноз

для потенциальной области распространения Codonopsis pilosula в глобальном масштабе

на основе модели Maxent. Китайский журнал прикладной экологии,

28, 992–1000.Б. и Бомонт, LJ

(2017). Климат, почва или и то, и другое? Какие переменные являются лучшими предикторами

распределения видов австралийских кустарников? PeerJ, 5, e3446.

https://doi.org/10.7717/peerj.3446

Ху, С., и Хе, Л. (2020). Анализ подходящих ареалов Fargesia

denudata в национальном заповеднике Байшуйцзян с использованием модели MaxEnt

и ArcGIS. Китайский журнал экологии, 39, 2115–2122.

https://doi.org/10.13292/ j.1000- 4890.202006.023

Ху, X., Ву, Ф., Го, В., и Лю, Н. (2014). Идентификация потенциального региона выращивания сандалового альбома в Китае с помощью модели логической ниши MaxEnt eco-

. Scientia Silvae Sinicae, 50, 27–33. https://doi.

орг / 1 0 . 1 1 7 0 7 / Дж . 1 0 0 1 — 7 4 8 8 . 2 0 1 4 0 5 0 4

Хуанг, Х., Вогу, З., Депинг, Ю., Цзюньхо, К., и Лу, З. (2020). Прогнозирование

воздействия будущего изменения климата на характер распространения

Toona ciliata var.pubescens в Китае. Journal of Nanjing Forestry

University (издание естественных наук), 44, 163–170. https://doi. (2018). Прогнозирование

изменения ареала в климатически подходящей среде обитания для Китайского моря

Крушина при сценариях изменения климата. Лесов, 9, 9. htt ps://doi.

org/10.3390/f
09

Джейн, Э., Стивен, Дж. П., Тревор, Х., Мирослав, Д., Юнг, Э. К., и Колин, Дж. Ю.

(2011). Статистическое объяснение MaxEnt для экологов. Diversity

and Distributions, 17, 43–57.

Jia, X., Wang, C., Jin, H., Zhao, Y., Liu, L., Chen, Q., Li, B., Xiao , Ю. и Инь,

Х. (2019). Оценка подходящей области распространения Pinus koraiensis

на основе оптимизированной модели MaxEnt. Китайский журнал экологии, 38,

2570–2576.https://doi.org/10.13292/ j.1000- 4890.201908.017

Кейн, К., Дебински, Д.М., Андерсон, К., Скаста, Д.Д., Энгл, Д.М., и

Миллер, М.Р. ( 2 017 ). Использование региональных климатических прогнозов для руководства восстановлением травянистых сообществ перед лицом изменения климата. Frontiers

in Plant Science, 8, 730. https://doi.org/10.3389/fpls.2017.00730

Кэтрин, М . Р. и Моник Э.Р. (2015). Временной контекст влияет на

наблюдаемую скорость изменения ареалов древесных пород под влиянием климата.Global

Экология и биогеография, 24, 44–51. htt ps://doi. org/10 .1111/

geb.12240

Козак, К. Х., Грэм, Ч. Х., и Винс, Дж. Дж. (2008). Интеграция данных об окружающей среде

на основе ГИС в эволюционную биологию. Trends in Ecology &

Evolution, 23, 141–148. https://doi.org/10.1016/j.tree.2008.02.001

Kumar, S. (2007). Четвертый оценочный отчет Межправительственной группы экспертов

по изменению климата: важные наблюдения и выводы.

Current Science, 92, 1034.

Лаура Б., Кэтрин П. и Сильви Д. Б. (2014). Переключение с климатом?

Доказательства недавних изменений в распространении видов деревьев в высоких

широтах. Экосфера, 5, 83. https://doi.org/10.1890/ES14-00111.1

Ли, Х.К., Ли, С.Дж., Ким, М.К., и Ли, С.Д. (2020). Прогноз

фенологических сдвигов растений при изменении климата в Южной Корее.

Устойчивое развитие, 12,

1.https://doi.org/10.3390/su122 19276

Li, G.Q., Liu, C.C., Liu, Y.G., Yang, J., Zhang, X.S., & Guo, K. (2013).

Успехи в теоретических вопросах моделей распространения видов. Acta

Ecologica Sinica, 33, 4827–4835. https://doi.org/10.5846/stxb2

01212 031735

Li, Y., Li, M., Li, C., & Liu, Z. ( 2020). Прогнозы оптимизированной модели Maxent

воздействия изменения климата на подходящее распространение

Cunninghamia lanceolata в Китае.Лесная с, 11, 302. https://doi.

org/10.3390/f1103 0302

Ли, Ю. , Чжан, Л., Чжу, В., Чжан, Дж., Сюй, С., и Чжу, Л. (2021). Изменения

Taxus chinensis var. Распределение местообитаний майрей в условиях глобального изменения климата

. Журнал природных ресурсов, 36, 783–792. https://doi.

org/10.31497/zrzyxb.20210318

Лиза, Вашингтон (2019). Оптимизация оценки прорастания и жизнеспособности пыльцы для Hydrangea macrophylla, Dichroa febrifuga и

их гибридов.Scientia Horticulturae 246, 244–250. https://doi.

org/10.1016/j.scien ta.2018.11.008

Лю, В. (2020). Применение гортензии в ландшафтной архитектуре.

Сельское хозяйство Южного Китая, 14 , 43–44. 020). Прогнозирование потенциального глобального географического распространения двух видов Icerya в условиях изменения климата. Лесной ц, 11, 684.

https://doi.org/10.3390/f1106 0684

Мероу, К. мл., и Силандер, Дж. А. (2014). Сравнение Maxlike и

Maxent для моделирования распределения видов. Methods in Ecology and

Evolution, 5, 215–225. https://doi.org/10.1111/2041-210X.12152

Мураока Х. и Коидзуми Х. (2005).

прирост углерода в лиственно-лиственном лесу.Сельскохозяйственная и лесная метеорология, 134, 39–59. https://doi.

org/10.1016/j.agrfo rmet.2005.08.013

Ni, J., & Song, Y. (1997). Связь между климатом и распространением

основных видов субтропических вечнозеленых широколиственных лесов в Китае.

Acta Phytoecologica Sinica, 21, 115–129.

Пагтер, М., Дженсен, К.Р., Петерсен, К.К., Лю, Ф., и Арора, Р. (2008).

Изменение содержания углеводов, АБК и белков коры при сезонной

холодовой акклиматизации и деакклиматизации у видов гортензий,

отличающихся холодостойкостью.Physiologia Plantarum, 134, 473–485. https://doi.

org/10.1111/j .139 9-3054.2 00 8.01154.x

Phillips, S.J., Anderson, R.P., & Schapire, R.E. (20 06). Максимальная энтропия

моделирование географического распространения видов. Экологическое

Моделирование, 190, 231–259. https://doi.org/10.1016/j.ecolm

odel.2005.03.026

Qiao, Q., Wang, J., & Tao, J. (2020 ). Ход исследований гортензии.

Сельскохозяйственный журнал, 10, 60–64.

Цинь С., Ян Ю. и Оу Ю. (2020). Прогноз потенциального распространения

Chimonanthus praecox в Китае на основе модели MA XENT и

Arc GIS. Экологический. Science, 39, 49–56. https://doi.org/10.14108/

j.cnki.1008-8873.2020.03.008

Qiu, H., Sun, J., Xu, D., Shen, A. , Цзян Б., Юань В. и Ли С. (2020). Основанный на модели MaxEnt

прогноз потенциального распространения Liriodendron

chinense в Китае.Journal of Zhejiang A&F University, 37, 1–8. https://

doi.org/10.11833/j.issn.2095-0756.2020.01.001

Радосавлевич А. и Андерсон Р. П. (2014). Улучшение моделей MAXENT

распределения видов: сложность, переоснащение и оценка. Journal

of Biogeography, 41, 629–643. https://doi.org/10. 1111/jbi.12227

Remya, K., Ramachandran, A., & Jayakumar, S. (2015). Прогнозирование

текущего и будущего подходящего распределения местообитаний Myristica dac-

tyloides Gaer tn.с использованием модели MaxEnt в Восточных Гатах, Индия.

Экологическая инженерия, 82, 184–188. https://doi.org/10.1016/j.

ecole ng.2015.04.053

Рен, К., Чжэн, Дж., Чжан, Дж., Лю, X., Чжан, Л., Го, В., Ван, Л., и Сун,

Дж. (2020). Ход исследований стрессоустойчивости гортензии.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.

Настройка браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.

Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только та информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Полногеномные ассоциативные исследования типа соцветия и ремонтантности у Hydrangea macrophylla | Исследования в области садоводства

Аннотация

Тип соцветия и ремонтантность — два ценных признака гортензии крупнолистной ( Hydrangea macrophylla L. ) и оба наследуются рецессивно. Селекция с помощью молекулярных маркеров (MAS) может значительно сократить время, необходимое для выведения сортов с желаемыми признаками. В этом исследовании было проведено полногеномное исследование ассоциации (GWAS) с использованием 5803 однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) с использованием панели из 82 сортов крупнолистной гортензии. Один локус SNP ( Hy_CAPS_Inflo ), связанный с типом соцветия, был идентифицирован с помощью методов общей линейной модели (GLM) и смешанной линейной модели (MLM), которые объяснили 65.5% и 36,1% фенотипических вариаций соответственно. Двадцать три SNP, связанных с ремонтантностью, были обнаружены в GLM, тогда как SNP не были обнаружены в MLM. Локус SNP ( Hy_CAPS_Inflo ) был преобразован в маркер расщепленной амплифицированной полиморфной последовательности (CAPS), который показал абсолютную точность идентификации (100%) типа соцветия в контрольной панели, состоящей из восемнадцати сортов H. macrophylla . SNP был исследован в потомстве 341 F ₁ с использованием генотипирования путем секвенирования (GBS) и совместного разделения с типом соцветия ( х ² = 0.12; P = 0,73). Впоследствии SNP использовали для племенной селекции с использованием технологии конкурентной аллель-специфической ПЦР (KASP). Обсуждаются будущие направления использования геномики и MAS для улучшения селекции гортензий. Результаты, представленные в этом исследовании, дают представление о дальнейших исследованиях по пониманию генетических механизмов, лежащих в основе типа соцветия и ремонтантности у H. macrophylla . Разработанные здесь маркеры CAPS и KASP будут сразу же полезны для применения MAS для ускорения улучшения селекции гортензии.

Введение

Hydrangea macrophylla L. — популярная культурная садовая культура, широко выращиваемая в Америке, Азии и Европе ^1,2 . Известный своими привлекательными большими щитками и уникальными изменениями окраски цветков, сотни названных сортов были выведены и отобраны по всему миру ³ . Гортензия — универсальное декоративное растение, которое можно использовать как цветочное, горшечное и ландшафтное растение. Программы селекции гортензии обычно преследуют конкретные цели в зависимости от того, как будут использоваться растения.Разведение ландшафтных гортензий фокусируется на том, образует ли растение округлый или холмистый куст, состоящий из прямостоячих неразветвленных стеблей, в то время как программы разведения цветочных гортензий нацелены на прочность и долговечность стебля ⁴ . Тем не менее, признаки цветения всегда считаются приоритетом для любой программы разведения гортензий, поскольку цветы представляют собой ключевую садоводческую привлекательность для гортензии, как и для многих других декоративных культур. Окраска чашелистиков, тип соцветия и время закладки цветочных бутонов являются наиболее важными признаками цветения гортензии. В то время как изменения окраски цветков гортензии, как было показано, являются результатом внутренней детоксикации Al в условиях низкого pH ⁵ , тип соцветия и время закладки цветочных почек в значительной степени находятся под генетическим контролем ^6–8 .

Тип соцветия является наиболее очевидным садоводческим признаком сортов H. macrophylla . Два типа соцветий, швабра и кружевная шляпка, классифицируются по соотношению между маленькими плодородными цветками и большими эффектными чашелистиками.Эффектные чашелистики гортензии швабры полностью окружают плодородные цветки, расположенные на цветоножках внизу, что приводит к округлым соцветиям. Соцветия кружевной шляпки состоят из плоскости фертильных цветков, окруженных кольцом эффектных чашелистиков, ведущих к плоскому соцветию ⁹ . «Endless Summer» The Original («Bailmer») и «Veitchii» — это два сорта H. macrophylla , которые представляют разные типы соцветий. «Бесконечное лето» — это гортензия с розовыми или голубыми цветками (зависит от pH) с соцветиями в виде мундштуков, число которых варьируется от 7. от 5 до 15 см в диаметре ¹⁰ , в то время как у сорта Veitchii кружевные цветочные головки с большими белыми чашелистиками. Усилия по селекции были в первую очередь сосредоточены на производстве сортов с соцветиями в виде швабры с учетом предпочтений клиентов.

Ремонтантность, или повторное цветение, — это способность инициировать цветочные почки на новых вегетативных побегах, что приводит к непрерывному цветению в течение всего вегетационного периода. Ремонтантность является крайне желательной чертой для современных ландшафтных растений, так как потребители постоянно выбирают сорта с продолжительным цветением и надежным цветением в более северных или подверженных морозам районах ¹¹ .Хорошо известные ремонтантные сорта H. macrophylla включают «All Summer Beauty», «Bailmer» (продается как «Endless Summer» ^®), «David Ramsey», «Decatur Blue», «Early Sensation» (продается как «Early Sensation»). Навсегда и навсегда» ^®), «Окхилл» и «Пенни Мак» ^6,7,9. Новые ремонтантные сорта часто представляются как коллекции в рамках известного бренда, например серия Endless Summer ^®, серия Forever & Ever ^® и серия Let’s Dance ^®.So Long ^® — это последняя серия повторно цветущих гортензий, выпущенная в 2017 году SAPHO (Синдикат по улучшению декоративных садовых растений), эксклюзивным лицензионным партнером INRA.

Процедуры селекции садовых культур, основанные на 4–6-летней полевой оценке, являются дорогостоящими и неэффективными, учитывая, что у большинства растений не будет желаемых комбинаций признаков. Молекулярные маркеры, связанные с признаками, можно использовать для отбора желаемых растений на стадии рассады, чтобы сократить время селекции и увеличить скорость развития сорта.Однонуклеотидные полиморфизмы (SNP) представляют собой технологию молекулярных маркеров ДНК третьего поколения, определяемую как изменения одного основания в определенном положении нуклеотида во всем геноме всех организмов ¹² . По сравнению с традиционными молекулярными маркерами SNP многочисленны, стабильны и легко обнаруживаются с помощью технологий секвенирования, таких как генотипирование посредством секвенирования (GBS), даже без априорной информации о последовательности генома ¹³ . Таким образом, маркеры SNP широко используются в оценках генетического разнообразия, исследованиях молекулярной эволюции и генетическом картировании интересующих признаков различных садовых культур, таких как гвоздика ¹⁴, хризантемы ¹⁵, розы ¹⁶, лилии ¹⁷, и тюльпаны ¹⁸ .

Полногеномное ассоциативное исследование (GWAS) — это мощный инструмент для анализа сложных признаков растений путем корреляции большого количества молекулярных маркеров, распределенных по всему геному, с фенотипической вариацией ¹⁹ . В последние несколько лет GWAS применяли ко многим видам растений для поиска функциональных аллелей, которые могут помочь программам селекции ²⁰ . У роз с помощью GWAS ²¹ были обнаружены ключевые гены, отвечающие за плотность колючек и количество цветочных лепестков.Ключевой ген, контролирующий форму плода, был идентифицирован путем использования естественной изменчивости на панели образцов персика ²² . Значимые SNP, идентифицированные с помощью GWAS, могут быть преобразованы в легко используемые молекулярные маркеры, такие как одноцепочечные конформационные полиморфизмы ²³, плавление с высоким разрешением ²⁴, конкурентная аллель-специфическая полимеразная цепная реакция (ПЦР) (KASP) ²⁵ и расщепленные амплифицированные полиморфные последовательности (CAPS) ²⁶ или производные CAPS (dCAPS) ²⁷ .Среди них CAPS является наиболее простым, эффективным и экономичным методом для обнаружения SNP в лаборатории, особенно для частого и небольшого племенного отбора, тогда как KASP больше подходит для программы отбора большой популяции.

Традиционная селекция древесных декоративных питомников может быть значительно улучшена за счет использования молекулярных маркеров, связанных с представляющими интерес признаками. Ускоренное выведение новых сортов H. macrophylla напрямую помогает питомниководству, поскольку интерес потребителей частично обусловлен выпуском новых, новых растений.С этой целью мы разработали 5803 SNP для культивируемой панели H. macrophylla с использованием технологии GBS. Цель этого исследования состояла в том, чтобы (1) идентифицировать SNP, связанные с типом соцветия и ремонтантностью у H. macrophylla с помощью GWAS, и (2) преобразовать SNP, связанные с признаками, в удобные для лаборатории молекулярные маркеры для MAS гортензии.

Материалы и методы

Растительный материал и генотипирование

Всего 82 H.macrophylla сорта были включены в это исследование (таблица S1). Растения гортензии были собраны из общественных или коммерческих источников и содержались в 5- или 7-галлонных контейнерах в Исследовательском центре питомников Otis L. Floyd в Макминнвилле, Теннесси. Свежую ткань листа собирали непосредственно с растений в пробирку Эппендорфа на 2 мл с лизисным буфером и измельчали в гомогенизаторе FastPrep-24 ^™ 5G. Геномную ДНК выделяли из лизированной ткани с использованием набора DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen) с последующей обработкой РНКазой.Нуклеиновую кислоту оценивали в 1% агарозном геле и количественно определяли с использованием спектрометра (NanoDrop 2000, Thermo Scientific, Wilmington, DE). Генотипирование панели сортов гортензии проводили с помощью GBS, как описано Elshire et al. ²⁸ . В общей сложности 5803 высококачественных SNP, обнаруженных и описанных ранее ²⁹, были использованы для проведения полногеномного ассоциативного анализа в настоящем исследовании.

Анализ генетической и популяционной структуры

Структура населения была исследована с помощью СТРУКТУРЫ 2.ПО 3.0 с режимом примесей ³⁰ . Количество подпопуляций, K, было установлено от 1 до 10 с 100 000 выгоранием и 100 000 цепей Маркова Монте-Карло с 10-кратной итерацией. Выходные данные STRUCTURE оценивались в STRUCTURE HARVESTER ³¹ для определения наилучшего значения K на основе теста Эванно ³² . Филогенетическое исследование проводилось с использованием метода объединения соседей в MEGA 7 ³³ с использованием 500 бутстрепов для оценки узловых вероятностей.

Идентификация SNP, связанных с типом соцветия и ремонтантностью

Характеристика типа соцветия гортензии была основана на предыдущем исследовании, опубликованном Reed et al.⁹ с многолетними наблюдениями. Тип соцветия считался качественным признаком и классифицировался как кружевная шляпка (L) или мочалка (M; рис. 1). Только сорта с опубликованными свидетельствами ремонтантности считались ремонтантными; свободноцветущие сорта или сорта с эпизодической ремонтантностью не считались ремонтантными (таблица S1). Ремонтантность считалась качественным признаком и классифицировалась как ремонтантная (ДА) или неремонтантная (НЕТ).

Два вида соцветий Hydrangea macrophylla

Рис.1

a Соцветие кружевницы; b соцветие швабры. Фото: Л. Александер, 09 июня 2016 г., МакМиннвилл, Теннесси

Рис. 1

Два типа соцветий Hydrangea macrophylla

a Соцветие Lacecap; b соцветие швабры. Фото: Л. Александер, 09 июня 2016 г., МакМиннвилль, Теннесси

На основе отфильтрованных данных SNP был проведен анализ GWAS с использованием программного обеспечения TASSEL v5.0 с двумя моделями: общей линейной моделью (GLM) и смешанной линейной моделью (MLM). + Q, MLM, рассматривающий структуру населения (Q) и родство (K) как ковариаты.Порог значимости был установлен на уровне P ≤ 0,001 для ассоциаций маркер-признак, а затем скорректирован с использованием порога Бонферрони ( P ≤ 0,05/5803 = 8,7E ^-6) для уменьшения ложноположительных ассоциаций. Долю фенотипической изменчивости, объясняемой (PVE) каждым маркером, оценивали по соответствующему R ² . SNP, которые неоднократно выявлялись всеми моделями, считались высокодостоверными результатами GWAS.

Разработка и проверка маркера SNP с использованием подхода CAPS и GBS

SNP, подходящие для преобразования в маркеры CAPS, и соответствующие ферменты рестрикции были отобраны с помощью dCAPS Finder 2.027 ³⁴ . Специфические праймеры были разработаны с использованием DNASTAR ³⁵ . Последовательности праймеров следующие: GCTACAGCATACTGATTATCTCC (прямая) и TGGAGGTCTTAATGCTCATAGAA (обратная). Восемнадцать сортов H. macrophylla или селекционных образцов с определенным типом соцветия использовали для проверки CAPS-маркеров (таблица S2). Геномную ДНК вышеуказанных материалов экстрагировали из молодых листьев с использованием набора DNeasy Plant Mini Kit (Qiagen). ДНК разводили до конечной концентрации 50 нг/мкл для проверки методом ПЦР.Реакции ПЦР проводили в общем объеме 25 мкл, включая 12,5 мкл GoTaq Colorless Master Mix (Promega), по 1 мкл каждого праймера (10 мкМ/мкл), 2 мкл матричной ДНК и 8,5 мкл ddH ₂. O. Протокол ПЦР состоял из начальной денатурации при 94°C/3 мин, за которыми следовали 35 циклов 94°C/30 с, 57°C/30 с и 72°C/30 с, и, наконец, этап элонгации 72°C. °С/7 мин. Амплифицированные продукты ПЦР секвенировали для подтверждения сайта SNP и расщепляли эндонуклеазой рестрикции Bmg BI в соответствии с инструкциями производителя (New England Biolabs, NEB, USA).Продукты переваривания разделяли в 2% агарозном геле.

Кроме того, в общей сложности 341 потомство F ₁ от скрещивания сорта кружевной шляпки «Veitchii» и сорта швабры «Endless Summer» использовали для проверки ассоциации фенотип-генотип. Геномная ДНК была подготовлена и отправлена на GBS в соответствии с тем же протоколом, который указан выше. SNP вызывались через конвейер TASSEL UNEAK с использованием тех же параметров, которые описаны Ву и Александром ²⁹ . Тип соцветия (швабра или кружевная шляпка) исследовали на предмет ассоциации генотип-фенотип с использованием анализа хи-квадрат.

Применение SNP в MAS

Крупномасштабная MAS требует применения высокопроизводительной системы генотипирования для минимизации затрат и максимальной эффективности. С этой целью для MAS также были разработаны маркеры KASP-SNP. Недавно полученная популяция F ₂ [(«Veitchii» × «Endless Summer») × («Veitchii» × «Endless Summer»)], полученная от двух гетерозиготных потомков упомянутого выше скрещивания F ₁, была испытана в целях селекции. .Набор для выделения DNAeasy Plant Mini (Qiagen) использовали для выделения геномной ДНК в потомстве F ₂ в соответствии с инструкциями производителя набора. Концентрацию и качество образцов ДНК определяли на спектрофотометре NanoDrop2000 (Thermo Fisher Scientific) и проверяли в 1% агарозном геле. Затем образцы ДНК разбавляли до уровня, подходящего для генотипирования SNP (10 нг/мл ^-1 ), как это требовалось.

Последовательности длиной 100 п.н. с каждой стороны SNP были представлены для дизайна праймеров.Анализ генотипирования KASP включает мастер-микс KASP, содержащий распространенные флуоресцентные красители FAM и HEX, а также родамин X (ROX) в качестве пассивного эталонного фонового красителя. Смесь для анализа KASP и праймеры были разработаны и запущены компанией LGC Biosearch Technologies (Беверли, Массачусетс) с использованием платформы KASP по запросу ³⁶. Аллели SNP определяли с помощью программного обеспечения KlusterCaller ³⁷ .

Результаты

Генетическое разнообразие и структура популяции

Соседнее филогенетическое дерево, основанное на 5803 обнаруженных SNP, классифицировало 82 культивируемые гортензии на две основные клады в соответствии с их подвидовой категорией (рис. 2а). Шесть сортов из подвида serrata были сгруппированы как клада I (обозначена зеленым цветом). Сорта из подвида macrophylla сформировались в два субклада, названных кладами II и III (обозначены синим и красным соответственно). Структурный анализ выявил три популяции на панели сортов на основе теста Эванно (рис. 2б). Три группы (группы I–III) состояли из 6, 15 и 35 сортов соответственно (рис. 2в). В группу I вошли все шесть сортов из подвида serrata , соответствующих кладе I.Группа II и группа III состояли из всех культурных сортов подвида macrophylla , соответствующих кладам II и кладам III. Из них 15 сортов, входящих в группу II, соответствуют кладе II, а 35 сортов из остальных 91 003 макрофиллы 91 004 подвидов, входивших в кладу III, попадают в группу III.

Анализ популяционной структуры панели сортов Hydrangea macrophylla на основе 5803 SNP, разработанных GBS

Рис. 2

Каждое лицо представлено вертикальной чертой, отражающей вероятность отнесения к каждой из трех групп. Группа I: зеленые полосы; группа II: синие полосы; группа III: красные полосы. a Филогенетическое дерево, основанное на методе соединения соседей в MEGA 7; b график значения Δ K с K от 2 до 10 на основе теста Эванно; c Структура населения на основе анализа смешанной модели с использованием программного обеспечения STRUCTURE. Филогенетические исследования соответствовали группам популяционной структуры.подвид serrata (обозначен зеленым цветом) соответствует группе I, подвид. macrophylla разделены на две клады (окрашены синим и красным) и соответствуют группе II и группе III соответственно

Рис. 2 человек представлен вертикальной чертой, отражающей вероятность отнесения к каждой из трех групп. Группа I: зеленые полосы; группа II: синие полосы; группа III: красные полосы. a Филогенетическое дерево, основанное на методе соединения соседей в MEGA 7; b график значения Δ K с K от 2 до 10 на основе теста Эванно; c Структура населения на основе анализа смешанной модели с использованием программного обеспечения STRUCTURE. Филогенетические исследования соответствовали группам популяционной структуры. подвид serrata (обозначен зеленым цветом) соответствует группе I, подвид. macrophylla разделены на две клады (окрашены в синий и красный цвета) и соответствуют группе II и группе III соответственно

GWAS соцветийного типа и ремонтантности

Из 82 сортов гортензии 29 имели соцветия в виде шляпок, а 53 — соцветия в виде кружевных шляпок.В общей сложности 94 SNP были значительно связаны с типом соцветия в модели GLM, и они объясняли 22,3–65,5% вариаций типа соцветия гортензии на этой панели. Однако в модели MLM-Q было обнаружено, что только один SNP в значительной степени связан с типом соцветия, что объясняет 36,12% общей фенотипической изменчивости. Один SNP, обладающий полиморфизмом C/T, оказался общим SNP. Этот SNP также показал самый высокий PVE в обеих моделях (рис. 3).

Рис.Рис. 3 (GLM и MLM) в результате GBS-GWAS с 5803 SNP в Hydrangea macrophylla

Тринадцать сортов были классифицированы как ремонтантные на основании опубликованной информации (таблица S1). Всего с помощью GLM было обнаружено 23 SNP, что объясняет 23.1–33,7 % вариации ремонтантности. В MLM + Q для ремонтантности ниже обозначенного порога SNP выявлено не было (рис. 3).

Разработка и проверка маркера SNP

Один SNP, объясняющий самый высокий PVE для типа соцветия в двух моделях, был выбран для развития маркера. Чтобы разработать специфические маркеры CAPS, мы ввели несоответствие 0 в прямой или обратный праймер и выбрали обычные рестрикционные ферменты в качестве потенциальных кандидатов для разработки праймеров в этом исследовании.В результате был разработан маркер CAPS на основе фермента рестрикции Bmg BI (названный Hy_CAPS_Inflo ). В панель проверки были включены восемнадцать генотипов. Единственный фрагмент в 278 п.н. был получен из продукта ПЦР через панель проверки, что указывает на специфическую и стабильную амплификацию ПЦР. В расщепленном продукте ПЦР наблюдали два типа комбинаций полос. У гортензии кружевной шляпки ПЦР-фрагменты были расщеплены на две полосы размером 148 и 130 п.н. (неопределяемые из-за разницы в 21 п.н.) вместе с нерасщепленным продуктом ПЦР размером 278 п.н.Продукт ПЦР не был расщеплен у гортензий мопхед, показывая только одну полосу из 278 п.н. Две хорошо известные гортензии «Endless Summer» (шляпка, дорожка 9) и «Veitchii» (кружевная шапочка, дорожка 19) показали разные типы полос, как и ожидалось. Маркер CAPS, полученный из SNP, продемонстрировал 100% эффективность при идентификации типов соцветий швабры и кружевной шляпки в первой контрольной панели, состоящей из восемнадцати H . macrophylla сорта и селекционные образцы (рис. 4; таблица S2). Разработанный CAPS-маркер косегрегирован с типом соцветия у гортензии для всех образцов. Результаты секвенирования продуктов ПЦР подтвердили, что «Endless Summer» гомозиготна по аллелю T/T, а «Veitchii» гетерозиготна по аллелю C/T, с их двумя потомками F ₁ «0872-053» и «0872- 076» является гетерозиготным.

Рис. 4

Электрофорез в агарозном геле для непереваренных ( a ) и переваренных ( b ) маркеров CAPS ( Hy_CAPS_Inflo ). Дорожки 1–9 представляют 9 сортов H. macrophylla , а дорожки 10–18 представляют 9 сортов laccap H.сорта macrophylla . Дорожка 1 («Бесконечное лето») и дорожка 10 («Veitchii») были родителями потомства F ₁ на дорожке 17 (0872-053) и дорожке 18 (0872-076), которые использовались в качестве родителей F ₂ популяция

Рис. 4

Электрофорез в агарозном геле для непереваренных ( a ) и переваренных ( b ) маркеров CAPS ( Hy_CAPS_Inflo ) продуктов. Дорожки 1–9 представляют 9 сортов H. macrophylla , а дорожки 10–18 представляют 9 сортов laccap H.сорта macrophylla . Дорожка 1 («Бесконечное лето») и дорожка 10 («Veitchii») были родителями потомства F ₁ на дорожке 17 (0872-053) и дорожке 18 (0872-076), которые использовались в качестве родителей F ₂ популяция

Из 341 потомства F ₁ 316 использовали для сравнения фенотипа соцветия с генотипом. Всего 116 (36,71%) имели цветки мопхед и генотип Т/Т, 181 (57,28%) – кружевные цветки и генотип С/Т (табл. 1). Одиннадцать потомков показали несоответствие между их фенотипом и генотипом: 7 потомков кружевных шляпок имели генотип Т/Т и 4 потомства швабры имели генотип С/Т.Кроме того, 8 потомков кружевных шляпок имели генотип С/С. Классифицируя эти растения по типу соцветия, они разделились на 120 (38,0%) растений-швабр и 196 (62,0%) растений-кружевниц. SNP, вызванные из популяции F ₁ с помощью ГБС, показали 98,5% эффективность определения типа соцветия. Анализ хи-квадрат для разделения типа соцветия не подтвердил гипотезу о том, что тип соцветия контролируется одним рецессивным геном; однако значение хи-квадрат для ассоциации фенотип-генотип показало, что SNP-маркер Hy_CAPS_Inflo косегрегировал с типом соцветия в H. macrophylla (табл. 1).

Таблица 1

Распределение соцветий по типу кружевной шапочки и мопхеда в 316 потомствах F1, полученных от Hydrangea macrophylla «Veitchii» × H . macrophylla «Бесконечное лето» и соответствующие им генотипы SNP

Фенотип .	Генотип .			Итого .	χ ² значение .	Р .
.	К:К .	К:Т .	Т:Т .	.	.	.
Lacecap	8	181	7	196	18,28	0,000
Mophead	0	4	116	120	18,28	0,000
Итого	193		123		0. 12	0,728 ^б

девяносто одна тысяча триста девяносто-семь 0.12 девяносто одна тысяча триста девяносто-семь 0,728 ^{девяносто одна тысяча триста девяносто-семь б}

Фенотип .	Генотип .			Итого .	χ ² значение .	Р .
.	К:К .	К:Т .	Т:Т .	.	.	.
Lacecap	8	181	7	196	18,28	0,000
Mophead	0	4	116	120	18,28	0,000
Итого	193		123

+ Таблица 1

Сегрегация lacecap и mophead типа соцветия в 316 F1 потомств, полученных из гортензия крупнолистная «Veitchii» × H . macrophylla «Бесконечное лето» и соответствующие им генотипы SNP

Фенотип .	Генотип .			Итого .	χ ² значение .	Р .
.	К:К .	К:Т .	Т:Т .	.	.	.
Lacecap	8	181	7	196	18,28	0,000
Mophead	0	4	116	120	18,28	0,000
Итого	19398		193		123		0.12	0,728 ^B

Фенотип .	Генотип .			Итого .	χ ² значение .	Р .
.	К:К .	К:Т .	Т:Т .	.	.	.
Lacecap	8	181	7	196	18.28	0.000
Mophead	0	4	116	120	18.28	0.000
Итого	193		123		0,12	0,728 ^б

Маркерная селекция с использованием генотипирования KASP

Недавно разработанная популяция F ₂ [(«Veitchii» × «Бесконечное лето») × («Veitchii» × «Бесконечное лето»)] использовалась для исследования сегрегации обнаруженного локуса SNP, а также для селекции признаков. Из 73 потомков F ₂, которые были проверены на тип соцветия с помощью маркера KASP-SNP, 70 были успешно генотипированы, что привело к частоте вызовов 95,9% (рис. 5). У трех потомков не было успешного определения аллеля, и они были исключены из дальнейшего анализа. Семнадцать потомков были гомозиготными рецессивными, представляющими генотип Т/Т (красные), тридцать девять были гетерозиготными, представляющими генотип С/Т (зеленые), и четырнадцать были гомозиготными доминантными, представляющими генотип С/С (синие).Локус SNP сегрегировался в соответствии с ожидаемым соотношением 1:2:1. Выявлено, что три четверти потомства относятся к генотипу кружевницы.

Диаграмма генотипа для

Hy_CAPS_Inflo с использованием платформы KASP по требованию (KOD) для 73 F ₂ потомства от двуродительской племенной популяции, двух родителей F ₁ и контроля без шаблона

Рис. 5

Три генотипа (Т:Т, С:Т и С:С) наблюдались у 17, 39 и 14 потомков

Рис.5

Диаграмма генотипа для Hy_CAPS_Inflo с использованием платформы KASP по запросу (KOD) для 73 F ₂ потомства от двуродительской племенной популяции, двух родителей F ₁ и контроля без шаблона

Три генотипы (T:T, C:T и C:C) наблюдались у 17, 39 и 14 потомков

Обсуждение

H. macrophylla представляет собой вид с двумя уровнями плоидности, диплоидным и триплоидным ³⁸ . Размер диплоидного генома составляет около 2.0 Гб с высоким уровнем гетерозиготности ³⁹ . Отсутствие геномной информации препятствует проведению молекулярно-генетического анализа гортензии и развитию селекции, особенно изучению молекулярных маркеров, связанных с признаками. На сегодняшний день маркеры SSR по-прежнему являются наиболее популярным типом молекулярных маркеров в программах селекции гортензий, но их полезность по-прежнему ограничена низким количеством маркеров ⁴⁰ . В последнее время большое количество SNP было разработано с использованием технологии GBS для текущих геномных и селекционных приложений гортензии ²⁹ .

GWAS — это мощный инструмент для идентификации генетических локусов и генов-кандидатов, ответственных за естественную изменчивость признаков садоводства. GWAS часто требует высокой плотности маркеров, больших размеров популяции и соответствующих статистических моделей ⁴¹ . Однако производительность GWAS также зависит от многих факторов, таких как виды растений, платформа для анализа и генетическая природа целевых признаков ¹⁵ . GWAS, проведенный на 1580 образцах персика, не смог определить гены-кандидаты, связанные с качественными признаками, но в более позднем исследовании на 129 образцах персика удалось определить ²² .Основной локус SNP был связан с устойчивостью к заболачиванию на панели из 88 образцов хризантем и использовался для дальнейшей селекции ¹⁵ . GWAS также были успешно проведены на каноле ⁴¹ и розе ⁴² с использованием небольших популяций, содержащих менее 100 образцов. Здесь GWAS был выполнен на 82 образцах гортензии, и был идентифицирован основной локус SNP, связанный с типом соцветия, который, как известно, находился под контролем одного гена ⁸ .Успех текущего исследования также демонстрирует возможность выполнения GWAS на относительно небольшой панели при определенных условиях, таких как достаточная плотность маркеров и предварительная информация о генетической природе целевых признаков.

Статистическая модель также является ключевым компонентом, влияющим на мощность GWAS. В GLM было идентифицировано 94 локуса SNP, связанных с типом соцветия с PVE в диапазоне от 22,27 до 65,51%. По сравнению с GLM, статистическая модель MLM позволяет значительно сократить количество ложно связанных SNP, при этом только один SNP идентифицируется из 36.12% ПВЕ. Двадцать три локуса SNP были идентифицированы в GLM, но ни один из них не был обнаружен в модели MLM. Как и ожидалось, MLM был более строгим, чем GLM для многих других декоративных культур ^15,22,43 . Среди этих SNP в обеих моделях был обнаружен только ведущий SNP, связанный с типом соцветия. Учитывая генетическую природу этого конкретного признака, ассоциированный локус SNP был преобразован в маркеры на основе ПЦР для дальнейшей проверки, а также отбора молекулярных маркеров при селекции гортензий.

Проверка маркера SNP с использованием методов на основе ПЦР и GBS показала 100% эффективность идентификации в валидационной панели и 98,47% эффективность идентификации в популяции F ₁ соответственно (рис. 4, таблица 1). Существует несколько возможных объяснений несоответствия генотипа и фенотипа у одиннадцати потомков F ₁. Что касается аспекта генотипирования, GBS представляет собой технологию поверхностного секвенирования, направленную на обнаружение SNP по всему геному с помощью инструментов биоинформатики.Ошибки могут возникать как в процедурах секвенирования, так и в процедурах вызова SNP. У пшеницы четыре SNP, обнаруженные GBS во время картирования QTL прорастания перед сбором урожая, не показали тех же результатов при проверке с помощью генотипирования KASP-SNP, вместо этого показав ошибку секвенирования или определения SNP в 1,35% в GBS ⁴⁴ . Возможна также ошибка фенотипирования при определении типа соцветия. Ключевым определением гортензии мотыльковой и кружевной является соотношение и расположение эффектных чашелистиков и недекоративных цветков, но не во всех случаях это явно различимо.Например, сорт H. macrophylla Uzu Azisai (также известный как Ayesha) дает соцветия в виде головки швабры, которую часто путают с кружевной шляпкой из-за множества маленьких цветков и отсутствия больших эффектных чашелистиков. Кроме того, популяция F1 могла содержать триплоиды из-за нередуцированного образования гамет у родителей ⁴⁵ . Присутствие триплоидов в популяции F1 было связано с асимметричными коэффициентами сегрегации ⁴⁶ . Наконец, несоответствие генотипа и фенотипа может быть связано с базовой методологией GBS.GBS представляет собой метод генотипирования с уменьшенным представлением, который не позволяет получить последовательность всего генома ²⁸ . Даже если значимый SNP тесно связан с причинным геном, все еще существует вероятность того, что может произойти рекомбинация между геном и маркером.

Несмотря на то, что сегрегация в популяции F ₁ не подтверждала соотношение 1:1 между типами соцветий швабра и кружевная шляпка, тест хи-квадрат показал, что SNP-маркер Hy_CAPS_Inflo совместно сегрегировался с типом соцветия в F ₁ населения.Однако наследственность этого конкретного SNP соответствует соотношению 1:2:1 в недавно созданной популяции F ₂, полученной из двух гетерозиготных потомков F ₁ (рис. 5). Причина асимметричной сегрегации в популяции F ₁ не ясна. Нарушение сегрегации наблюдалось у многих других растений, но основной механизм до конца не ясен ⁴⁷ . Хромосомная транслокация, конкуренция между гаметами и наследование аллелей, влияющих на жизнеспособность зиготы, эмбриона или проростка, — все это возможные причины искажения сегрегации, но преднамеренный или непреднамеренный отбор является наиболее важным фактором в программах разведения ^48,49 .

Сообщалось, что соцветие мопса является рецессивным признаком, контролируемым одним рецессивным геном, расположенным в группе сцепления 4 ^8,50 . Несмотря на то, что известно мало информации о физиологических и генетических механизмах, вызывающих фенотип швабры, GWAS и сегрегация обнаруженных SNP в популяции F ₂ действительно подтверждают гипотезу о том, что появление фенотипа швабры является скорее качественным, чем количественным. изменение в H.macrophylla , предложенный Uemachi и Okumura ⁸ . Та же исследовательская группа предложила вставку длинного терминального повторного ретротранспозона в локус, контролирующий тип соцветия, в результате наблюдения за мутацией сорта гортензии кружевной, но такой вывод нельзя было связать с текущим исследованием из-за ограниченной геномной информации. . Хотя о генетических маркерах, связанных с типом соцветия крупнолистной гортензии, сообщалось ранее ^46,50 , единственный обнаруженный и использованный здесь маркер имеет преимущества для использования в MAS.Ранее опубликованные маркеры должны использоваться в комбинации для селекции с помощью маркеров, в то время как описанный здесь SNP можно использовать отдельно. Кроме того, SNP могут быть преобразованы в высокопроизводительные маркерные системы для селекции в очень больших популяциях. Необходимы дальнейшие исследования, такие как построение карты генетического сцепления высокой плотности, секвенирование всего генома и анализ экспрессии генов, чтобы выявить гены, связанные с этим конкретным признаком.

Двадцать три SNP были обнаружены как связанные с реконструкцией с использованием GLM, но ни один из них не был обнаружен с помощью MLM.Возможные причины включают, помимо прочего, небольшой размер популяции, отсутствие фенотипической изменчивости и строгие требования MLM к качественным признакам ⁵¹ . Однако наиболее вероятной причиной является неполное понимание ремонтантности в сочетании с историей плохого фенотипирования, что привело к неоднозначным сообщениям о том, является ли сорт ремонтантным, свободноцветущим, обоими или ни тем, ни другим. Ремонтантность как важный признак H. macrophylla наблюдается и изучается почти два десятилетия ⁵² . Однако мало что было сделано для понимания генетической природы этой черты. Разделение ремонтантных и неремонтантных потомков в недавно развившейся размножающейся популяции указывает на то, что ремонтантность наследуется рецессивно (неопубликованные данные). В настоящем исследовании неремонтантные гортензии характеризовались одиночной россыпью соцветий на старой древесине, тогда как ремонтантные гортензии цветут как на старой древесине, так и на новом приросте. Однако наблюдался и третий фенотип: некоторые сорта непрерывно цвели на старой древесине.У этих сортов цветочные почки, заложенные прошлой осенью, не раскрывались одновременно, а раскрывались индивидуально в течение вегетационного периода. Эти сорта могут быть ошибочно идентифицированы как ремонтантные, если фенотипирование состоит из подсчета новых соцветий в течение вегетационного периода без удаления прироста предыдущего сезона или указания места цветения (например, ^53,54 ). Подобные фенотипы также наблюдались у карликовой сирени, где наблюдалась неполная и нестабильная ремонтантность (полуремонтантность), и было обнаружено, что двухгенная модель лучше соответствует наблюдаемому фенотипическому коэффициенту сегрегации, чем одногенная модель ⁵⁵ . Коэффициенты сегрегации, которые соответствуют модели с двумя генами, не были проверены на гортензии, поскольку полуремонтантность не рассматривалась как индивидуальный фенотип. Для будущих исследований необходимы более строгие усилия по фенотипированию, чтобы выяснить генетическую природу ремонтантности у гортензии.

Традиционная селекция гортензий для улучшения свойств занимает не менее двух лет, прежде чем можно будет отобрать, клонировать и оценить многообещающие растения в больших количествах. Время выхода на рынок новых сортов можно значительно сократить за счет определения молекулярных маркеров, связанных с определенными признаками.В настоящем исследовании SNP, связанный с типом соцветия, был идентифицирован и преобразован в маркеры CAPS и KASP-SNP для отбора малых и больших популяций H. macrophylla . Тип соцветия был определен со 100% точностью с использованием маркера CAPS на валидационной панели. Генотипирование KASP-SNP показало, что 76% потомков в селекционной популяции F ₂ продуцировали соцветия кружевницы. Эти растения могут быть выброшены как саженцы перед дальнейшей оценкой контейнера или поля в рамках программы селекции, нацеленной на тип соцветия мотылька.Кроме того, разработанные здесь маркеры SNP будут полезны для понимания биологических механизмов, лежащих в основе архитектуры соцветия, поскольку станут доступны улучшенные ресурсы генома гортензии.

Выводы

Большое количество SNP, разработанных с помощью GBS, было использовано для выполнения GWAS для исследования генетического контроля типа соцветия и ремонтантности у H . макрофилла . Две статистические модели идентифицировали локус SNP, тесно связанный с типом соцветия гортензии.Этот конкретный локус SNP ( Hy_CAPS_Inflo ) был преобразован в маркеры CAPS-SNP и KASP-SNP, которые будут полезны для MAS в программах селекции гортензий. Несмотря на то, что в двух имитационных моделях не было идентифицировано ни одного SNP, связанного с ремонтантностью, была получена информация для дальнейшего генетического изучения ремонтантности у гортензии.

Благодарности

Авторы хотели бы поблагодарить Тима Райнхарта, Аманду Халс-Кемп, Кэрри Уитчер и Бенджамина Мура за неоценимую техническую поддержку.Два анонимных рецензента внесли свой вклад, который значительно улучшил рукопись. Упоминание товарного знака, запатентованного продукта или поставщика не является гарантией или гарантией продукта со стороны Министерства сельского хозяйства США и не означает его одобрения, за исключением других продуктов или поставщиков, которые также могут быть подходящими.

Вклад авторов

Лос-Анджелес задумал эксперимент, собрал и подготовил образцы. Анализ данных и подготовка статьи были проведены X.WLA рассмотрел документ. Все авторы прочитали и одобрили окончательную статью.

Конфликт интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Каталожные номера

Дирр

БЛ

Гортензии для американских садов

(

2004

)

Portland

Timber Press

.2.

Макклинток

Монография рода Hydrangea

Proc Calif. Acad. науч.

147

–

256

(

1957

).3.

Ван Гельдерен

D M

. (eds)

Энциклопедия гортензий

(

Timber Press

2004

).4.

Ороско-Обандо

Hirsch

Wetzstein

Генотипическая изменчивость индукции и развития цветков у Hydrangea macrophylla

Хортик. науч.

(

2005

)

1695

–

1698

.5.

мА

Hiradate

Nomoto

Iwashita

Matsumoto

Механизм внутренней детоксикации Al в гортензии (идентификация формы Al в листьях)

Физика растений.

(

1997

)

113

1033

–

1039

.6.

Адкинс

Дирр

МА

Ремонтантный потенциал цветения десяти Hydrangea macrophylla (Thunb.) Ser. сорта

Хортик. науч.

(

2003

)

1337

–

1340

.7. .

Молекулярная оценка ремонтантных (повторно цветущих) Hydrangea macrophylla сортов

Дж. Окружающая среда. Хортик.

(

2003

)

–

.8.

Уэмати

Окумура

Наследование типов соцветий у Hydrangea macrophylla

J. Jpn. соц. Хортик. науч.

(

2012

)

263

–

268

.9.

Рид

СМ

Райнхарт

ТА

Маркер простого повтора последовательности анализ генетических взаимоотношений в пределах Hydrangea macrophylla

Дж. Ам. соц. Хортик. науч.

(

2007

)

132

341

–

351

.10.

Черный

V G

Растение гортензии «Бейлмер»

. Патент США PP15,

298

(

2004

).11.

CHEN

Jiang

Thammannagowda

Liang

Wildle

Характеристика TFL1 персика и сравнение с FT/TFL1 семейств генов Rosaceae

Дж. Ам. соц. Хортик. науч.

(

2013

)

138

–

.12.

McCouch

и др.

Разработка полногеномных анализов SNP для риса

Порода. науч.

(

2010

)

524

–

535

.13.

Ву

Блэр

МВт

Разнообразие зерна амарантов и родственников, выделенное путем генотипирования путем секвенирования (GBS)

Фронт. Растениевод.

(

2017

)

1960

5698268 .14.

Яги

Недавний прогресс в геномном анализе декоративных растений с акцентом на гвоздику

Хортик. J.

(

2015

)

–

.15.

и др.

Полногеномное ассоциативное исследование выявляет благоприятные аллели SNP и гены-кандидаты для устойчивости к заболачиванию у хризантем

Хортик. Рез.

(

2019

)

6355785 .16.

Raymond

и др.

Геном Rosa позволяет по-новому взглянуть на одомашнивание современных роз

Нац. Жене.

(

2018

)

772

–

777

5984618.17.

Suzuki

Tasaki

Yamagishi

Две отдельные спонтанные мутации, связанные с развитием белых цветков у Lilium speciosum

мол. Порода.

(

2015

)

193

18.

Тан

и др.

Генетическое разнообразие и структура в коллекции сортов тюльпанов, оцененных с помощью маркеров SNP

науч. Хорт.

(

2013

)

161

286

–

292

.19.

Myles

и др.

Картирование ассоциаций: критический переход от генотипирования к экспериментальному дизайну

Растительная клетка

(

2009

)

2194

–

2202

2751942 .20.

Рафальский

Ассоциация генетиков по улучшению сельскохозяйственных культур

Курс.мнение биол. растений

(

2010

)

174

–

180

.21.

Сент-Оян

и др.

Высококачественная последовательность генома Rosa chinensis для выявления декоративных признаков

Нац. Растения

(

2018

)

473

.22.

Cao

и др.

Полногеномное ассоциативное исследование 12 агрономических признаков персика

Нац. коммун.

(

2016

)

5105138 .23.

Бертен

Чжу

Гейл

SSCP-SNP в африканском просе — новая система маркеров для сравнительной генетики

Теор. заявл. Жене.

(

2005

)

110

1467

–

1472

.24.

Леменсик

Сазерленд

МВт

Макнамара

РБ

Использование плавления с высоким разрешением (HRM) для картирования однонуклеотидных маркеров полиморфизма, связанных с скрытым геном устойчивости к головне ячменя

Теор. заявл. Жене.

(

2008

)

117

721

–

728

.25.

Semagn

Babu

Hearne

Olsen

M 90.

Генотипирование однонуклеотидного полиморфизма с использованием конкурентной аллель-специфической ПЦР (KASP): обзор технологии и ее применения для улучшения сельскохозяйственных культур

мол. Порода.

(

2014

)

–

.26.

лей

и др.

Разработка CAPS-маркеров и аллель-специфических праймеров для ПЦР у цитрусовых

Акта Хортик. Грех.

1027

–

1034

(

2012

).27.

Лестари

Ко

Разработка новых маркеров CAPS/dCAPS и SNAP для пищевых качеств риса

Hayati J. Biosci.

(

2013

)

–

.28.

Элшир

и др.

Надежный и простой подход генотипирования путем секвенирования (GBS) для видов с большим разнообразием

PLoS ONE

(

2011

)

3087801 .29.

Ву

Александр

ДВ

Анализ генетического разнообразия и структуры популяции крупнолистной гортензии с использованием генотипирования путем секвенирования

Дж. Ам. соц. Хортик. науч.

(

2019

)

144

257

–

263

.30.

Причард

Дж.К.

Стивенс

Доннелли

Вывод о структуре популяции с использованием данных о многолокусных генотипах

Генетика

(

2000

)

155

945

–

959

10835412.31.

Эрл

Д.А.

Structure Harvester: веб-сайт и программа для визуализации выходных данных структуры и реализации метода Эванно

Консерв. Жене. Ресурс.

(

2012

)

359

–

361

.32.

Эванно

Regnaut

Goudet

Определение количества групп людей с помощью структуры программного обеспечения: имитационное исследование

мол. Экол.

(

2005

)

2611

–

2620

.33.

Кумар

Стечер

Тамура

MEGA7: молекулярно-эволюционный генетический анализ версии 7.0 для больших наборов данных

мол. биол. Эвол.

(

2016

)

1870

–

1874

27004904 .34.

Нефф

ММ

Турок

Калишман

Веб-дизайн праймера для анализа однонуклеотидного полиморфизма

Тенденции Жене.

(

2002

)

613

–

615

.35.

Бурланд

ТГ

. Программное обеспечение для анализа последовательностей DNASTAR Lasergene. в

Методы и протоколы биоинформатики

(eds

Misener

Krawetz

)

–

. (

Humana Press

Тотова, Нью-Джерси

1999

).36.

Холм

Энтони

. Генотипирование SNP: анализ KASP.В

Crow Разведение

(EDS

Fleury

Whitford

)

—

(

Humana Press

New York, NY

2014

) .

37.

Геномика

LGC

Программное обеспечение KlusterCaller

(

LGC Genomics

Herts, UK

2017

).38.

Джонс

КД

Рид

СМ

Райнхарт

ТА

Анализ уровня плоидности и его влияния на длину замыкающих клеток, диаметр пыльцы и фертильность у Hydrangea macrophylla

Хортик. науч.

(

2007

)

483

–

488

.39.

Cerbah

и др.

Изменчивость размера генома и родство видов в роде Hydrangea

Теор. заявл. Жене.

(

2001

)

103

–

.40.

Rinehart

Wadl

Staton

Обновленная информация о целях разведения Hydrangea macrophylla и геномике

Акта Хортик.

(

2018

)

1191

217

–

224

.41.

Чжан

и др.

Идентификация предполагаемых генов-кандидатов устойчивости к водному стрессу у канолы ( Brassica napus )

Фронт. Растениевод.

(

2015

)

1058

4661274.42.

Schulz

и др.

Общегеномный ассоциативный анализ содержания антоцианов и каротиноидов в лепестках роз

Фронт. Растениевод.

(

2016

)

1798

5138216 .43.

и др.

Метод унифицированной смешанной модели для сопоставления ассоциаций, учитывающий несколько уровней родства

Нац. Жене.

(

2006

)

203

–

208

.44.

Лин

и др.

Генотипирование путем секвенирования (GBS) идентифицировал SNP, тесно связанные с QTL для устойчивости к прорастанию до сбора урожая

Теор. заявл. Жене.

(

2015

)

128

1385

–

1395

.45.

Александр

Производство триплоидов Hydrangea macrophylla путем разведения нередуцированных гамет

Хортик. науч.

(

2017

)

221

–

224

.46.

Tränkner

и др.

Быстрая идентификация маркеров типа соцветия путем генотипирования путем секвенирования диплоидных и триплоидных растений F1 Hydrangea macrophylla

БМС Жене.

(

2019

)

6651981 .47.

CAI

CHENG

Zhong

LIU

Первое построение генетической карты высокой плотности для пиона древовидного ( Paeonia Sect. Moutan ) с использованием генотипирования путем секвенирования амплифицированных фрагментов специфического локуса

PloS ONE

(

2015

)

4444326 .48.

Lashermes

и др.

Карта генетического сцепления Coffea canephora : эффект искажения сегрегации и анализ скорости рекомбинации в мужских и женских мейозах

Геном

(

2001

)

589

–

595

.49.

Ли

Бай

Чао

Ван

Консенсусная карта SNP и SSR высокой плотности показывает области искажения сегрегации в пшенице

Биомед. Рез.

(

2015

)

2015

830618

.50.

Waki

и др.

Разработка ДНК-маркеров, связанных с признаками махровых цветков и гортензий у Hydrangea macrophylla (Thunb.) Ser

Хортик. J.

(

2018

)

264

–

273

.51.

Хуан

и др.

Полногеномные ассоциативные исследования 14 агрономических признаков стародавних сортов риса

Нац. Жене.

(

2010

)

961

.52.

Адкинс

J A

Дирр

Оценка сортов Hydrangea macrophylla на ремонтантность цветения и холодостойкость

(

Центр прикладных исследований питомников при Университете Джорджии

2000

).53.

Бир

Р Е

Коннер

Дж Л

Гортензии ремонтантные?

Проц. Междунар. Размножитель растений Soc.

524

–

526

(

2002

).54.

Рид

СМ

Цветение 21 сорта Hydrangea macrophylla

Дж. Окружающая среда. Хортик.

(

2002

)

155

–

.55.

Контрерас

Чен

Латье

Вининг

3 K

3 .
Два snps, идентифицированных с помощью GBS, связаны с повторным цветением карликовой сирени
.
Проц. Юг. Нурс.доц. Рез. конф.
63
,
7
–
10
(
2019
).
© The Author(s) 2020
Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution (https://creativecommons. org/licenses/by/4.0/), которая разрешает некоммерческую повторное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего цитирования оригинальной работы. Для коммерческого повторного использования, пожалуйста, свяжитесь с journals.permissions@oup.ком
Корень гортензии — Первые китайские травы
Корень гортензии — Первые китайские травы значок-звездастрелкатележкаленивый-стрелкапоискзакрытьгамбургеруточнитьfacebookflickrgoogle-plusinstagramkickstarterlinkedinmailpinterestprintspotifystumbleupontumblrtwittervimeovineyoutubeicon-visaicon-mastercardicon-американский-экспрессicon-discovericon-paypalicon-apple-paylockplus Домой > Травы от А до Я > ЧАС > корень гортензии
Общие названия: ROOD GRADNGEA, семи кора, дикая гортензия
Ботаническое название: Botangea Arborescens
Китайский / PIN-код Инь Имя: TU CHANH SHAN
ROOSAGE DOZAGEEA : Проконсультируйтесь с вашим поставщиком здравоохранения для вашего правильного доза.
Корень гортензии Меры предосторожности: Не использовать во время беременности или кормления грудью.
Преимущества и информация о корнях гортензии
Корень гортензии — это традиционное лекарственное растение коренных народов Северной Америки и Китая, которое способствует диурезу, помогает при калькулезных заболеваниях и очищает кровь. Корень гортензии поддерживает здоровье мочевыводящих путей, почек и предстательной железы. Оказывает обезболивающее, вяжущее, мочегонное, тонизирующее и слабительное действие.
Корень гортензии Природные компоненты: алкалоиды, сапонины, кверцетин, кемпферол, камедь, сахар, крахмал, альбумин, сода, известь, калий, магнезия, серная кислота, фосфорная кислота, эфирное масло
Ссылки
https://www.Organicfacts.net/hydrangea-root.html, https://herbpathy.com/Uses-and-Benefits-of-Hydrangea-Arborescens-Cid2508, http://www.botanical.com/botanical/mgmh/h/hydran45. html
ОТКАЗ ОТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ: Этот веб-сайт предназначен только для информации. Его нельзя использовать для диагностики, лечения, лечения или вместо медицинского наблюдения. Проконсультируйтесь с вашим врачом-натуропатом или медицинским работником. FDA не оценивало это заявление, и эти продукты не предназначены для профилактики, лечения или смягчения последствий заболевания.Использование и дозировка продуктов: FDA в настоящее время ограничивает заявления о функциях трав или добавок. Травы, которые мы продаем, являются биологически активными добавками, предназначенными для дальнейшей обработки (чай, настойка, отвар, припарка, компресс, промывание глаз или инкапсуляция). Мы не можем законно или этически предоставлять медицинскую информацию, включая информацию о традиционных функциях, в этом интернет-магазине. Пожалуйста, проконсультируйтесь с вашим местным квалифицированным травником или надежными справочными руководствами для традиционных показаний и функций этих трав, а также дозировки и приготовления.Во многих штатах иглотерапевтам разрешено назначать эти травы в качестве лекарств. Регламент FDA: Руководящий документ по существу определяет любой предмет, используемый для лечения, смягчения последствий, излечения или предотвращения заболевания, как это регулируется FDA. Все цены на этом веб-сайте могут быть изменены без предварительного уведомления. Несмотря на то, что мы прилагаем все усилия, чтобы предоставить вам самую точную и актуальную информацию, иногда цена на один или несколько товаров на нашем веб-сайте может быть указана неверно. В случае, если продукт указан по неверной цене из-за типографской, фотографической или технической ошибки или ошибки в информации о ценах, полученной от наших поставщиков, 1stChineseHerbs.com имеет право отклонить или отменить любые заказы, размещенные на товары, указанные по неверной цене.
&&
Hydrangea nga dako ang dahon nga Yu & Mi Love: pagtanum ug pag-atiman, mga pagsusi — Pagpananom
Hydrangea nga dako ang dahon nga Yu & Mi Love: pagtanum ug pag-atiman, mga pagsusi — Pagpananom
Содержание:
Гортензия Ю и Ми Любовь США ка первоначальный куст са булак нга адунай США ка романтиконг нгалан, нга mahimong hubaron нга «gihigugma namon ang matag usa. » Nagpakita kini sa taas nga pagpamulak, aron mapadayon kung diin igo na aron makahatag регулярные nga pagpainum ug подкормки.
Paghulagway sa Hydrangea Yu & Mi Love
Ang Hydrangea Yu & Mi Love usa ka kanunay nga tanum nga kahoy nga naghatag puti, rosas или светло-фиолетовый nga bulak (диаметр 3 см). Пунона nga nagdala са bulak motubo са ka gamay nga gitas-on nga 15 cm, ug ang sapinit moabut са 80-150 cm.Дагко дальний, чистый, насыщенный зеленый цвет.
Гортензия «Ты и я, любовь» добавлена в последний раз. Kini nagpasabut нга siya naghatag мга bulak са мга саха са katapusan уг карон нга tuig. Labut pa, angpamiyuos molungtad sa bug-os nga panahon — gikan sa Hunyo hastedtod Septyembre (в том или ином регионе, когда вы находитесь в mainit nga tingdagdag — hangtod sa pagsugod sa Oktubre). Этот булак макита на сатуиге на цветке, диин лаби гипасаламатан в хардинеро кининга декоративном кустарнике.

Хинунгданон! Гортензия гортензии с Ю и Ми Любовь делает его таким, как щелочные и кислые воды. Sa ulahi nga kaso, другой насыщенный цвет (розовый или лиловый оттенок).
Цветок гортензии Ю и Ми Лав, собранный в соцветие лунго
Dako ang dahon nga Hydrangea You and Me Love в большом количестве
Hydrangea Yu & Mi Love adunay usa ka hataas nga kantidad sa pangadekorasyon tungod sa lunhaw, madanihon nga ga ug dako nga itom nga berde nga mgMahimo kini gamiton sa us aka ug sagol nga посадки. Ю и Ми Любовь может быть и хитсура на букетах из всех стран мира, на лужайке, покрытой балая или в даплин в далан.
Цветок танума гигамит в миксбордере, состав на любой цвет и танум многолетник. Один из самых красивых кораллов в США. Sa kini nga kaso, саженец gitanum са США ка минимальный nga gilay-on (80 cm) ug maingat nga giputol, nag-amping aron mapadayon ang usa ka kanunay nga porma.

Гортензия Ю и Ми Лав может быть использована для живой изгороди
Любовь к гортензии с гортензией Ю и Ми Любовь
Любовь к гортензии Ю и Ми Любовь к средней скорости загрузки. Наг-gwanta kini са kasarangan нга мороза са tingtugnaw Hangtod са -23 градусов. Busa, ang ingon nga mga rehiyon haom kaayo alang sa pagpananom:
tunga nga linya;
Регион по Волге;
Черноземье;
В России.
Ang Northwest dili kaayo angay ug dili girecomenda alang sa pag-uma sa Урал, Сибирь и Дальний Восток.
Хинунгданон! Tungod Kay tingtugnaw mahimo nga dili matag-an, гортензия Yu ug Mi Love, а также tingtugnaw kinahanglan nga mahinlo. Уг анг батан-онг punla dugang nga gitabunan са агроволокна.
Продажа саженцев гортензии и гортензии
Рассада гортензии из Ю и Ми Лав продается в питомнике или специализированном магазине. Dugang па, са kadaghanan nga kaso, анг-посадки nahimo са tingpamulak (Abril).Bisan kung sa pag-landing tingdagdag sa tingdagdag gitugotan (sayo sa Oktubre).

Pagpili ug pag-andam посадочной площадки
Kung nagpili ka us aka lugar, daghang mga nga praktikal nga rekomendasyon ang kinahanglan hunahunaon:
Gipalabi sa Hydrangea Yu & Miay Love angmas hamago hayag nga, большой выбор siya’g бахин нга ландонг. Gitugotan usab анг гамай нга земли на посадке в чужой стране в разных регионах.
Дили ка magtanum США ка sapinit са tupad са kahoy нга mosuhop са daghang likido, tungod кай анг kakulang са kaumog makaapekto са pagdako.
Sa laing bahin, dili gitugotan ang pagtigum sa kaumog — mas maayo nga magpili ka gamay nga mga pagtaas.
Kung mahimo, ang yuta kinahanglan adunay reaksyon sa asido (label taas nga pH = 5.0). В некоторых случаях гортензия может иметь нейтральную окраску, а также щелочную среду с pH = 8,0 или в любом случае.
Gipalabi са lainlaing lahi ang mga tabunok nga yuta. Busa, сапропели на юту, абоно kinahanglan iupod в составе niini.Лабиринт kaayo nga kapilian mao анг usa ka sagol, nga kauban ang листовой земли, торфа и balas. Соотношение сторон 2: 1: 1.
Кунг-наг-андам на посадочной площадке с гортензией Ю и Ми Лав, kinahanglan nimo nga pag-ayo nga pagkalot ang yuta ug limpyohan kini sa mga basura
Лагда са посадки
Kasagaran nga teknolohiya sa pag-landing:
Pagkahuman sa pag-andam sa site, pagkalot sa gagmay nga lungag sa parehas nga diametro ug taas nga 30 cm.
Kung daghang кусты natanum, pagbiya sa usa ka gilay-on nga 1 м, tungod kay kini motubo nga ingon kadagan. Куст имеет вид изгороди на расстоянии 80 см.
Саженец в Ю и Ми Любовь nakagamot са тунга и gisablig и yuta арон из всех, что magpabilin са ibabaw са навонг.
Daghang gipainum (1-1,5 нга балде матаг сапинит).
Pagpainum ug pagpakaon
Angang nga pag-atiman са кустарника яно ра.Gikinahanglan nga ipainum kini samtang ang yuta nagmala:
kung wala’y ulan matag semana;
са пресенся са улан — дили канунай;
sa kaso sa dugay nga hulaw 2 beses sa usa ka semana.
Цена на трубку 1 куст США ка 1,5-2 нга balde.
Kanunay nga gipakaon alang sa mabungahon nga pagpamulak:
Sa pagsugod sa ting-init, slurry, lasaw sa tubig 10 ka beses ug komplikado nga Mineral nga abono.
Exaktong parehas nga komposisyon gihatag pagkahuman sa 2 ka semana.
В южную пору, содержащую суперфосфат (70 г мата на 1 м2), мкг сульфата калия (40 г мата на 1 м2).
У США ка parehas nga composisyon gihatagan 2 pa ka beses — в katapusan sa Hulyo ug sa tunga-tunga sa Agosto, pagkahuman gihunong na ang pagpakaon.
Приятно! Все, что вам нужно, это гортензия Ю и Ми Любовь, которая очень похожа на чередующиеся минеральные и органические вещества.
Обрезка Ikaw ug Ako Gihigugma Hydrangea
Связано с тем, чтобы помочь вам избавиться от почки, чтобы избавиться от почки.Получите нашу стрижку, как и в любой другой одежде:
Санитарно-гигиенические услуги — следуйте указаниям по телефону.
Anti-nag-edad — обрезка daan nga mga saha.
Формативный — благодарить за корону, платить за санга нга nga nga nadaut ang way.
Если вы работаете, вы можете использовать секаторы. Галамитон girecomenda nga limpyohan una, ug ang mga pagputol pagkahuman sa pag-gunting kinahanglan isablig sa kahoy nga abo.
Тамбаг! Mahimo анг dugang nga pagpul-ong са yugto са pagsugod.Niini nga punto, mapuslanon nga tangtangon ang tanan nga huyang nga mga peduncle — nan ang pagpamiyuos labi ka labi ka halangdon.
Гизигуро на маламбо нга pagpamiyuos уг pagpreserba са матах нга порма в США ка гортензия куст нга Ю и Ми Любовь
Pagpangandam sa tingtugnaw
Все, что нужно, это опилки, uga nga dahon, торф или дагом (слой 6-7 см). Kini mapuslanon sa paglabog sa usa ka sapinit (на высоте 20 см).Из мешковины или спанбонда из мешковины или спанбонда. Sa Amihanan-Kasadpan, гортензии, покрытые хвойными гортензиями, в основном из мульчи.
Pag-anam
Ang Hydrangea Yu & Mi Love может продаваться по одному из следующих номеров:
в последний раз;
многослойность;
засыпка сапинита;
Опилки
Обрезки черенков.Gipamutol сила са pagsugod са ting-init, nga гибилин анг 2-3 nga pares nga dahon в стрелять. Стимулятор человеческого корня в большом количестве в США с корневым стимулятором или стимулятором роста в основном на всех уровнях. Didto sila nagtubo са kondisyon в теплице (Gitabonan са takup) в течение 1-1,5 тыс. лет. Pagkahuman ibalhin сила са Mga kaldero, уг са sunod нга tingpamulak gibalhin са танаман.
Урожай гортензии кинаанглан адунай лабинг менос 1 парижский нга химсог нга дахон, уг кинаханглан кини путлон са катунга
Песок от чумы
Hydrangea Yu & Mi Love любит грызунов от чумы.Pananglitan, анг dahon niini hapit dili maapektuhan са pulbos nga agup-op. Apan ang kadaot са ubang mga impeksyong грибков (pananglitan, abuhon nga pagkadunot, septoria, taya) wala iapil. Используйте профилактику, применяйте весенние фунгициды в течение дня (Максим, Хор, Скор и другие). Спрей-распылитель используется в качестве средства для ухода за timailhan сакит.
Вредители, паразитирующие на гортензиях:
тля;
левин;
кака нга кака;
танкоб;
укрощение сукод нга;
Чайфер;
совок
Gitabangan sila sa инсектицид nga makaya kini — Aktara, Aktellik, Angio, Match.
Тамбаг! Содержит инсектициды и фунгициды, которые можно использовать с народными средствами, например, с использованием гортензий и гортензий, а также с использованием растворов перманганата калия, растворов календулы, календулы, соды. Apan kung dili nila mahatagan ang gusto nga epekto, kinahanglan dayon nga matambalan kini sa mga kemikal.
Konklusyon
Ang Hydrangea Yu & Mi Love usa ka hilabong nga tanum nga adunay madanihon nga mga bulak nga delikado nga shadow. Kini nga kanunay nga tanum dili lisud katamnan, tungod kay ang mga pataba gigamit nga 3-4 nga beses matag panahon, nga igoigo alang sa malambo nga pagpamulak ug maayong pagbatok sa mga sakit ug peste.Busa, возможно, nga girecomenda анг США ка lahi са parehas nga kasinatian ug bag-ong hardinero.
Обзор Гортензии Ю и Ми Лав
Си Алла Петровна, 47 лет, Ростов-на-Дону. Ю и Ми Лав могут помочь вам, если вы не знаете, что делать, если вы хотите, чтобы они были сильны. Ug ganahan gyud ko sa mga litrato ug litrato, busa nakadesisyon ko nga mopalit daghang mga рассады. Kasagaran motubo Yu & Mi Gugma также играет на треке. Nahimo kini usa ka matahum nga koral.Ang Mga bulak nagahatag usa ka delikado nga kahumot, apan ang labing hinungdanon tan-awon nila kini kaayo, bisan mayaman. Тамара Григорьевна, 59 лет, живет в Саранске. Вы можете любить Ю и Ми Любовь — гортензия, которая живет в России в Танане, уг, в прошлом, дили кино лаби ка сагад. Apan анг США ка higala mihatag pipila ка саженцы в tingpamulak, mao nga nakahukom siya nga magtanum са balilihan са atubangan са балай — дили sila sobra. Кусты, которые растут, могут расти.Gipakaon nako ang 4 nga beses — са tingpamulak, kung moadto анг путот уг pagkahuman са ikaduhang katunga с ting-init. Igo na kini alang sa maayo kaayo nga pagpamulak. Карон Ю и Ми Любовь США с самыми последними лахи. Си Нина Игоревна, 52 года, родом из Балашихи. Приятно, когда вы наслаждаетесь Ю. и Ми Любовь на твердой основе, чтобы получить любовь на другом сайте. Nagahatag анг гортензии нга matahum нга bulak, уна нга пути, pagkahuman розы уг gamay нга лила.Sa Hulyo, namulak sila sa duha ka mga shadow, kini ang labing kaayo nga oras. Всегда особое внимание уделяйте любви Ю и Ми Лав — сама из гортензий, вкус которых невелик, а вода богата калием.
No related posts.

Гортензия Ю энд Ми Лав, описание и правила ухода

Описание гортензии Ю энд Ми Лав

Как посадить гортензию крупнолистную

Размножение

Правила ухода

Болезни и вредители

Это меня удивило

Питомник растений «Урожай» Вологда — Гортензия крупнолистная Ю энд Ми Перфекшн

Популярные сорта морозоустойчивых крупнолистных гортензий | Цветочная душа

Гортензия ремонтантная крупнолистная сорт навсегда вместе. Гортензия макрофильная (Ю&Ме) Фореве (Hyrdengea (You & Me) Forever)

границ | Молекулярная реконструкция старой родословной диплоидных и триплоидных генотипов Hydrangea macrophylla

Введение

Материалы и методы

Растительный материал

Фенотипирование

Проточная цитометрия

Подсчет хромосом

Экстракция ДНК и анализ маркеров

Результаты

Изменчивость фенотипа и уровня плоидности

С помощью дактилоскопии SSR выявлено до четырех различных генотипов в пределах одного сорта

Реконструкция родословной Wädenswil на молекулярном уровне

Различия в уровнях плоидности в пределах сорта из-за смешивания

Интерплоидные скрещивания в родословной Wädenswil

Обсуждение

Вклад авторов

Финансирование

Заявление о конфликте интересов

Благодарности

Ссылки

(PDF) Текущее и будущее распространение листопадного кустарника Hydrangea macrophylla в Китае по оценке MaxEnt

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Настройка браузера для приема файлов cookie

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Что сохраняется в файле cookie?

Полногеномные ассоциативные исследования типа соцветия и ремонтантности у Hydrangea macrophylla | Исследования в области садоводства

Аннотация

Введение

Материалы и методы

Растительный материал и генотипирование

Анализ генетической и популяционной структуры

Идентификация SNP, связанных с типом соцветия и ремонтантностью

Два вида соцветий Hydrangea macrophylla

Разработка и проверка маркера SNP с использованием подхода CAPS и GBS

Применение SNP в MAS

Результаты

Генетическое разнообразие и структура популяции

Анализ популяционной структуры панели сортов Hydrangea macrophylla на основе 5803 SNP, разработанных GBS

GWAS соцветийного типа и ремонтантности

Разработка и проверка маркера SNP

Маркерная селекция с использованием генотипирования KASP

Диаграмма генотипа для

Обсуждение

Выводы

Благодарности

Вклад авторов

Конфликт интересов

Каталожные номера

3 K

Корень гортензии — Первые китайские травы

Преимущества и информация о корнях гортензии

Hydrangea nga dako ang dahon nga Yu & Mi Love: pagtanum ug pag-atiman, mga pagsusi — Pagpananom

Содержание:

Paghulagway sa Hydrangea Yu & Mi Love

Dako ang dahon nga Hydrangea You and Me Love в большом количестве

Любовь к гортензии с гортензией Ю и Ми Любовь

Продажа саженцев гортензии и гортензии

Pagpili ug pag-andam посадочной площадки

Лагда са посадки

Pagpainum ug pagpakaon

Обрезка Ikaw ug Ako Gihigugma Hydrangea

Pagpangandam sa tingtugnaw

Pag-anam

Песок от чумы

Konklusyon

Обзор Гортензии Ю и Ми Лав

Добавить комментарий Отменить ответ

Рубрики